【技术实现步骤摘要】
本说明书涉及生物，特别涉及一种先导编辑系统及其应用。
技术介绍
1、基因编辑是一种用来研究模式生物中基因的功能的重要工具。crispr/cas(clustered regularly interspaced short palindromic repeats/crispr-associatedprotein)基因组编辑系统自问世以来，由于其简便性和高效性，已经被广泛应用于生物、医学、农学等领域。通过融合失活的cas核酸酶与碱基脱氨酶或者逆转录酶，crispr/cas系统还可以进一步被改造成碱基编辑系统(base editor，be)和先导编辑系统(prime editor，pe)。先导编辑能够在不产生双链dna断裂的情况下在靶向位置实现插入，删除和所有类型的点突变，并且广泛应用于果蝇，斑马鱼，小麦，水稻，小鼠胚胎和人类干细胞等多个细胞系中。
2、先导编辑系统由pegrna(prime editing guide rna)和融合了逆转录酶的cas9nickase构成。在先导编辑的过程中，pe-pegrna复合物结合到靶向链并在...
【技术保护点】
1.一种CRISPRi表达构建体，所述CRISPRi表达构建体中包括xseA4 crRNA编码核苷酸序列、sbcB3 crRNA编码核苷酸序列、sbcB6 crRNA编码核苷酸序列以及exoX4 crRNA编码核苷酸序列。
2.如权利要求1所述的CRISPRi表达构建体，其特征在于，所述xseA4 crRNA编码核苷酸序列如SEQ ID NO.15所示，所述sbcB3 crRNA编码核苷酸序列如SEQ ID NO.16所示，所述sbcB6 crRNA编码核苷酸序列如SEQ ID NO.17所示，所述exoX4 crRNA编码核苷酸序列如SEQ ID NO.
<...【技术特征摘要】
1.一种crispri表达构建体，所述crispri表达构建体中包括xsea4 crrna编码核苷酸序列、sbcb3 crrna编码核苷酸序列、sbcb6 crrna编码核苷酸序列以及exox4 crrna编码核苷酸序列。
2.如权利要求1所述的crispri表达构建体，其特征在于，所述xsea4 crrna编码核苷酸序列如seq id no.15所示，所述sbcb3 crrna编码核苷酸序列如seq id no.16所示，所述sbcb6 crrna编码核苷酸序列如seq id no.17所示，所述exox4 crrna编码核苷酸序列如seq id no.18所示。
3.如权利要求1所述的crispri表达构建体，其特征在于，所述crispri表达构建体的核苷酸序列如seq id no.1所示。
4.如权利要求1～3任一项所述的crispri表达构建体在基因编辑中的应用。
5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述基因编辑选自基因切割、基因删除、基因插入、碱基替换、点突变、转录抑制、转录激活或基础编辑中至少一种；优选的，所述基因编辑选自基因删除、基因插入或点突变。
6.一种epegrna，所述epegrna包括pegrna spacer、pegrna 3’extension和pegrnascaffold。
7.如权利要求6所述的epegrna，其特征在于，所述epegrna的编码核苷酸序列选自如seq id no.9、seq id no.10或seq id no.11中任一所示的序列。
8.一种epegrna表达构建体，其特征在于，所述epegrna表达构建体含有如权利要求6或7所述的epegrna的编码核苷酸序列。
9.如权利要求8所述的epegrna表达构建体，其特征在于，所述epegrna表达构建体通过将如权利要求6或7所述的epegrna的编码核苷酸序列插入空质粒pegrna2_tevopreq1得到，所述pegrna2_tevopreq1的核苷酸序列如seq id no.12所示。
10.如权利要求8所述的epegrna表达构建体，其特征在于，所述epegrna表达构建体的的核苷酸序列选自如seq id no.5、seq id no.6或seq id no.7中任一所示的序列。
11.一种先导编辑系统，其特征在于，包括：xsea4 crrna或其编码基因、sbcb3 crrna或其编码基因、sbcb6 crrna或其编码基因以及exox4 crrna或其编码基...
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