一种降解拟除虫菊酯的酯酶及其基因工程菌的构建制造技术

本发明专利技术公开了一种酯酶Est10及分泌该酯酶的重组菌。该酯酶含有482个氨基酸，具有如SEQ ID NO.1氨基酸序列。将该酯酶基因与表达载体pET28a(+)连接，以E.coli BL21(DE3)为宿主菌，构建重组基因工程菌E.coli BL21(DE3)‑pET‑28a(+)‑est10。基因工程菌和酯酶可以用于受农药污染的土壤、水体等环境的生物修复，也可以应用于农产品中农药残留的减除。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及基因工程和残留农药减除领域，具体地，涉及一种降解拟除虫菊酯的酯酶及构建该基因重组菌并获得重组酶的方法。

技术介绍

1、拟除虫菊酯类农药是目前应用最广泛的杀虫剂之一，用于果蔬、谷物等农林作物及家庭中多种害虫的防治。拟除虫菊酯的大量使用导致其在环境中长期存在并在农林作物中逐步积累，严重危害生态环境安全和食品安全。同时，拟除虫菊酯还可以通过空气、灰尘、水及食物等介质经由摄食、呼吸、皮肤等多种途径进入人体，可能造成一系列的毒性损伤。

2、酯酶是催化酯键断裂的水解酶总称，来源广泛，催化活性高，反应条件温和，无需辅酶参与，在医药行业可用于手性化合物拆分与药物合成，在食品工业中可用于改善酿造食品风味，也可以用于环境及食品中拟除虫菊酯类农药的减除。

3、酯键断裂是拟除虫菊酯类农药降解的第一步，在此过程中，酯酶发挥着极其重要的作用。微生物繁殖速度快、培养周期较短，是获得酯酶的重要来源之一。从拟除虫菊酯降解微生物出发，寻找酯酶基因并进行异源表达，构建基因工程菌，由此获得酯酶，进一步考察酯酶对拟除虫菊酯的降解能力，是扩充拟除虫菊酯降解酶资源本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一株具有酯键水解作用的酯酶Est10，其特征在于，由来源于枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）J6的酯酶基因est10编码，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.包含权利要求1所述酯酶基因est10的重组载体为pET-28a(+)-est10。

3.根据权利要求1所述酯酶基因的重组菌株。

4.一种制备酯酶的方法，其特征在于，包括以下步骤：

5.权利要求1所述酯酶应用在环境及农作物、农产品中的含酯农药的去除。

【技术特征摘要】

1.一株具有酯键水解作用的酯酶est10，其特征在于，由来源于枯草芽孢杆菌（bacillus subtilis）j6的酯酶基因est10编码，其氨基酸序列如seq id no.1所示。

2.包含权利要求1所述酯酶基因est10的重组...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡凯弟，张梦梅，刘书亮，刁扬羽，夏小龙，戴鑫，李建龙，李琴，敖晓琳，胡欣洁，
申请(专利权)人：四川农业大学，
类型：发明
国别省市：