【技术实现步骤摘要】
本申请涉及分子生物学，尤其涉及一种细胞裂解上清液及制备方法与应用。
技术介绍
1、无细胞蛋白表达是一种体外表达蛋白的技术，利用mrna作为模板，通过加入细胞裂解上清液以及其他必须物质构成蛋白质体外翻译体系，完成蛋白质的翻译，实现蛋白表达。在无内在细胞代谢或生化途径相冲突的情况下，膜蛋白、病毒蛋白和毒性蛋白以及通过细胞内过程进行快速蛋白水解的蛋白更容易表达。因此，无细胞蛋白表达可以作为一种较为理想的方法，用于合成传统方式难以表达和进行后续分析的蛋白质。
2、在制作细胞裂解上清液的过程中，细胞不可避免的要进行物理破碎或化学裂解等，这一过程会引起细胞内的应激反应，应激反应中影响蛋白质翻译的反应之一就是eif2α磷酸化，磷酸化的eif2α占据eif2b与正常eif2α互相作用的位点，阻断了eif2b介导的gdp与gtp的交换，阻止了翻译起始复合物的形成，使细胞裂解上清液的翻译活性降低。因此，降低或避免eif2α在细胞裂解上清液的制备过程中发生磷酸化反应是亟待解决的问题。
技术实现思路
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【技术保护点】
1.一种细胞裂解上清液，其特征在于，包括eIF2α突变体和GADD34截短体；所述eIF2α突变体为将eIF2α第52位氨基酸进行突变得到,所述GADD34截短体为将GADD34第1-240位氨基酸敲除得到。
2.根据权利要求1所述的细胞裂解上清液，其特征在于，所述eIF2α突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述eIF2α突变体的编码基因的核酸序列如SEQ ID NO.2所示。
3.根据权利要求1所述的细胞裂解上清液，其特征在于，所述GADD34截短体的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示，所述GADD34截短体的编码基因的核酸...
【技术特征摘要】
1.一种细胞裂解上清液，其特征在于，包括eif2α突变体和gadd34截短体；所述eif2α突变体为将eif2α第52位氨基酸进行突变得到,所述gadd34截短体为将gadd34第1-240位氨基酸敲除得到。
2.根据权利要求1所述的细胞裂解上清液，其特征在于，所述eif2α突变体的氨基酸序列如seq id no.1所示，所述eif2α突变体的编码基因的核酸序列如seq id no.2所示。
3.根据权利要求1所述的细胞裂解上清液，其特征在于，所述gadd34截短体的氨基酸序列如seq id no.3所示，所述gadd34截短体的编码基因的核酸序列如seq id no.4所示。
4.一种权利要求1至3任一项所述的细胞裂解上清液的制备方法，其特征在于，包括步骤：
5.根据权利要求4所述的细胞裂解上清液...
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