一种制备外泌体的方法与应用技术

本发明专利技术涉及外泌体制备技术领域，具体公开了一种制备外泌体的方法与应用。本发明专利技术制备外泌体的方法包括：（1）将脱脂后的动物乳以醋酸‑醋酸钠溶液调节pH值至4.5‑4.6，分离获得乳清液；（2）将乳清液进行微滤获得透过液；（3）将透过液以NaCl水溶液进行洗滤，使外泌体截留液中蛋白质含量低于2μg/mL，渗透压为280‑310mOsm/L；（4）与醋酸‑醋酸钠溶液进行混合获得电泳液进行循环式自由流等电聚焦电泳。本发明专利技术的方法可更好地保证外泌体的结构完整性，整体收率高，且外泌体纯度高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及外泌体制备，具体地说，涉及一种制备外泌体的方法与应用。

技术介绍

1、外泌体以脂质双分子层作为保护保证了其内含物的稳定性，并作为一种很有前景的药物递送系统被广泛研究。乳源外泌体在疾病诊断、治疗、预防以及人和动物的生长发育等方面都具有重要的研究价值。其中，牛乳外泌体因其原料丰富且低廉、良好的生物相容性、安全性、低免疫原性、可口服递送等优点备受关注。牛奶样品容易获取，并且不会对奶牛产生负面影响，这为乳源外泌体的研究奠定了基础。外泌体参与多种生物功能并发挥重要作用，被认为是疾病诊断、治疗和预后的重要的生物标志物和药物载体，因此发展简单、高效、经济的外泌体分离、纯化、富集技术有助于疾病的早期诊断和精准治疗。

2、目前常用外泌体的分离方法有超速离心法、尺寸筛分的分离技术（超滤法和尺寸排阻法）、免疫亲和捕获法、试剂盒法和微流体技术等，这些分离方法得到的外泌体存在纯度和/或浓度不高等问题。离心法是最常用的方法，包括差速超速离心法和密度梯度离心法。差速超速离心法是最经典也是使用最多的外泌体提取方法，具有成本低、获得率高等优势，但是存在依赖仪器设备本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种制备外泌体的方法，以动物乳为原料进行外泌体的制备，其特征在于，包括：

2.根据权利要求1所述的制备外泌体的方法，其特征在于，步骤（1）中，所述醋酸-醋酸钠溶液中醋酸和醋酸钠的摩尔比为1：（1.6-1.62），醋酸根离子的浓度为0.065mol/L；

3.根据权利要求1或2所述的制备外泌体的方法，其特征在于，步骤（2）中，所述微滤时，微滤膜的孔径为0.6~1.0μm，温度为4-7℃，压力为2-6bar。

4.根据权利要求1或2所述的制备外泌体的方法，其特征在于，步骤（3）中，所述超滤时，超滤膜的孔径为200-400kDa，温度为4-7℃，压力为0...

【技术特征摘要】

1.一种制备外泌体的方法，以动物乳为原料进行外泌体的制备，其特征在于，包括：

2.根据权利要求1所述的制备外泌体的方法，其特征在于，步骤（1）中，所述醋酸-醋酸钠溶液中醋酸和醋酸钠的摩尔比为1：（1.6-1.62），醋酸根离子的浓度为0.065mol/l；

3.根据权利要求1或2所述的制备外泌体的方法，其特征在于，步骤（2）中，所述微滤时，微滤膜的孔径为0.6~1.0μm，温度为4-7℃，压力为2-6bar。

4.根据权利要求1或2所述的制备外泌体的方法，其特征在于，步骤（3）中，所述超滤时，超滤膜的孔径为200-400kda，温度为4-7℃，压力为0.05～0.2mpa；

5.根据权...

【专利技术属性】
技术研发人员：母智深，白茹，高增丽，于声波，刘宇，陈云，乌云，曹文慧，王彩霞，云洁，
申请(专利权)人：内蒙古蒙牛乳业集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：