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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及化合物制备与应用,特别涉及一种地奥司明抗原及其制备方法与应用。
技术介绍
1、地奥司明,又称香叶木苷,通用名为diosmin。cas登记号:520-27-4;分子式为:c28h32o15;相对分子量为:608.54。结构式如下:
2、
3、地奥司明最早在1925年从玄参属植物scrophularianodosa中被分离出来,也可以从天然产物橙皮苷经半合成方法得到。它是一种典型的黄酮类化合物,大量存在于柑橘类水果中。在临床上主要用于治疗以下疾病:静脉淋巴功能不全相关症状以及急性痔发作症状。在其他的一些研究中,地奥司明也显示出抗氧化、抗炎、护肝、调节血糖、缓解神经疼痛的作用。
4、目前,地奥司明提取方法主要有超声提取法、索氏提取法、响应面法优化超声提取、固相分散萃取法、高速逆流色谱法等。地奥司明含量分析方法有高效液相色谱法(hplc)、超高效液相色谱(uplc)、rp-hplc法、hplc-esi-ms/ms法、hplc-dad,其灵敏度高,准确性好,但是这几种检测方法需要使用昂贵的仪器设备,检测费用高,耗时长,不适用于现场快速检测。与仪器分析法相比,免疫分析法具有快速、简便、实时、易于进行现场检测、样品前处理简单、灵敏度高、选择性强、适合于高通量分析等优点,而且还能大幅度降低检测成本。
技术实现思路
1、基于上述目的,本申请的目的在于提供一种用于检测地奥司明的抗原以及通过该抗原得到的抗体,使其可以通过免疫分析法快速检测待测样品中的地奥
2、为此,本申请的第一技术方案公开了一种地奥司明抗原,其具有如a1或a2所示的结构通式:
3、
4、其中,protein为载体蛋白;
5、所示式a1中,n为1-6的整数;
6、所述式a2中,a为1-6的整数,b为0-6的整数,x为芳香环、芳香杂环化合物中的一种。
7、优选的,所述载体蛋白为牛血清蛋白、卵清蛋白、血蓝蛋白中的一种。
8、本申请的第二技术方案公开了上述地奥司明抗原的制备方法,其包括如下步骤:
9、s1.将香叶木素与含酯基化合物反应得到中间体-1;
10、s2.将中间体-1与碱进行水解反应得到地奥司明半抗原;
11、s3.地奥司明半抗原与n-羟基琥珀酰亚胺、缩合剂经偶联反应得到中间体-2;
12、s4.中间体-2与载体蛋白经偶联反应得到地奥司明抗原;
13、其中,所述香叶木素具有如b所示结构式:
14、
15、所述含酯基化合物具有如c1或c2所示结构式:
16、y-(ch2)n-coo-(ch2)m-ch3 (c1);
17、y-(ch2)a-x-(ch2)b-coo-(ch2)m-ch3 (c2);
18、其中,x为芳香环、芳香杂环化合物中的一种,y为cl、br和i基团中的一种,n为0-6的整数,m为0-6的整数,a为1-6的整数,b为0-6的整数;
19、所述中间体-1具有如d1或d2所示结构式:
20、
21、所述地奥司明半抗原具有如e1或e2所示结构式:
22、
23、所述中间体-2具有如f1或f2所示结构式:
24、
25、进一步的,s1所述反应中,香叶木素与含酯基化合物的摩尔比为1:(0.1-10),反应温度为0-100℃,反应时间为6-48h。
26、进一步的,s3所述偶联反应以二环己基碳二亚胺或1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐为缩合剂,其中,地奥司明半抗原、n-羟基琥珀酰亚胺和缩合剂的摩尔比为1:(1-5):(1-5);反应温度为0-50℃,反应时间为4-24h。
27、进一步的,s4所述偶联反应中,中间体-2与载体蛋白的摩尔比为1:(50-30),反应温度为0-50℃,反应时间为8-36h,ph为5-9。
28、以及,根据上述制备方法制备得到的地奥司明抗原,其具有如a1或a2所示结构式。
29、本申请的第三技术方案公开了一种通过上述地奥司明抗原作为免疫原得到的抗体。
30、本申请的第四技术方案公开了上述地奥司明抗体在检测地奥司明中的应用。
31、本申请的第五技术方案公开了上述地奥司明抗体在制备用于检测地奥司明的试剂盒中的应用。
32、本申请的有益效果为:本申请通过制备得到地奥司明抗原,以及通过该抗原得到地奥司明抗体,再将该抗原和抗体用于环境中地奥司明的检测,相较于现有技术,本申请可以方便、快捷地获得地奥司明抗原,合成步骤简洁明了、合成成本低,效果好。通过地奥司明抗原进行免疫,可以得到的特异性好、灵敏度高的地奥司明抗体,可简单、方便、快速的检测进行地奥司明检测,降低检测成本。
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1.地奥司明抗原,其具有如A1或A2所示的结构通式:
2.根据权利要求1所述地奥司明抗原,其特征在于,所述载体蛋白为牛血清蛋白、卵清蛋白、血蓝蛋白中的一种。
3.一种如权利要求1或2所述地奥司明抗原的制备方法,其包括如下步骤:
4.根据权利要求3所述制备方法,其特征在于,S1所述反应中,香叶木素与含酯基化合物的摩尔比为1:(0.1-10),反应温度为0-100℃,反应时间为6-48h。
5.根据权利要求3所述制备方法,其特征在于,S3所述偶联反应以二环己基碳二亚胺或1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐为缩合剂,其中,地奥司明半抗原、N-羟基琥珀酰亚胺和缩合剂的摩尔比为1:(1-5):
6.根据权利要求3所述制备方法,其特征在于,S4所述偶联反应中,中间体-2与载体蛋白的摩尔比为1:(50-30),反应温度为0-50℃,反应时间为8-36h,pH为5-9。
7.根据权利要求3-6所述任一所述制备方法制备得到的地奥司明抗原,其具有如权利要求1,A1或A2所示结构式。
8.一种通过权利要求1
9.如权利要求8所述地奥司明抗体在检测地奥司明中的应用。
10.如权利要求8所述地奥司明抗体在制备用于检测地奥司明的试剂盒中的应用。
...【技术特征摘要】
1.地奥司明抗原,其具有如a1或a2所示的结构通式:
2.根据权利要求1所述地奥司明抗原,其特征在于,所述载体蛋白为牛血清蛋白、卵清蛋白、血蓝蛋白中的一种。
3.一种如权利要求1或2所述地奥司明抗原的制备方法,其包括如下步骤:
4.根据权利要求3所述制备方法,其特征在于,s1所述反应中,香叶木素与含酯基化合物的摩尔比为1:(0.1-10),反应温度为0-100℃,反应时间为6-48h。
5.根据权利要求3所述制备方法,其特征在于,s3所述偶联反应以二环己基碳二亚胺或1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐为缩合剂,其中,地奥司明半抗原、n-羟基琥珀...
【专利技术属性】
技术研发人员:张耀海,崔永亮,刘一凡,王成秋,赵其阳,陈爱华,何悦,李晶,
申请(专利权)人:西南大学,
类型:发明
国别省市:
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