一种含硼酸酯裂解位点的磁性化学选择性探针试剂盒及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种含硼酸酯裂解位点的磁性化学选择性探针试剂盒及其制备方法和应用，属于质谱标记探针技术领域。本发明专利技术的试剂盒由磁性探针和磁铁两部分组成。磁性探针通过可逆的硼酸酯反应将标记试剂固定于磁性四氧化三铁纳米颗粒表面。利用标记反应基团捕获分析物代谢产物。在完成代谢产物的捕获并去除干扰物后，通过调控pH快速释放标记产物用于后续的质谱分析。这种受pH调控的磁性分离与标记方法的显著优势在于探针成本低廉，使用便捷，含硼元素的标记产物识别方便。通过改变标记反应基团，探针可以拓展不同类型代谢物的分析，如羧基、氨基和巯基等。该试剂盒已经成功用于对血清等复杂样品中羧基类化合物分析，具有十分重要的临床应用价值和经济价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及质谱标记探针，尤其涉及一种含硼酸酯裂解位点的磁性化学选择性探针试剂盒及其制备方法和应用。

技术介绍

1、化学选择性探针（chemoselective probe，cp）是一种质谱标记探针与相分离结合的样品前处理技术。其特点是在保留传统质谱探针功能与结构（质谱增敏基团和反应基团）的基础上，新添加了含裂解位点的连接臂和固相基质两个部分，使探针本身不仅具有标记分析物的功能，还可以分离纯化复杂样品中的分析物。传统的cp使用流程如下：首先，cp与样品提取液共孵育，探针的反应基团捕获分析物；然后，通过物理分离方式去除提取液中无关的多余液体基质；接着，在设计好的裂解条件下，释放标记产物；最后，收集标记产物进行液相色谱-质谱（liquid chromatograph mass spectrometer，lc-ms）分析。

2、由于cp具有提高离子化效率、减少基质效应、改善色谱分离等作用，十分合适复杂样品中小分子化合物的质谱分析。目前，cp已被广泛应用于各个研究领域，如肠道菌-宿主共代谢物分析、疾病标志物的发现、代谢物快速筛查、代谢物网络分析等。然本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种磁性化学选择性探针试剂盒的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的化学选择性探针试剂盒的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）的具体操作如下：以四氧化三铁纳米颗粒、四乙氧基硅烷为反应物，以水、氨水、乙醇为溶液；将反应物与溶液混合并进行反应，反应完成后经纯化，获得表面含有二氧化硅的覆硅颗粒；其中，氨水、乙醇、水的体积比为1:（5-10）:（20-40）。

3. 根据权利要求1所述的化学选择性探针试剂盒的制备方法，其特征在于：所述步骤（1）中，四氧化三铁纳米颗粒与四乙氧基硅烷的质量比范围为（20-50）:1；溶液与反应物的质量比为1:（1-...

【技术特征摘要】

1.一种磁性化学选择性探针试剂盒的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的化学选择性探针试剂盒的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）的具体操作如下：以四氧化三铁纳米颗粒、四乙氧基硅烷为反应物，以水、氨水、乙醇为溶液；将反应物与溶液混合并进行反应，反应完成后经纯化，获得表面含有二氧化硅的覆硅颗粒；其中，氨水、乙醇、水的体积比为1:（5-10）:（20-40）。

3. 根据权利要求1所述的化学选择性探针试剂盒的制备方法，其特征在于：所述步骤（1）中，四氧化三铁纳米颗粒与四乙氧基硅烷的质量比范围为（20-50）:1；溶液与反应物的质量比为1:（1-3）；反应的温度为室温，反应的时间为10-14 h。

4. 根据权利要求1所述的磁性化学选择性探针试剂盒的制备方法，其特征在于，所述步骤（2）的具体操作如下：将覆硅颗粒加至溶剂，混合使其分散均匀，随后加入甲基丙烯酰氧基丙基三甲氧基硅烷进行修饰，经反应形成表面含有碳碳双键的双键修饰颗粒；覆硅颗粒、甲苯、甲基丙烯酰氧基丙基三甲氧基硅烷的质量比为（2-4）:1:（2-4）；反应的温度为室温，反应的时间为20-28 h。

5. 根据权利要求1所述的磁性化学选择性探针试剂盒的制备方法，其特征在于，所述步骤（3）的具体操作如下：双键修饰颗粒、功能单体、致孔剂、交联剂、引发剂混合，致孔剂采用低沸点溶剂；在一定时间内，加热所得混合物至致孔剂沸腾，该加热温度达到聚合反应需求；保持沸腾状态，在一定时间内将一半用量的致孔剂蒸出；随后经冷却、回收产物、纯化，得到表面含有顺式二羟基的羟基修饰颗粒；其中，双键修饰颗粒、功能单体、交联剂的质量比为（1...

【专利技术属性】
技术研发人员：魏振威，王祥宇，王海洁，
申请(专利权)人：武汉大学，
类型：发明
国别省市：