【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本申请涉及使用培养大规模生产的无血清培养基在高生产力细胞中生产重组蛋白质，以及用于测量和维持细胞培养条件、收集和纯化具有降低的异质性和改进的质量并且具有较高产率的蛋白质的改进系统和方法。
技术介绍
1、治疗蛋白质产物的制造工艺应根据各种因素优化，包括(但不限于)蛋白质生产条件、蛋白质结构和功能特性以及所需最终药品产物。即使在针对相同最终药品产物使用相同治疗蛋白质时，可能还需要改变蛋白质生产条件以使产物的滴度、批量、产率或质量优化。反过来，增加并且优化的滴度、批量和产率又需要优化收集和纯化过程以处理增加的滴度和装载，同时维持可接受质量属性。
2、为了支持对重组产生的蛋白质药品产物增长的需求，已开发出能够产生较高滴度和改进的质量(包括降低的异质性和减少的序列变异体)同时改进总产率的细胞生产方法。因此，需要改进的细胞培养基以满足这些需求和特化细胞条件。
3、另外，测量和维持优化的细胞培养条件是很关键的，并且需要专门设计的设备，包括用于测量溶解气体(如氧气)的探针和传感器。然而，大规模容器和生物反应器的使用可影响用于测量...
【技术保护点】
1.一种方法，其包含以下步骤：
2.根据权利要求1所述的方法，其进一步包括在步骤(a)之前的收集预处理步骤。
3.根据权利要求2所述的方法，其中所述收集预处理步骤包括将所述度普利尤单抗调节到约4至5.5的瞬时pH水平。
4.根据权利要求1所述的方法，其中从步骤(f)中的流通级分汇集的所述度普利尤单抗的浓度在约4g/L至12g/L之间。
5.根据权利要求1所述的方法，其进一步包括在步骤(f)之后使所述度普利尤单抗经受超滤和渗滤(UF/DF)。
6.根据权利要求5所述的方法，其中所述UF/DF包括pH在4.0与4...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种方法，其包含以下步骤：
2.根据权利要求1所述的方法，其进一步包括在步骤(a)之前的收集预处理步骤。
3.根据权利要求2所述的方法，其中所述收集预处理步骤包括将所述度普利尤单抗调节到约4至5.5的瞬时ph水平。
4.根据权利要求1所述的方法，其中从步骤(f)中的流通级分汇集的所述度普利尤单抗的浓度在约4g/l至12g/l之间。
5.根据权利要求1所述的方法，其进一步包括在步骤(f)之后使所述度普利尤单抗经受超滤和渗滤(uf/df)。
6.根据权利要求5所述的方法，其中所述uf/df包括ph在4.0与4.5之间的渗滤缓冲液。
7.根据权利要求5所述的方法，其中uf/df之后的浓缩度普利尤单抗汇集物的ph为约5.3。
8.根据权利要求5所述的方法，其中所述uf/df包括包含约4mm乙酸盐至约6mm乙酸盐的渗滤缓冲液。
9.根据权利要求1所述的方法，其中所述亲和色谱为蛋白a色谱。
10.根据权利要求9所述的方法，其中蛋白a树脂选自下组：mabselect prisma、mabselect sure、mabselect sure lx、mabselect、mabselect sure pcc、mabselect xtra、rprotein asepharose、prosep hc、prosep ultra、prosep ultra plus、mabcapture和amsphere a3。
11.根据权利要求9所述的方法，其中选择能够接受浓度高于55g/l的装载的蛋白a树脂。
12.根据权利要求1所述的方法，其中每升hic树脂装载约180g至200g度普利尤单抗。
13.根据权利要求1所述的方法，其中hic洗脱液中的plbd2的量与hic装载中的plbd2的量相比减少，任选地其中hic洗脱液中的plbd2的所述量与hic装载中的plbd2的所述量相比减少到低于100ppm、减少到低于30ppm、减少到低于4ppm、减少到低于1ppm或减少约40×至310×。
14.根据权利要求9所述的方法，其中蛋白a柱的装载ph在6与8之间。
15.根据权利要求1所述的方法，其中所述度普利尤单抗包含有包含seq id no:3、4和5的三个重链互补决定区(hcdr)序列和包含seq id no:6、7和8的三个轻链互补决定区(lcdr)序列。
16.根据权利要求1所述的方法，其中所述度普利尤单抗包含有包含seq id no:1的氨基酸序列的重链可变区(hcvr)和包含seq id no:2的氨基酸序列的轻链可变区(lcvr)。
17.一种方法，其包含以下步骤：
18.根据权利要求17所述的方法，其进一步包含在步骤(i)之后使所述度普利尤单抗经受超滤和渗滤(uf/df)。
19.根据权利要求17所述的方法，其中所述亲和色谱为蛋白a色谱。
20.根据权利要求19所述的方法，其中蛋白a树脂选自下组：mabselect prisma、mabselect sure、mabselect sure lx、mabselect、mabselect sure pcc、mabselect xtra、rprotein a sepharose、prosep hc、prosep ultra、prosep ultra plus、mabcapture和amspherea3。
21.根据权利要求17所述的方法，其中阴离子交换树脂选自下组：快流速q琼脂糖凝胶(q sepharose fast flow)、poros 50pi、poros 50hq、capto q impres、capto deae、toyopearl qae-550、toyopearl deae-650、toyopearl gigacap q-650、fractogel emdtmae hicap、sartobind stic pa纳米、sartobind q纳米、cuno biocap和xohc。
22.根据权利要求17所述的方法，其中阳离子交换树脂选自下组：fractogel hicap、capto spimpres、capto s impac、f级cm hyper d、eshmuno s、nuvia c prime、nuvia s、poros hs和poros xs。
23.根据权利要求17所述的方法，其进一步包括在步骤(e)的所述病毒灭活之后并且在步骤(f)的所述阴离子交换色谱之前使所述度普利尤单抗通过lifeassure过滤器。
24.根据权利要求18所述的方法，其中所述uf/df步骤包含选自下组的膜过滤装置：具有10kd、30kd或50kd膜的pellicon 2、pellicon 3过滤盒，kvick 10kd、30kd或50kd膜过滤盒，以及centramate和centrasette 10kd、30kd或50kd过滤盒。
25.根据权利要求18所述的方法，其中所述uf/df步骤不包括添加精氨酸。
26.根据权利要求17所述的方法，其中所述hic步骤包含选自下组的hic培养基：capto苯基、高取代capto苯基、快流速苯基sepharosetm6、高效苯基sepharosetm、高效辛基琼脂糖凝胶(octyl sepharose high performance)、fractogel emd丙基、fractogel emd苯基、macro-prep甲基、macro-prep叔丁基柱、wp hi-丙基(c3)、toyopearl醚、苯基或丁基...
【专利技术属性】
技术研发人员：J·马提拉，X·唐，H·巴克，S·M·劳伦斯，A·S·约翰逊，M·卡塞，M·拉方德，A·塔斯蒂安，P·梅勒斯，J·霍里汉，J·克劳利，L·卡利南，S·A·奥舒迪，A·威特默，D·科贝特，J·赖利，A·瓦尔塔克，M·奇博罗斯基，A·斯大林，R·思达尔斯，H·Y·吴，L·尼科尔，A·康伦，
申请(专利权)人：瑞泽恩制药公司，
类型：发明
国别省市：
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