通过级联酶促法提高PAL-催化蛋白连接效率制造技术

本发明专利技术总体上涉及酶促肽或蛋白质连接。具体地，本发明专利技术提供了一种改进的酶促肽或蛋白质连接方法，其包括将肽基天冬酰胺基基连接酶(PAL)催化的连接与谷氨酰胺环化酶(QC)催化的焦谷氨酰形成偶联，以提高连接产物的产率。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】

本专利技术总体上涉及酶促肽或蛋白质连接。具体地，本专利技术提供了一种改进的酶促肽或蛋白质连接方法，其包括将肽基天冬酰胺基连接酶(pal)催化的连接与谷氨酰胺环化酶(qc)催化的焦谷氨酰形成偶联，以提高连接产物的产率。

技术介绍

0、技术背景

1、位点特异性蛋白连接有助于蛋白功能研究，并促进蛋白疗法的发展(spicer,c.d.和davis,b.g.,《nat.commun.》5:4740(2014)；hoyt,e.a.等,《nat.rev.chem.》3,147–171(2019)；zhang,g.等,《chem.soc.rev.》44,3405-3717(2015)；sletten,e.m.和bertozzi,c.r.,《angew.chem.int.ed.》48,6974-6998(2009)；rosen,c.b.和francis,m.b.,《nat.chem.biol.》13,697-705(2017))。除了成熟的化学连接方法外，近年来，肽连接酶在蛋白质修饰中的应用变得越来越多(zhang,y.等,《chem.soc.rev.》47,9本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种酶促肽连接的方法，其特征在于，所述方法包括提供

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，P2′选自下组：Leu、Met、Phe、Tyr、Trp、Val、Ile和Thr。

3.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，P2″选自下组：Leu、Phe、Tyr、Trp、Val、Ile、和Thr。

4.如权利要求1至3中任一项所述的方法，其特征在于，所述PAL选自下组：包含如SEQID NO:1所示的氨基酸序列的丁酸酶1(butelase1)、包含如SEQ ID NO:2或3所示的氨基酸序列的丁酸酶-2(butelase-2)、包含如SEQ ID NO:...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

1.一种酶促肽连接的方法，其特征在于，所述方法包括提供

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，p2′选自下组：leu、met、phe、tyr、trp、val、ile和thr。

3.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，p2″选自下组：leu、phe、tyr、trp、val、ile、和thr。

4.如权利要求1至3中任一项所述的方法，其特征在于，所述pal选自下组：包含如seqid no:1所示的氨基酸序列的丁酸酶1(butelase1)、包含如seq id no:2或3所示的氨基酸序列的丁酸酶-2(butelase-2)、包含如seq id no:4所示的氨基酸序列的vypal2、包含如seq id no:5所示的氨基酸序列的vypal3、包含如seq id no:6所示的氨基酸序列的oaaep1b-c247a、，其包含如seq id no:7所示的氨基酸序列的heaep3、包含如seq id no:8所示的氨基酸序列的atlegγ、包含如seq id no:9所示的氨基酸序列的vupal1、包含如seqid no:10所示的氨基酸序列的hapal1、包含如seq id no:11所示的氨基酸序列的oaaep1b、及其功能片段或变体。

5.如权利要求1至4中任一项所述的方法，其特征在于，所述qc选自下组：包含如seq idno:12所示的氨基酸序列的人谷氨酰胺环化酶、包含如seq id no:13所示的氨基酸序列的小鼠谷氨酰胺环化酶、包含如seq id no:14所示的氨基酸序列的果蝇谷氨酰胺环化酶、包含如seq id no:15所示的氨基酸序列的拟南芥谷氨酰胺环化酶、包含如seq id no:16所示的氨基酸序列的芋螺(conus)谷氨酰胺环化酶、包含如seq id no:17所示的氨基酸序列的侏儒响尾蛇(sistrurus)氨酰胺环化酶、包含如seq id no:18所示的氨基酸序列的细菌谷氨酰胺环化酶、及其功能片...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘传法，夏轶尹，李富鹏，
申请(专利权)人：南洋理工大学，
类型：发明
国别省市：