【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医学领域，具体涉及mavs作为线粒体稳定剂在延缓衰老中的应用。
技术介绍
1、mavs是线粒体抗病毒信号蛋白，定位在线粒体膜上，在抗rna病毒信号应答过程中发挥重要作用。在天然免疫经典通路中，mavs在接收上游信号后，会形成多聚体，进而招募下游tbk1/ikkε以及iκb复合物组分，促进转录因子irf3和nfκb的磷酸化，及进一步转位入核，启动一系列抗病毒因子的转录表达，起始抗病毒天然免疫应答。mavs广泛存在于线粒体膜上，既往报道主要集中在mavs调节天然免疫应答上，而mavs是否与线粒体其他相关蛋白互作共同调控线粒体功能尚缺乏细致的研究。
2、衰老是身体机能逐渐衰退的过程，也是心血管疾病、帕金森综合征等一系列疾病的重大风险因素。干细胞具有自我更新能力和分化潜能，在组织器官修复和再生过程中扮演重要角色。间充质干细胞(msc)是一类成体干细胞，遍布全身多个组织器官，可以进行自我更新，并且具有向成骨、成软骨和成脂细胞等多系分化的能力，具有重要的临床应用价值。而干细胞的耗竭是衰老过程的一大特征，也是引起骨质疏松、成人早衰症的重要诱因。
3、线粒体失调也是衰老的十二大标志物之一，并且与干细胞耗竭及细胞衰老密不可分。目前，调控干细胞衰老的关键线粒体蛋白还未得到详细研究。
技术实现思路
1、本专利技术的目的为延缓衰老。
2、本专利技术首先保护蛋白质或促进蛋白质活性和/或表达量的物质在制备产品中的应用；所述产品的功能为b1)、b2)和b3)
3、所述蛋白质为mavs蛋白或mavs互作蛋白。
4、上述应用中，所述mavs互作蛋白可为opa1蛋白。
5、上述应用中，所述延缓衰老可为延缓细胞衰老。所述细胞可为hmsc。
6、上述应用中，所述延缓衰老可体现为sa-β-gal阳性细胞比例减少、端粒长度增加、ki67阳性细胞比例增加、s期细胞比例增加、单克隆形成能力提高、dna损伤程度减少、产生ros减少和/或细胞核减小。
7、上述应用中，所述改善线粒体功能可体现为线粒体mass下降、mtdna拷贝数下降、线粒体膜电势增加、mtros下降和/或氧化呼吸速率增加。
8、上述应用中，所述维持线粒体稳定性可体现为线粒体数量减少、线粒体面积增加、线粒体纵横比增加和/或异常线粒体减少。
9、本专利技术还保护抑制mavs蛋白或mavs互作蛋白活性和/或表达量的物质在制备产品中的应用；所述产品的功能为c1)、c2)和c3)中的至少一种：c1)促进衰老；c2)抑制线粒体功能；c3)线粒体稳定性失调。
10、上述应用中，所述促进衰老可体现为sa-β-gal阳性细胞比例增加、端粒长度缩短、ki67阳性细胞比例减少、s期细胞比例减少、单克隆形成能力减弱、dna损伤程度增加、产生ros增加和/或细胞核增大。
11、上述应用中，所述抑制线粒体功能可体现为线粒体mass增加、mtdna拷贝数增加、线粒体膜电势下降、mtros增加和/或氧化呼吸速率下降。
12、上述应用中，所述线粒体稳定性失调可体现为线粒体数量增加、线粒体面积减小、线粒体纵横比减小和/或异常线粒体增加。
13、本专利技术还保护抑制mavs蛋白或mavs互作蛋白活性和/或表达量的物质在制备提前衰老鼠模型中的应用；所述提前衰老鼠模型可具有如下a1)至a17)中至少一种表型：a1)sa-β-gal阳性细胞比例增加；a2)端粒长度缩短；a3)ki67阳性细胞比例减少；a4)s期细胞比例减少；a5)单克隆形成能力减弱；a6)dna损伤程度增加；a7)产生ros增加；a8)细胞核增大；a9)线粒体mass增加；a10)mtdna拷贝数增加；a11)线粒体膜电势下降；a12)mtros增加；a13)氧化呼吸速率下降；a14)线粒体数量增加；a15)线粒体面积减小；a16)线粒体纵横比减小；a17)异常线粒体增加。
14、上述任一所述的应用中，所述mavs互作蛋白可为opa1蛋白。
15、上述任一所述的应用中，所述抑制mavs蛋白或mavs互作蛋白活性和/或表达量的物质可为grna；grna的核苷酸序列为5’-attgcggcagatatacttat-3’或5’-gcagaagttcttcctgaagt-3’。其中核苷酸序列为5’-attgcggcagatatacttat-3’的grna可以抑制mavs蛋白活性和/或表达量；核苷酸序列为5’-gcagaagttcttcctgaagt-3’的grna可以抑制mavs互作蛋白活性和/或表达量。即所述抑制mavs蛋白活性和/或表达量的grna的核苷酸序列如seq id no:3所示；所述抑制mavs互作蛋白活性和/或表达量的grna的核苷酸序列如seq id no:4所示。
16、上述任一所述的抑制mavs蛋白或mavs互作蛋白活性和/或表达量的物质也属于本专利技术的保护范围。
17、本专利技术还保护一种mavs蛋白缺失的多能干细胞模型，可为mavs蛋白缺失的hesc、hmsc或hnsc；所述多能干细胞模型是利用crispr/cas9基因编辑系统编辑mavs基因获得；crispr/cas9基因编辑系统中的grna的核苷酸序列如seq id no:3所示。
18、所述mavs蛋白缺失的多能干细胞模型在探究mavs在调控人干细胞衰老过程中的潜在机制，并为未来在此过程中开发潜在的衰老干预方法提供科学借鉴。
19、本专利技术首先在人胚胎干细胞(hesc)中进行了mavs基因的编辑，得到了mavs蛋白缺失的hesc，进一步利用干细胞定向分化技术，将mavs蛋白缺失的hesc分化为人间充质干细胞(hmsc)和人神经干细胞(hnsc)，利用一系列遗传学、细胞生物学、分子生物学、生物化学等多种检测手段，辅以液相色谱-串联质谱(lc-ms/ms)和转录组测序(rna-seq)等组学检测方法，结合生物信息学分析mavs调控人干细胞衰老的分子机制。实验证明，mavs蛋白的缺失加速了人间充质干细胞的衰老。同时，本专利技术揭示了mavs可以与opa1互作来维持线粒体功能，从而延缓人间充质干细胞的衰老。本专利技术阐述了mavs-opa1-线粒体轴线在调控人间充质干细胞衰老过程中的重要作用。本专利技术具有重要的应用价值。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.蛋白质或促进蛋白质活性和/或表达量的物质在制备产品中的应用；所述产品的功能为B1)、B2)和B3)中的至少一种：B1)延缓衰老；B2)改善线粒体功能；B3)维持线粒体稳定性；
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述MAVS互作蛋白为OPA1蛋白。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：
4.抑制MAVS蛋白或MAVS互作蛋白活性和/或表达量的物质在制备产品中的应用；所述产品的功能为C1)、C2)和C3)中的至少一种：C1)促进衰老；C2)抑制线粒体功能；C3)线粒体稳定性失调。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：
6.抑制MAVS蛋白或MAVS互作蛋白活性和/或表达量的物质在制备提前衰老鼠模型中的应用；所述提前衰老鼠模型具有如下A1)至A17)中至少一种表型：A1)SA-β-gal阳性细胞比例增加；A2)端粒长度缩短；A3)Ki67阳性细胞比例减少；A4)S期细胞比例减少；A5)单克隆形成能力减弱；A6)DNA损伤程度增加；A7)产生ROS增加；A8)细胞核增大；A9)线粒体mass增加；A10)
7.根据权利要求4至6任一所述的应用，其特征在于：所述MAVS互作蛋白为OPA1蛋白。
8.根据权利要求4至6任一所述的应用，其特征在于：所述抑制MAVS蛋白或MAVS互作蛋白活性和/或表达量的物质为gRNA；所述抑制MAVS蛋白活性和/或表达量的gRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示；所述抑制MAVS互作蛋白活性和/或表达量的gRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示。
9.权利要求6至8中任一所述的抑制MAVS蛋白或MAVS互作蛋白活性和/或表达量的物质。
10.一种MAVS蛋白缺失的多能干细胞模型，为MAVS蛋白缺失的hESC、hMSC或hNSC；
...【技术特征摘要】
1.蛋白质或促进蛋白质活性和/或表达量的物质在制备产品中的应用；所述产品的功能为b1)、b2)和b3)中的至少一种：b1)延缓衰老；b2)改善线粒体功能；b3)维持线粒体稳定性；
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述mavs互作蛋白为opa1蛋白。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：
4.抑制mavs蛋白或mavs互作蛋白活性和/或表达量的物质在制备产品中的应用；所述产品的功能为c1)、c2)和c3)中的至少一种：c1)促进衰老；c2)抑制线粒体功能；c3)线粒体稳定性失调。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：
6.抑制mavs蛋白或mavs互作蛋白活性和/或表达量的物质在制备提前衰老鼠模型中的应用；所述提前衰老鼠模型具有如下a1)至a17)中至少一种表型：a1)sa-β-gal阳性细胞比例增加；a2)端粒长度缩短；a3)ki67阳性细胞比例减少；a4)s期细胞比例减少；a5)单克隆形成能力减弱；a6)dna损...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘光慧，张维绮，曲静，王翠，杨宽，刘晓倩，
申请(专利权)人：中国科学院动物研究所，
类型：发明
国别省市：
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