醋酸锂-聚乙二醇介导的原生质体脂质纳米颗粒递送方法技术

技术编号:43934264 阅读:13 留言:0更新日期:2025-01-07 21:27
本发明专利技术公开了一种醋酸锂‑聚乙二醇介导的原生质体脂质纳米颗粒递送方法,属于生物技术领域。本发明专利技术首次通过在原生质体转化液MMG中添加LiAc,并通过提高钙离子(Ca<supgt;2+</supgt;)浓度改良PEG配方,成功向油棕、椰子等棕榈作物原生质体中递送了脂质纳米颗粒(LNP),该型纳米颗粒中包裹增强型绿色荧光蛋白(eGFP)的mRNA,可不需启动子直接在原生质体内以mRNA为模板表达荧光蛋白。利用本方法将LNP递送至棕榈作物原生质体后经激光共聚焦显微镜观察检测到了绿色荧光信号。该方法可用于直接向棕榈作物原生质体内递送目标基因mRNA,也可递送CRISPR/Cas系统蛋白等用于基因编辑技术研究。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物,具体涉及一种醋酸锂(liac)-聚乙二醇(peg-4000)介导的适用油棕、椰子、槟榔等棕榈作物原生质体的脂质纳米颗粒(lnp)递送方法及其应用。


技术介绍

1、油棕(学名: elaeis guineensis jacq.)、椰子(学名: cocos nucifera l.)等棕榈作物是棕榈科乔木,主要产地分布在亚洲的马来西亚、印度尼西亚、非洲的西部和中部、南美洲的北部和中美洲。目前椰子、油棕、槟榔等棕榈作物的新品种选育仍然是以传统的杂交育种为主,存在效率低、周期长的问题,严重地阻碍了高产、优质育种的培育进程。随着生物技术的发展,以原生质体为主要平台的遗传转化、基因编辑等分子技术在多种作物中的应用促进了新育种技术的发展,但椰子、油棕、槟榔等棕榈作物的相关研究尚待开展。

2、植物原生质体是由除细胞壁以外的细胞膜、细胞质、细胞核和细胞器等组成的细胞形态结构单元,具有快速表达外源遗传物质的特点。因此,基于原生质体的瞬时表达己经广泛应用到基因研究的各个领域本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.醋酸锂-聚乙二醇介导的脂质纳米颗粒递送方法在原生质体转化中的应用,所述原生质体为棕榈作物的原生质体。

2.一种醋酸锂-聚乙二醇介导的用于棕榈作物原生质体的脂质纳米颗粒递送方法,其特征在于,包括以下步骤:

3.如权利要求2所述的递送方法,其特征在于,含Ca2+的PEG-4000溶液配制方法为:

4.如权利要求2所述的递送方法,其特征在于,所述的脂质纳米颗粒是包裹增强型绿色荧光蛋白mRNA的脂质纳米颗粒。

5.权利要求4所述的脂质纳米颗粒在棕榈作物原生质体转化中的应用。

【技术特征摘要】

1.醋酸锂-聚乙二醇介导的脂质纳米颗粒递送方法在原生质体转化中的应用,所述原生质体为棕榈作物的原生质体。

2.一种醋酸锂-聚乙二醇介导的用于棕榈作物原生质体的脂质纳米颗粒递送方法,其特征在于,包括以下步骤:

3.如权利要求2所述的递送方法...

【专利技术属性】
技术研发人员:张大鹏王永石鹏李志瑛尹敏慧于群何香满
申请(专利权)人:中国热带农业科学院三亚研究院
类型:发明
国别省市:

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