中枢神经系统细胞特异性的miRNA表达载体、腺相关病毒载体及其用途技术方案

本发明专利技术涉及基因工程技术领域，尤其涉及一种中枢神经系统细胞特异性的miRNA表达载体、腺相关病毒载体及其用途，miRNA表达载体包括：Ef1α启动子序列，诱导序列，Tre启动子，荧光标记序列，tRNA序列，miRNA序列，SV40poly(A)终止信号序列；所述特异性miRNA过表达的基因序列为在所述荧光标记序列下游掺入tRNA‑miRNA‑tRNA组合序列。本发明专利技术经实验发现，该miRNA表达载体能在特定细胞中稳定的过表达。本发明专利技术具有追踪该载体并进行靶向治疗的优势，能应用于中枢系统神经炎症疾病，如神经退行性疾病、脑出血、中风、脑外伤等疾病的治疗。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物，尤其涉及中枢神经系统细胞特异性的mirna表达载体、腺相关病毒载体及其用途。

技术介绍

1、脑内主要构成细胞为神经元、星形胶质细胞、少突胶质细胞和小胶质细胞。神经元(neurons)是神经系统的基本功能单元，负责传递和处理信息。它们通过电信号和化学信号与其他神经元、肌肉细胞或腺体细胞进行通信。神经元的正常功能对于整个神经系统的健康和运作至关重要。在许多神经退行性疾病(如帕金森病和阿尔茨海默病)中，神经元的损伤和死亡是主要病理特征。星形胶质细胞是中枢神经系统中最丰富的胶质细胞，占整个胶质细胞的20％～40％。在中枢神经系统中它们执行着广泛的内稳态功能，如参与突触形成、维持细胞内外离子浓度恒定、参与神经递质的传递、形成并维持血脑屏障，为其他中枢神经系统常驻细胞提供支持等。在病理情况下，星形胶质细胞可以经历形态学和分子变化，以采用所谓的“反应性”状态，这可以改变它们的功能并改变它们的神经支持和神经毒性特性之间的平衡。少突胶质细胞(oligodendrocytes)是中枢神经系统(cns)中的一种重要的胶质细胞类型。它们的主要功能是生成髓鞘(m本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种中枢神经系统细胞特异性miRNA表达载体，用于构建过表达miRNA的载体，其特征在于，包括：Ef1α启动子序列，诱导序列，Tre启动子，荧光标记序列，tRNA序列，miRNA序列，SV40 poly(A)终止信号序列；

2.根据权利要求1所述的中枢神经系统细胞特异性miRNA表达载体，其特征在于，所述miRNA为miR-124-3P，序列如SEQ ID NO.4所示。

3.根据权利要求1所述的中枢神经系统细胞特异性miRNA表达载体，其特征在于，所述荧光标记基因序列为多西环素驱动的EGFP荧光标记基因序列，序列如SEQ ID NO.2所示。

4...

【技术特征摘要】

1.一种中枢神经系统细胞特异性mirna表达载体，用于构建过表达mirna的载体，其特征在于，包括：ef1α启动子序列，诱导序列，tre启动子，荧光标记序列，trna序列，mirna序列，sv40 poly(a)终止信号序列；

2.根据权利要求1所述的中枢神经系统细胞特异性mirna表达载体，其特征在于，所述mirna为mir-124-3p，序列如seq id no.4所示。

3.根据权利要求1所述的中枢神经系统细胞特异性mirna表达载体，其特征在于，所述荧光标记基因序列为多西环素驱动的egfp荧光标记基因序列，序列如seq id no.2所示。

4.一种如权利要求1-3任意一项所述的中枢神经系统细胞特异性mirna表达载体在提高mirna过表达中的用途，其特征在于，多西环素诱导下，tre启动子驱动荧光标记基因表达，进而驱动mirna特异性表达。

5.如权利要求4所述的用途，其特征在于，所述的mirna特异性表达是...

【专利技术属性】
技术研发人员：李天文，朱剑虹，王鹏，
申请(专利权)人：复旦大学附属华山医院，
类型：发明
国别省市：