黄芪甲苷β-木糖苷酶突变体及其编码基因、重组载体、重组菌株、酶制剂和应用制造技术

本发明专利技术属于酶工程和生物技术领域，公开了一种黄芪甲苷β‑木糖苷酶突变体及其编码基因、重组载体、重组菌株、酶制剂和应用。所述突变体的氨基酸序列是由SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列的第23位、第699位、第712位中的至少一位进行突变，该黄芪甲苷β‑木糖苷酶突变体酶催化活性、水解转化率显著提高，使酶催化黄芪甲苷制备环黄芪醇‑6‑O‑葡萄糖苷的生产效率显著提高，具有较好的工业化潜能。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及酶工程和生物，具体地，涉及一种黄芪甲苷β-木糖苷酶突变体及其编码基因、重组载体、重组菌株、酶制剂以及它们在水解黄芪甲苷为环黄芪醇-6-o-葡萄糖苷中的应用。

技术介绍

1、β-木糖苷酶是来自gh3家族的水解酶，其能够水解β-d-木糖苷末端非还原木糖残基的β-1，4-木糖苷键，并释放出木糖。其主要存在于细菌和真菌之中，常见于丝状真菌。β-木糖苷酶不仅具有转糖苷功能；还具有催化糖苷键断裂、高效水解糖基的能力。基于其功能的多样性，β-木糖苷酶在食品、农业、工业、医药和环保方面已得到广泛应用，如在能源领域中，可与纤维素酶和果胶酶配合使用，从植物半纤维素中提取的木糖生产生物乙醇。在食品领域中β-木糖苷酶帮助啤酒生产，降低啤酒的浊度。β-木糖苷酶也可以用于转化许多具有生物活性的化合物，从而获得更具有价值、更容易利用的活性物质，如人参皂苷rb3、三七皂苷、朝藿定b和花青素等。

2、原核表达系统由于缺乏翻译后修饰功能而导致所得蛋白往往不具有活性，而毕赤酵母是目前继大肠杆菌之后最常用的真核表达系统，其遗传背景较为清晰，且具有翻译后修饰系统，并在培养本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种黄芪甲苷β-木糖苷酶突变体，其特征在于，该黄芪甲苷β-木糖苷酶突变体为将具有SEQ ID NO.1所示氨基酸序列的第23位、第699位、第712位中的至少一位进行突变。

2.根据权利要求1所述的黄芪甲苷β-木糖苷酶突变体，其特征在于，该黄芪甲苷β-木糖苷酶突变体为将具有SEQ ID NO.1所示氨基酸序列的酶进行(1)-(3)中至少一种所述的突变；

3.一种编码黄芪甲苷β-木糖苷酶突变体的基因，其特征在于，该基因具有编码权利要求1或2所述的黄芪甲苷β-木糖苷酶突变体的核苷酸序列；

4.一种重组载体，其特征在于，所述重组载体含有权利要求3所述的基...

【技术特征摘要】

1.一种黄芪甲苷β-木糖苷酶突变体，其特征在于，该黄芪甲苷β-木糖苷酶突变体为将具有seq id no.1所示氨基酸序列的第23位、第699位、第712位中的至少一位进行突变。

2.根据权利要求1所述的黄芪甲苷β-木糖苷酶突变体，其特征在于，该黄芪甲苷β-木糖苷酶突变体为将具有seq id no.1所示氨基酸序列的酶进行(1)-(3)中至少一种所述的突变；

3.一种编码黄芪甲苷β-木糖苷酶突变体的基因，其特征在于，该基因具有编码权利要求1或2所述的黄芪甲苷β-木糖苷酶突变体的核苷酸序列；

4.一种重组载体，其特征在于，所述重组载体含有权利要求3所述的基因；

5.一种重组菌株，其特征在于，所述重组菌株含有权利要求3所述的基因或者权利要求4所述的重组载体；

6.一种黄芪甲苷β-木糖苷酶突变体的制备方法，其特征在于，该制备方法包括：将权利要求5所述的重组菌株接种...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑媛元，刘宇，薛锋，徐晴，
申请(专利权)人：南京师范大学，
类型：发明
国别省市：