MIC19基因和ECM15基因在提高香叶醇产量中的应用制造技术

本发明专利技术提供了生产香叶醇高产酵母菌的方法或在酵母菌中提高香叶醇产量的方法，其包括，在酵母菌中降低MIC19基因的表达和/或提高ECM15基因的表达；其中，所述酵母菌具有香叶醇合酶基因。本发明专利技术发现了MIC19基因和ECM15基因这两个酵母内源靶点对于调控香叶醇合成有重要作用，通过调控这两种基因的表达，可提高酵母菌株的香叶醇产量。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及香叶醇生产，具体涉及mic19基因和ecm15基因在提高香叶醇产量中的应用。

技术介绍

1、香叶醇(geraniol)，由于具有温和、甜的玫瑰花气味而广泛用于化妆品和香水行业[1]。与乙醇相比，由于其高能量含量、低吸湿性和低挥发性，也被认为是一种有前景的生物燃料[2]。此外，香叶醇作为单萜吲哚生物碱类物质生物合成的前体，对于长春碱和长春新碱等著名抗癌药物的生产也具有重要作用[3]。目前利用酿酒酵母等微生物合成香叶醇成为该具有市场前景化合物大批量供应的有潜力的解决方案。但是，酵母生物合成香叶醇目前面临三个问题，一是酵母细胞提供的合成前体不足[3]，二是香叶醇在酵母中异源合成通路效率低[4]，三是香叶醇在细胞中的积累对菌株产生毒性[5]，这三点制约着香叶醇在酵母中的产量提升，因此急需研究可以提升香叶醇产量的方式。

2、现有研究围绕香叶醇在酿酒酵母中的生物合成过程进行产量提升的突破，香叶醇合成通路如图1所示。第一部分为酵母内源的甲羟戊酸(mevalonate，mva)途径，以培养基中碳源葡萄糖为起始，经过内源代谢生成香叶基二磷酸(ger本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.生产香叶醇高产酵母菌的方法或在酵母菌中提高香叶醇产量的方法，其包括，在酵母菌中降低MIC19基因的表达和/或提高ECM15基因的表达；其中，所述酵母菌具有香叶醇合酶基因。

2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述降低MIC19基因的表达包括删除MIC19基因，或将所述MIC19基因的核苷酸序列中添加或缺失一个或多个碱基，或者发生导致错义突变的核苷酸置换使得所述MIC19基因的表达减少或不存在，或通过基因沉默技术以实现MIC19基因的表达降低；其中，所述提高ECM15基因的表达包括串联重复ECM15基因或引入含有ECM15基因的重组质粒。

3.根据权利要求1所述...

【技术特征摘要】

1.生产香叶醇高产酵母菌的方法或在酵母菌中提高香叶醇产量的方法，其包括，在酵母菌中降低mic19基因的表达和/或提高ecm15基因的表达；其中，所述酵母菌具有香叶醇合酶基因。

2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述降低mic19基因的表达包括删除mic19基因，或将所述mic19基因的核苷酸序列中添加或缺失一个或多个碱基，或者发生导致错义突变的核苷酸置换使得所述mic19基因的表达减少或不存在，或通过基因沉默技术以实现mic19基因的表达降低；其中，所述提高ecm15基因的表达包括串联重复ecm15基因或引入含有ecm15基因的重组质粒。

3.根据权利要求1所述的方法，其中，所述香叶醇合酶基因由外源引入。

4.根据权利要求1所述的方法，其中，所述香叶醇合酶基因为密码子优化的序列(优选如seq id no:1所示)并且还去除了其中的pts区序列；

5.根据权利要求1所述的方法，其中，所述酵母为单倍体酵母或二倍体酵母，优选单倍体酵母；

6.根据权利要求1至5任一项所述的方法，其中，所述酵母为含有合成型染...

【专利技术属性】
技术研发人员：张羽，付宪，张惠铭，丘璨瑜，廖莹，沈玥，
申请(专利权)人：深圳华大生命科学研究院，
类型：发明
国别省市：