柳树自然抗性相关巨噬细胞蛋白SsNramp1在镉污染土壤修复基因工程中的应用制造技术

本发明专利技术公开一种柳树自然抗性相关巨噬细胞蛋白SsNramp1在镉污染土壤修复基因工程中的应用。本发明专利技术中的柳树SsNramp1具有转运镉的活性，且SsNramp1是定位在细胞质膜上的膜转运蛋白。利用根癌农杆菌介导的遗传转化技术和35S强启动子启动SsNramp1在烟草中表达该蛋白后，镉暴露环境下，与野生型相比，转SsNramp1基因的烟草生长未受到显著影响，而根系镉浓度增加了64％‑128％，地上部镉浓度增加了35％‑51％。本发明专利技术说明柳树SsNramp1在对镉污染土壤修复工程具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及基因工程技术，具体涉及用于镉污染土壤修复的柳树自然抗性相关巨噬细胞蛋白ssnramp1及其应用。

技术介绍

1、土壤镉污染是全球面临的重大环境问题，严重危害着土壤质量和人体健康。植物修复是利用植物固定、挥发、过滤和提取等方式去除土壤重金属的过程，因其成本低、对环境友好、可实现原位修复，在土壤重金属污染修复中得到了广泛应用。柳树生长迅速、适应性强、生物量大，同时具有很高的镉吸收能力，有研究表明，柳树能够有效移除土壤中30-50％的镉，目前已广泛应用在国内外镉污染土壤修复工程中。遗传转化是一种高效靶向性的植物育种手段，通过基因工程手段增强柳树镉吸收能力具有巨大潜力。迄今为止，负责柳树镉吸收过程中关键基因及其功能尚不明确，这成为进一步提高柳树修复效率亟需突破的瓶颈。因此挖掘并解析负责柳树镉吸收关键基因的生物学功能，既能明确柳树吸收镉的分子机制，又为利用基因工程提高柳树修复能力提供重要的基因资源，具有重要的实践潜力。

技术实现思路

1、专利技术目的：为了解决上述技术问题，本专利技术提供柳树自然抗性相关巨本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.用于镉污染土壤修复的柳树自然抗性相关巨噬细胞蛋白基因SsNramp1，其特征在于，所述SsNramp1基因CDS序列如SEQ ID NO 1所示。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，用于所述柳树SsNramp1表达模式分析，以柳树SsEF1a为内参基因，设计引物序列为：

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，用于所述柳树SsNramp1酵母异源功能验证，对SsNramp1编码区序列进行限制性酶切位点分析，设计含有Hind III和EcoR I两个酶切位点的PCR扩增引物为：

4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，用于所述SsNram...

【技术特征摘要】

1.用于镉污染土壤修复的柳树自然抗性相关巨噬细胞蛋白基因ssnramp1，其特征在于，所述ssnramp1基因cds序列如seq id no 1所示。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，用于所述柳树ssnramp1表达模式分析，以柳树ssef1a为内参基因，设计引物序列为：

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，用于所述柳树ssnramp1酵母异源功能验证，对ssnramp1编码区序列进行限制性酶切位点分析，设计含有hind iii和ecor i两个酶切位点的pcr扩增引物为：

4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，用于所述ssnramp1亚细胞定位分析，对ssnramp1基因编码区进行限制性酶切位点分析，设计含有hind iii...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭楠，高菲，陶俊，
申请(专利权)人：扬州大学，
类型：发明
国别省市：