一种循环肿瘤细胞建库过程中的培养方法和循环肿瘤细胞的建库方法技术

本发明专利技术涉及一种循环肿瘤细胞建库过程中的培养方法，其包括：将分选得到的循环肿瘤细胞置于缺氧培养箱中进行培养，氧气浓度控制在4‑5％；培养温度为37±0.5℃，培养液采用基础培养基中添加神经生长因子FGF、表皮生长因子EGF、B27补充剂、L‑谷氨酰胺和抗生素/抗真菌剂的双抗组合物；基础培养基为RPMI 1640培养基；培养时间为3‑10天，培养期间持续观察细胞的生长情况，一旦细胞出现衰老，立即将细胞挑取出来进行建库操作。本发明专利技术可在体外对循环肿瘤细胞进行培养，使分选出来的CTCs能够在进行一段时间的状态恢复甚至增殖后再进行检测，使检测结果更能反应CTCs的真实状态并获取更多的检测样本，提高建库成功率和质量。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及细胞组织库构建的，具体涉及一种循环肿瘤细胞建库过程中的培养方法和循环肿瘤细胞的建库方法。

技术介绍

1、循环肿瘤细胞(circulating tumor cells，简称ctcs)是指从原发肿瘤或转移性病灶中脱落并进入外周血液循环的肿瘤细胞。这些细胞有可能通过血液循环到达身体其他部位，并在那里形成新的肿瘤，即转移灶。ctcs的数量极少，循环肿瘤细胞在血液中含量极少，约每10毫升血液含有1-10个循环肿瘤细胞，甚至在每107个血液细胞中仅含有1个循环肿瘤细胞。ctcs的重要性在于它们与肿瘤的进展和预后密切相关。能够成功进入血液循环并存活下来的ctcs往往具有高度的活力和转移潜能。由于这些特性，ctcs成为了研究肿瘤生物学和开发新型诊断工具的重点对象之一。ctcs的捕获和分析有助于理解肿瘤的异质性、转移机制以及耐药性的发展，为开发新型治疗方法提供信息。由于ctcs的数量非常稀少，通常每毫升血液中只有几个至几十个，因此其检测是一项技术挑战，但同时也为临床提供了宝贵的液体活检(liquid biopsy)手段，即无需侵入性地获取组织样本即可获得有关肿本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种循环肿瘤细胞建库过程中的培养方法，其特征在于，包括：将分选得到的循环肿瘤细胞置于缺氧培养箱中进行培养，氧气浓度控制在4-5％；培养温度为37±0.5℃，培养液采用基础培养基中添加神经生长因子FGF、表皮生长因子EGF、B27补充剂、L-谷氨酰胺和抗生素/抗真菌剂的双抗组合物；基础培养基为RPMI 1640培养基；培养时间为3-10天，培养期间持续观察细胞的生长情况，一旦细胞出现衰老，立即将细胞挑取出来进行建库操作。

2.根据权利要求1所述的培养方法，其特征在于，抗生素/抗真菌剂的双抗组合物为青霉素/链霉素或两性霉素B。

3.根据权利要求1所述的培养方法，其...

【技术特征摘要】

1.一种循环肿瘤细胞建库过程中的培养方法，其特征在于，包括：将分选得到的循环肿瘤细胞置于缺氧培养箱中进行培养，氧气浓度控制在4-5％；培养温度为37±0.5℃，培养液采用基础培养基中添加神经生长因子fgf、表皮生长因子egf、b27补充剂、l-谷氨酰胺和抗生素/抗真菌剂的双抗组合物；基础培养基为rpmi 1640培养基；培养时间为3-10天，培养期间持续观察细胞的生长情况，一旦细胞出现衰老，立即将细胞挑取出来进行建库操作。

2.根据权利要求1所述的培养方法，其特征在于，抗生素/抗真菌剂的双抗组合物为青霉素/链霉素或两性霉素b。

3.根据权利要求1所述的培养方法，其特征在于，所述培养液的制备方法为：向每500ml的rpmi 1640培养基中加入4-6ml的l-谷氨酰胺、9-12ml的b27补充剂、2.5-3μg的fgf，2.5-3μg的egf，10ml-12ml的双抗组合物。

4.根据权利要求1所述的培养方法，其特征在于，判断细胞衰老的方法为：出现细胞核颜色加深或...

【专利技术属性】
技术研发人员：洪鑫，廉靖茹，刘雪飞，童毅杰，
申请(专利权)人：南方科技大学，
类型：发明
国别省市：