一种Cas蛋白在食用油鉴别中的应用制造技术

本发明专利技术涉及食用油鉴别技术领域，公开了一种Cas蛋白在食用油鉴别中的应用，所述Cas蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明专利技术的Cas蛋白具有较好的切割活性，对于不同食用油中含有的小分子构象敏感；小分子构象的细小差异可以通过cas蛋白的酶活信号体现出来，以荧光值作为标准，用于鉴别各种不同类别的食用油，解决目前市场上的食用油掺假问题。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及食用油鉴别，尤其涉及一种cas蛋白在食用油鉴别中的应用。

技术介绍

1、食用油是日常饮食的必需品，它能够为机体提供热量和脂肪酸，同时也能够促进脂溶性维生素的吸收。将廉价的植物油掺入到高价位的植物油中，这些行为对人们的健康造成了威胁。掺入的植物油通常在外观、物理性状上难以被辨别出来，常规的感官、物理、化学等检测手段已不能满足检测需求，而气相色谱、气相色谱-质谱联用等技术虽能实现对物质的多组分测定，但存在操作繁琐、仪器昂贵、应用范围有限等缺点。因此需要一种低成本、简单快速的检测方法对食用油是否掺假进行快速的鉴定。

2、crispr-cas系统最初来源于细菌和古菌中的一种天然免疫机制，用于抵御外来遗传物质，如质粒和噬菌体的入侵。近年来，crispr-cas系统作为一种革命性的基因编辑技术，在生物科学领域引起了广泛关注。该技术以其简便、高效的特点，为基因编辑、基因调控和核酸检测等领域提供了强大的工具。该系统通过利用cas核酸酶与crrna的引导，实现对特定dna序列的识别和切割，具有极高的靶点特异性。

3、crispr-cas本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种Cas蛋白在食用油鉴别中的应用，其特征在于，将Cas蛋白的溶液、靶标核酸的溶液、向导RNA的溶液、核酸探针的溶液、无核酸酶水和核糖核酸酶抑制剂分散在缓冲液中，再加入待鉴别食用油，孵育，进行荧光强度检测，将检测的荧光强度进行聚类分析；

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述核酸探针的序列为TTAATT，核酸探针的N端修饰有荧光基团，核酸探针的C端修饰有猝灭基团；所述荧光基团为5’-FAM；所述猝灭基团为3’-BHQ1。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述靶标核酸具有与向导RNA可结合的片段；

4.根据权利要求1所述的应用，其特...

【技术特征摘要】

1.一种cas蛋白在食用油鉴别中的应用，其特征在于，将cas蛋白的溶液、靶标核酸的溶液、向导rna的溶液、核酸探针的溶液、无核酸酶水和核糖核酸酶抑制剂分散在缓冲液中，再加入待鉴别食用油，孵育，进行荧光强度检测，将检测的荧光强度进行聚类分析；

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述核酸探针的序列为ttaatt，核酸探针的n端修饰有荧光基团，核酸探针的c端修饰有猝灭基团；所述荧光基团为5’-fam；所述猝灭基团为3’-bhq1。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述靶标核酸具有与向导rna可结合的片段；

4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述靶标核酸的序列如seq id no.2所示；

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【专利技术属性】
技术研发人员：吴丽娜，黄和，徐诗琦，沈伟健，段章群，
申请(专利权)人：南京师范大学，
类型：发明
国别省市：