【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种酶活和热稳定性提高的岩藻多糖酶突变体,属于基因工程和酶工程。
技术介绍
1、岩藻多糖酶(ec 3.2.1.212)来源广泛,主要来源于海洋细菌,其次是无脊柱生物和海洋真菌,各种酶之间的酶学性质差异较大。岩藻多糖酶的作用类型有内切型和外切型;目前,发现的岩藻多糖酶主要为内切型。
2、随着研究的深入,发现低分子量岩藻多糖具有更好的水溶解性和生物活性。制备低分子量岩藻多糖的方法主要有3种,化学法、物理法和酶水解法;由于酶水解法更温和,不损害产物岩藻低聚糖的生物活性,可以应用于岩藻低聚糖的生产。
3、而目前发现的岩藻多糖酶的酶活没有很突出,导致工业应用效果不佳,因此催化效率有待进一步提升。
技术实现思路
1、为解决上述现有问题,本专利技术通过对mariniflexilefucanivorans来源的α-1,4-岩藻多糖酶基因(核苷酸序列如seq id no.1所示,氨基酸序列如seq id no.2所示)进行分子改造,运用定点突变技术获得比酶活和热稳定性显
...【技术保护点】
1.一种α-1,4-岩藻多糖酶突变体,其特征在于,所述突变体是将α-1,4-岩藻多糖酶亲本的第46位亮氨酸、第290位酪氨酸、第361位天冬氨酸和第374位天冬酰胺中的一个或多个进行突变,所述亲本的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
2.根据权利要求1所述的突变体,其特征在于,所述突变体是对所述亲本进行(a)或(b)所示的突变:
3.编码权利要求1或2所述突变体的基因。
4.携带有权利要求3所述基因的重组质粒。
5.表达有权利要求1或2所述突变体,或者含有权利要求3所述基因,或者转化有权利要求4所述重组质粒的重组微
<...【技术特征摘要】
1.一种α-1,4-岩藻多糖酶突变体,其特征在于,所述突变体是将α-1,4-岩藻多糖酶亲本的第46位亮氨酸、第290位酪氨酸、第361位天冬氨酸和第374位天冬酰胺中的一个或多个进行突变,所述亲本的氨基酸序列如seq id no.2所示。
2.根据权利要求1所述的突变体,其特征在于,所述突变体是对所述亲本进行(a)或(b)所示的突变:
3.编码权利要求1或2所述突变体的基因。
4.携带有权利要求3所述基因的重组质粒。
5.表达有权利要求1或2所述突变体,或者含有权利要求3所述基因,或者转化有权利要求4所述重组质粒的重组微生物细胞。
6.一种提高α-1,4-岩藻多糖酶酶活的方法,其特征在于,所述方法是将氨基酸序列如seq id no.2所示的α-1,4-岩藻多糖酶的第46位亮氨酸、第290位酪氨酸、第361位天冬氨酸、第374位天冬酰胺进行突变。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述方法是将氨基酸序列如seq id no.2所示的α-1,4-岩藻多糖酶的第46位亮氨酸突变为精氨酸;或将第290位酪氨酸突变为苯丙氨酸...
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