巨噬细胞介导的疾病的治疗和诊断制造技术

本发明专利技术涉及一种治疗或监测／诊断由活化的巨噬细胞介导的疾病状况的方法。该方法包括对患有巨噬细胞介导的疾病状况的患者施用有效量的包含通式为Ａ＜ｓｕｂ＞ｂ＜／ｓｕｂ＞－Ｘ的偶联物或复合物的组合物的步骤，其中基团Ａ＜ｓｕｂ＞ｂ＜／ｓｕｂ＞包含能与活化的巨噬细胞结合的配体，以及，在该偶联物用于治疗上述疾病状况时，基团Ｘ包含免疫原、细胞毒素、或能够改变巨噬细胞功能的化合物；在该偶联物用于监测／诊断上述疾病状况时，基团Ｘ包含成像剂。该方法可用于治疗患有选自类风湿性关节炎、溃疡性结肠炎、克隆氏病、炎症、感染、骨髓炎、动脉粥样硬化、器官移植物排斥、肺纤维化、结节病、系统性硬化的疾病的患者。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种治疗和监测由活化的巨噬细胞介导的疾病状况的方法。更具体地说，将与活化的巨噬细胞结合的配体和成像剂，或免疫原，细胞毒素，或改变巨噬细胞功能的试剂形成复合物，施用于患病的宿主，用以诊断和/或治疗巨噬细胞介导的疾病。一般，巨噬细胞是首先遇到外来病原体的细胞，因此，它们在免疫应答中起重要的作用。然而，在某些情况下，活化的巨噬细胞可以有助于疾病的病理生理学。活化的巨噬细胞通过水解和氧化，侵袭外来病原体，造成其降解，从而非特异地将在巨噬细胞内的该外来病原体吞噬并杀灭。降解蛋白的肽展示在巨噬细胞的表面，并在该表面被T细胞所识别，同时可以与在B细胞表面的抗体直接相互作用，引起T和B细胞的活化并进一步刺激免疫应答。类风湿性关节炎(RA)是一种全身性的疾病，其特征是慢性炎性的滑膜炎，通常涉及外周关节。滑膜的炎症引起软骨变质和对骨骼的侵蚀，随之破坏了关节的完整。在2/3以上的RA患者中，发现了与IgG的Fc区反应的自身抗体类风湿因子，表明RA含有自身免疫成分。在全世界，高达2％的人口患有RA，其中80％的RA患者在35-50岁的年龄发病。RA的临床症状包括关节疼痛、肿胀、和触痛，造成运动受限制、虚弱、疲乏，以及体重减轻。RA是一种全身性的疾病，因此，患者还有关节外症状，尤其是类风湿因子滴度高的患者。这些症状包括含有坏死物质的内区，巨噬细胞的中间区和颗粒组织外区的类风湿结节、肌肉萎缩、骨质疏松、肺纤维化、和类风湿脉管炎，它可以引起皮肤溃疡、手指坏疽、或神经血管疾病。类风湿滑膜炎是RA的特征，它可引起滑膜衬细胞数的增加、滑膜衬细胞的增生和肥大、微血管的损伤、水肿、以及，例如T细胞、巨噬细胞和树突细胞的细胞浸润。类风湿滑膜炎的特征在于免疫细胞分泌产物的存在，例如由T淋巴细胞所分泌的因子，包括IL-2、IFN-δ、IL-6、IL-10、GM-CSF和TGFα和β，以及由活化的巨噬细胞所分泌的因子，包括IL-1、IL-6、IL-8、IL-10、GM-CSF、巨噬细胞CSF和TGFβ。这些细胞因子的产生看来解释了很多RA的病理学，包括滑膜的炎症、滑膜细胞增殖、软骨和骨的变质、以及该疾病的全身症状。RA可以用各种治疗方法来进行治疗，包括物理治疗、休息、和用夹板固定。治疗试剂也可以用来治疗RA，包括用阿斯匹林和非甾体类抗炎药，以控制局部的炎症。但是，这些试剂对疾病的疗效很小，而且具有毒性副作用。减轻疾病的抗风湿药物，例如α-青霉胺和柳氮磺胺吡啶也可以用来治疗RA，但从这些药物获得疗效要迟缓数周或数月，而且这些药物有毒性副作用。免疫抑制和细胞毒性药物抑制某些患者的症状，但是同时产生毒性。也曾使用过关节内的糖皮质素，但只是短暂缓解。因此，必须建立一种毒性降低的、对RA及其他由活化的巨噬细胞所引起或恶化的疾病的治疗有效的新治疗方法。叶酸受体(FR)是38KDa的GPI锚定蛋白，它以高亲和性(＜1nM)与维生素叶酸结合。在与受体结合后，迅速的胞吞作用将维生素送入细胞内，并在细胞内转存在低pH的核内体区室内。重要的是，小分子、蛋白、甚至脂质体与叶酸的共价偶联并不改变维生素与叶酸受体结合的能力，因此，叶酸-药物偶联物很容易通过受体介导的胞吞作用而进入细胞。由于大多数细胞使用不相关的还原型叶酸载体(RFC)来获得必需的叶酸，叶酸受体的表达仅限于少数几种类型的细胞中。除了肾脏和胎盘以外，正常组织的FR表达水平很低或检测不到。但是，很多恶性组织，包括卵巢癌、乳房癌、支气管癌、和脑癌的受体表达水平明显增高。实际上，估计有95％的卵巢癌过量表达叶酸受体。最近报道，叶酸受体的非上皮同工型FRβ在活化的(而不是静息的)滑膜巨噬细胞中表达。因此，申请人曾试图利用可能能够改变活化的巨噬细胞功能的叶酸连接的化合物，来治疗巨噬细胞介导的疾病。例如，申请人已发现，在关节炎的动物中，叶酸连接的免疫原可以用来改变宿主对炎症部位活化的巨噬细胞的免疫应答，以减少巨噬细胞和减轻关节炎。闪烁照像成像剂的灵敏度比核磁共振成像(MRI)造影剂高百万倍以上，而且，通过其导向病变特异的细胞标记，可提高其选择性。实际上，放射性同位素99mTc已用非特异性IgG、抗CD4抗体、CD11b/CD14-糖脂肽配体、和E选择蛋白结合肽递送到关节炎组织中。用这样的放射成像剂进行的临床前研究已明显地显示出使关节炎组织在体内成像的价值，但是，目前在成像剂的选择上还不是最佳的，而且目前的化合物中，没有一种是只导向活化巨噬细胞的。鉴于巨噬细胞活化期间出现叶酸受体活性，申请人曾对叶酸导向的99mTc成像剂是否可以用于关节炎病变的体内成像进行过测定。为了测定这种高亲和性FR的表达是否可以用于选择性地将药物导向在炎症部位活化的巨噬细胞，将叶酸与99mTc螯合剂偶联，并评价其在佐剂诱导的关节炎的大鼠的正常组织和病变组织中的分布。确实，发现称为EC20的叶酸连接的99mTc螯合复合物浓集在患病大鼠的关节炎肢端，而在健康大鼠的关节中未发现。在过量的竞争性叶酸存在下，发现受影响组织的γ闪烁成像的强度大大地降低。此外，患关节炎的动物的肝和脾也显示出对EC20摄取的增加和FR水平的提高，证实了巨噬细胞的全身活化与佐剂诱导的关节炎同时发生。患关节炎动物的巨噬细胞的耗竭减少了组织的FR含量，并与此一致，消除了EC20的摄取。此外，由佐剂诱导关节炎的大鼠中分离的枯氏细胞表现出的结合叶酸偶联物的能力明显高于健康大鼠的枯氏细胞。由此，申请人发现，EC20对于测定活化的巨噬细胞参与炎症，例如类风湿性关节炎的病理学是有用的。本专利技术涉及一种治疗和监测由活化的巨噬细胞介导的疾病状况的方法。根据本专利技术的一个实施方案，通过重新定向宿主对活化的巨噬细胞的免疫应答，或通过改变活化的巨噬细胞的功能，或直接杀灭活化的巨噬细胞来治疗由活化的巨噬细胞介导的疾病状况。在本专利技术的一个方面，为了促进杀灭活化的巨噬细胞，将与活化的巨噬细胞特异结合的配体与免疫原偶联，以重新定向宿主对活化的巨噬细胞群的免疫应答，或者将它们与直接杀灭巨噬细胞的细胞毒素偶联。可以用于本专利技术的偶联物中的配体包括与在活化的巨噬细胞上特异表达的受体结合的配体，例如与叶酸受体结合的配体；或以下所述的配体，例如，定位于在活化的巨噬细胞上特异表达的细胞表面标记的单克隆抗体。本专利技术的另一个方面，将与活化的巨噬细胞特异结合的配体与成像剂偶联，然后将偶联物施用于患者，以诊断和监测由活化的巨噬细胞介导的疾病的进展。在一个实施方案中，提供了一种治疗或监测/诊断由活化的巨噬细胞介导的疾病状况的方法。此方法包括对患有巨噬细胞介导的疾病的患者施用有效量的组合物的步骤，该组合物包含通式为Ab-X的偶联物或复合物，其中的基团Ab包含能结合活化的巨噬细胞的配体，当偶联物用来治疗疾病状况时，基团X包含免疫原、细胞毒素、或能够改变巨噬细胞功能的化合物；当偶联物用来监测/诊断疾病状况时，基团X包含成像剂。专利技术详述根据本专利技术，提供了治疗或监测/诊断由活化的巨噬细胞介导的疾病状况的方法。已知由活化的巨噬细胞介导的疾病的例子包括类风湿性关节炎、溃疡性结肠炎、克隆氏病、牛皮癣、骨髓炎、多发性硬化、动脉粥样硬化、肺纤维化、结节病、系统性硬化、器官移植排斥(GVHD)和慢性炎症。这种疾病状况可以通过如下方式监本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种治疗或监测／诊断由活化的巨噬细胞介导的疾病状况的方法，该方法包括对患有巨噬细胞介导的疾病状况的患者施用有效量的组合物包含通式为　　　　Ａ↓［ｂ］－Ｘ　　　　的偶联物或复合物的组合物的步骤，其中基团Ａ↓［ｂ］包含能与活化的巨噬细胞结合的配体，以及，在该偶联物用于治疗上述疾病状况时，基团Ｘ包含免疫原、细胞毒素、或能够改变巨噬细胞功能的化合物；在该偶联物用于监测／诊断上述疾病状况时，Ｘ包含成像剂。

【技术特征摘要】
...

【专利技术属性】
技术研发人员：PS罗，MJ图尔克，
申请(专利权)人：普渡研究基金会，
类型：发明
国别省市：US[美国]