一种胶质瘤病人来源的原代细胞（PDC）培养方法技术

本发明专利技术涉及原代细胞(PDC)培养相关技术领域，尤其涉及一种胶质瘤病人来源的原代细胞(PDC)培养方法，通过Swiss3T3‑J2细胞培养、条件培养基制备、脑肿瘤组织预处理和原代肿瘤细胞消化和培养等一系列步骤，使用高能电子(E)，X射线(X)和钴‑60放射源(<supgt;60</supgt;Co)辐照后的成纤维细胞产生的条件培养基培养原代人源肿瘤细胞，通过筛选和优化培养条件，可以最有效地保留亲本肿瘤关键特征的培养条件和建模流程，并在细胞分子水平、细胞表型和动物颅内肿瘤模型等层面考察PDC是否保留亲本肿瘤的关键特征。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及原代细胞(pdc)培养相关，尤其涉及一种胶质瘤病人来源的原代细胞(pdc)培养方法。

技术介绍

1、目前已有的胶质瘤细胞系难以真实反映病人的肿瘤特征，主要体现在无法保留肿瘤的转录特征、基因突变和瘤内异质性等，永生化的细胞系限制了研究者对胶质瘤的发生发展进行深入理解和制定有效的治疗策略，因此，构建能够更好的代表胶质瘤病人肿瘤特征的原代细胞模型，基于原代细胞发展原位动物模型尤为重要，原代细胞和动物模型理论上能够更准确地模拟病人的肿瘤，包括肿瘤的异质性和微环境，可为研究胶质瘤的发病机制、药物靶标及开发新疗法提供强有力的工具；

2、目前已有的胶质瘤原代细胞的培养方法主要集中在对肿瘤干细胞的培养，包括单层培养和肿瘤球体培养；但传统的培养方法需要大量时间来建立，使用的外源性的egf，bfgf选择性的扩增了肿瘤干细胞，无法保留其他肿瘤细胞亚群，病人来源的肿瘤组织异种移植模型(pdx)能更好地模拟肿瘤组织的瘤内异质性，然而其移植效率低下，肿瘤生长时间从2到11个月不等，不适合临床个性化治疗测试，近几年，胶质瘤的类器官模型(pdo)逐步发展，pdo本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种胶质瘤病人来源的原代细胞(PDC)培养方法，其特征在于，具体步骤如下：

2.根据权利要求1所述的一种胶质瘤病人来源的原代细胞(PDC)培养方法，其特征在于：所述S11中J2细胞容易出现生长抑制，传代时生长密度不能超过4×104/cm2。

3.根据权利要求1所述的一种胶质瘤病人来源的原代细胞(PDC)培养方法，其特征在于：所述S12中PBS洗一遍贴壁细胞的条件为室温下用0.05％的胰蛋白酶/EDTA溶液消化1分钟。

4.根据权利要求1所述的一种胶质瘤病人来源的原代细胞(PDC)培养方法，其特征在于：所述S22中F培养基配方(括号中为体积或终浓度)...

【技术特征摘要】

1.一种胶质瘤病人来源的原代细胞(pdc)培养方法，其特征在于，具体步骤如下：

2.根据权利要求1所述的一种胶质瘤病人来源的原代细胞(pdc)培养方法，其特征在于：所述s11中j2细胞容易出现生长抑制，传代时生长密度不能超过4×104/cm2。

3.根据权利要求1所述的一种胶质瘤病人来源的原代细胞(pdc)培养方法，其特征在于：所述s12中pbs洗一遍贴壁细胞的条件为室温下用0.05％的胰蛋白酶/edta溶液消化1分钟。

4.根据权利要求1所述的一种胶质瘤病人来源的原代细胞(pdc)培养方法，其特征在于：所述s22中f培养基配方(括号中为体积或终浓度)：dmem完全培养基(373ml)，f12nutrient mix(125ml)，hydrocortiso...

【专利技术属性】
技术研发人员：闫超，孟晓露，徐璐楠，
申请(专利权)人：南京大学，
类型：发明
国别省市：