一种同时检测土壤中吸附和脱附态抗生素生物可利用性的方法技术

本发明专利技术公开了一种同时检测土壤中吸附和脱附态抗生素生物可利用性的方法，属于生物技术应用领域。本发明专利技术采用荧光传感细菌与琼脂平板相结合的方法设计了一种生物传感检测体系，基于土壤‑抗生素的界面行为及琼脂扩散原理，通过控制琼脂平板体系的湿度，该体系可以对不同水势的土壤中吸附和脱附的四环素的生物可利用性进行检测并同时量化。本发明专利技术设计的生物传感检测体系简易灵敏、低耗便捷，可原位检测水势范围为‑10.59～‑2.95Kpa的土壤，对四环素类抗生素的最低检测限值为1mg/kg。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物检测，尤其是涉及一种同时检测土壤中吸附和脱附态抗生素生物可利用性的方法。

技术介绍

1、在人类医学和动物农业中对抗生素的过度使用造成了环境中抗生素耐药性的发生和发展，并且抗生素耐药基因(args)可以在细菌间进行水平基因转移，获得args的病原菌能够减弱抗生素临床治疗的效果，这无疑对人类的健康构成严重威胁。四环素类抗生素是动物生产中使用最多的药物之一，它们的大部分经动物的排泄物排出，继而通过粪肥和污水回用导致土壤中四环素的广泛残留。四环素在土壤中的存在是一个动态过程，通常被土壤颗粒(包括矿物和有机质等)吸附以及随后的脱附。了解细菌对土壤中吸附和脱附态四环素类抗生素的获取和吸收(即生物有效性)对于影响args在土壤微生物群落中的产生与传播是至关重要的。但是目前国际上尚无有效的手段进行吸附态和解析态抗生素同时检测的技术手段。因此，亟需开发能够同时检测土壤中吸附和脱附态四环素的生物可利用性的技术方法并将其应用于实际环境检测中。

2、当前采用荧光传感细菌对抗生素或其他有机化合物的检测已经受到认可，用其检测环境中抗生素的生物可利用性是可本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种生物传感检测体系，其特征在于：包括含有琼脂的固体培养基含有筛选抗生素，以及涂布在含有琼脂的固体培养基上的E.coli pTGM荧光传感细菌，E.coli pTGM荧光传感细菌能够与筛选抗生素相应。

2.根据权利要求1所述的生物传感检测体系，其特征在于：E.colipTGM荧光传感细菌含有携带四环素耐药基因tet(M)、转录调控基因tetR和绿色荧光蛋白基因(gfp)的pTGM质粒。

3.根据权利要求2所述的生物传感检测体系，其特征在于：所述培养基为含有100mg/L氨苄青霉素和2％(w/v)琼脂的LB固体培养基。

4.根据权利要求3所述的生物传...

【技术特征摘要】

1.一种生物传感检测体系，其特征在于：包括含有琼脂的固体培养基含有筛选抗生素，以及涂布在含有琼脂的固体培养基上的e.coli ptgm荧光传感细菌，e.coli ptgm荧光传感细菌能够与筛选抗生素相应。

2.根据权利要求1所述的生物传感检测体系，其特征在于：e.coliptgm荧光传感细菌含有携带四环素耐药基因tet(m)、转录调控基因tetr和绿色荧光蛋白基因(gfp)的ptgm质粒。

3.根据权利要求2所述的生物传感检测体系，其特征在于：所述培养基为含有100mg/l氨苄青霉素和2％(w/v)琼脂的lb固体培养基。

4.根据权利要求3所述的生物传感检测体系，其特征在于：将e.coliptgm荧光传感细菌培养至od600为0.4-0.6时，涂布到培养基上。

5.使用权利要求1-4中任一所述的生物传感检测体系同时检测土壤中吸附和脱附态抗生素生物可利用性的方法，其特征在于：将待测土壤样...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈则友，袁胜煜，王美仑，王星烁，
申请(专利权)人：南开大学，
类型：发明
国别省市：