一种银杏胚性干细胞的诱导方法技术

一种银杏胚性干细胞的诱导方法，包括以下步骤：(1)采集银杏幼嫩的枝条，进行清洗、浸泡和消毒；(2)除去叶片和木质部，剩余部分剪切成小块，接种在培养基上培养，将形成层接触培养基；小块枝条周围接触培养基的部位开始长出愈伤组织；(3)将愈伤组织进行继代培养，继代培养2‑3代后形成呈颗粒状的结构松散的愈伤组织，继代培养的培养基同上述步骤(2)中不同；(4)将愈伤组织胚性干细胞细胞接种到MS液体培养基中，进行悬浮扩大培养；(5)对扩大培养的银杏胚性干细胞进行收集。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于植物干细胞培养，具体涉及一种银杏胚性干细胞的诱导培养方法。

技术介绍

0、技术背景

1、银杏科(拉丁学名：ginkgoaceae)，是银杏纲银杏目下的银杏科植物，为落叶乔木，只有银杏属ginkgo 1属1种，原产于中国。银杏科植物叶扇形，在长枝上散生，在短枝上簇生，球花单性，雌雄异株，种子核果状。

2、银杏含有多种可药用的次生代谢产物，包括黄酮及其苷类、萜內酯类、有机酸、生物碱、氨基酸、异戊烯醇、甾体等。其中银杏萜内酯是血小板活化因子受体的天然专一拮抗剂，也是治疗和预防心脑血管疾病的优良天然药物。因为市场需求量大，传统种植因其植物生长周期长、产量低、易受气候环境等条件的影响以及难以调控等种种缺点，制约了该拮抗剂药物的产能，同时传统的提取分离纯化方法不能满足要求，化学全合成步骤复杂且成本高而不具有工业化生产价值，因此科学家们把目光投向现代生物技术。生物技术诸如植物细胞培养可以很好的对细胞的生长环境和代谢进行调控，不受环境及气候的影响，结合大型生物反应器技术，使工业化发酵成为可能。植物组织培养技术是细胞培养技术在植物中的应本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种银杏胚性干细胞的诱导方法，包括以下步骤：

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中所述清洗使用去离子水清洗3-5次；浸泡使用无水乙醇，浸泡时间为1-12h；消毒使用双氧水溶液或次氯酸钠溶液，清洗3-5次，双氧水溶液中双氧水的浓度为10-20wt％，次氯酸钠溶液的浓度为1-5％。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中将除去叶片和木质部后的剩余部分剪成1-2cm2的的小块；伤愈组织的培养时间为10-20d，优选为12-15d。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)和(3)中培养基包含MS、2,4-D、IBA...

【技术特征摘要】

1.一种银杏胚性干细胞的诱导方法，包括以下步骤：

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中所述清洗使用去离子水清洗3-5次；浸泡使用无水乙醇，浸泡时间为1-12h；消毒使用双氧水溶液或次氯酸钠溶液，清洗3-5次，双氧水溶液中双氧水的浓度为10-20wt％，次氯酸钠溶液的浓度为1-5％。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中将除去叶片和木质部后的剩余部分剪成1-2cm2的的小块；伤愈组织的培养时间为10-20d，优选为12-15d。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)和(3)中培养基包含ms、2,4-d、iba、ga3、6-ba、naa、kt中的一种或多种；优选包含ms+2,4-d+iba+ga3，或ms+6-ba+naa+kt。

5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤(2)和(3)中培养基包含ms+2,4-d(1.0-1.5mg/l)+iba(1.0-2.0mg/l)+ga3(0.1-0.5mg/l)，或ms+6-ba(1.0-1.5mg/...

【专利技术属性】
技术研发人员：肖乐义，刘元柱，肖敏，杨勤英，刘晓，张翠玲，
申请(专利权)人：青岛言鼎细胞生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：