【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本公开整体上涉及制备用于灌流细胞培养过程的哺乳动物细胞的方法,所述方法改善细胞的生长和生产力。更具体地,本公开涉及改进的细胞培养方法,其中使哺乳动物细胞经历一个或多个灌流程序,其涉及用连续流动离心机产生固相和液相,以及利用该至少固相的一部分以维持、保持和/或启动新的细胞培养物。本公开还涉及灌流生物反应器系统及其部件。
技术介绍
1、尽管该领域在过去几十年取得了重大进展,但涉及哺乳动物细胞的工业规模培养和其中产物生产的生物制造过程仍然充满重大挑战。例如,用于此类过程的典型生物反应器系统必须保持无菌、封闭的环境,这使得新鲜细胞培养基的添加和用过的细胞培养基的去除成为问题。因此,在分批或分批补料过程条件下生长的细胞,当其细胞培养基耗尽重要组分时,通常会面临养分限制。此外,细胞培养物中不需要的代谢副产物的积聚可能进一步限制生长,并可能对所需的产物造成损害。因此,仍然强烈需要改进的细胞培养系统及方法,其可通过解决这些及其他限制来增加生长和提高生产力。
2、与细菌细胞培养物相比,哺乳动物细胞培养物通常具有较低的生产速率并产生较低的生产产
...【技术保护点】
1.一种用于培养哺乳动物细胞的方法,所述方法包括:
2.根据权利要求1所述的方法,其中所述灌流速率的范围为2至6VVD。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其中所述灌流程序包括以恒定方式增大或减小所述灌流速率。
4.根据权利要求1或2所述的方法,其中所述灌流程序包括以可变方式增大或减小所述灌流速率。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法,其中所述灌流程序在范围为1至7天的时间段内连续地进行。
6.根据权利要求1至4中任一项所述的方法,其中所述灌流程序在范围为1至7天的时间段内以半连续的方式进行。
< ...【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种用于培养哺乳动物细胞的方法,所述方法包括:
2.根据权利要求1所述的方法,其中所述灌流速率的范围为2至6vvd。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其中所述灌流程序包括以恒定方式增大或减小所述灌流速率。
4.根据权利要求1或2所述的方法,其中所述灌流程序包括以可变方式增大或减小所述灌流速率。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法,其中所述灌流程序在范围为1至7天的时间段内连续地进行。
6.根据权利要求1至4中任一项所述的方法,其中所述灌流程序在范围为1至7天的时间段内以半连续的方式进行。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法,其中所述连续流动离心机包括碟式堆叠转筒。
8.根据权利要求1至6中任一项所述的方法,其中所述连续流动离心机包括管状转筒。
9.根据权利要求1至8中任一项所述的方法,其中所述连续流动离心机具有范围为3,000至10,000rpm的操作速度。
10.根据权利要求1至9中任一项所述的方法,其中所述连续流动离心机包括可灭菌部件。
11.根据权利要求1至10中任一项所述的方法,其中所述连续流动离心机包括可弃式部件。
12.根据权利要求1至11中任一项所述的方法,其中所述连续流动离心机具有范围为1,000m2至200,000m2的σ值。
13.根据权利要求1至12中任一项所述的方法,其中在完成离心程序之后,所述细胞培养物具有大于或等于85%的活力百分比。
14.根据权利要求5至13中任一项所述的方法,其中所述细胞培养物在1至7天的时间段内保持大于或等于85%的活力百分比。
15.根据权利要求1至14中任一项所述的方法,其中所述哺乳动物细胞包括重组哺乳动物细胞。
16.根据权利要求15所述的方法,其中所述重组哺乳动物细胞包括重组中华仓鼠卵巢(cho)细胞。
17.根据权利要求16所述的方法,其中在完成所述离心程序之后,所述细胞培养物具有小于或等于4g/l的乳酸根浓度。
18.根据权利要求15至17中任一项所述的方法,其中所述重组哺乳动物细胞生产分泌产物。
19.根据权利要求15所述的方法,其中所述分泌产物包括重组蛋白质。
20.根据权利要求19所述的方法,其中所述重组蛋白质为抗体。
21.根据权利要求1至20中任一项所述的方法,其中所述培养器皿具有大于或等于80l的工作体积。
22.根据权利要求1至21中任一项所述的方法,其中所述培养器皿具有范围为100l至30,000l的总体积。
23.根据权利要求1至21中任一项所述的方法,其中所述培养器皿具有范围为5,000l至30,000l的总体积。
24.根据权利要求1至21中任一项所述的方法,其中所述培养器皿具有范围为100l至6,000l的总体积。
25.根据权利要求1至24中任一项所述的方法,其进一步包括将所述细胞培养物的至少一部分转移至不同的培养器皿以启动第二细胞培养物。
26.根据权利要求25所述的方法,其中所述第二细胞培养物具有范围为0.1%至10%pcv的初始细胞密度。
27.根据权利要求1至26中任一项所述的方法,其进一步包括将所述细胞培养物的至少一部分转移至生产培养器皿,以启动具有范围为0.1%至10%pcv的起始细胞密度的生产培养物。
28.根据权利要求...
【专利技术属性】
技术研发人员:R·C·亨德利,M·W·莱尔德,J·J·小比尔,C·J·多德,
申请(专利权)人:基因泰克公司,
类型:发明
国别省市:
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