一种表达弓形虫SAG2A蛋白的重组干酪乳杆菌及其构建方法和应用技术

本发明专利技术提供了一种表达弓形虫SAG2A蛋白的重组干酪乳杆菌及其构建方法和应用，涉及基因工程技术领域。本发明专利技术通过连接弓形虫SAG2A基因片段与乳酸pPG612.1载体片段乳酸菌分泌表达载体，构建转基因表达弓形虫SAG2A蛋白的重组干酪乳杆菌。实验证实，SAG2A基因可以稳定遗传，该蛋白可以在重组干酪乳杆菌中成功表达。重组干酪乳杆菌可长期在小鼠肠道定植，分泌弓形虫SAG2A蛋白，提高小鼠肠道IgA分泌水平，产生特异性SAG2A蛋白抗体，增强黏膜免疫；增加脾细胞增殖活性，提高血清中IL‑10水平。提示重组干酪乳杆菌在抗弓形虫病中具有巨大的潜力。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因工程，具体为一种表达弓形虫sag2a蛋白的重组干酪乳杆菌及其构建方法和应用。

技术介绍

1、刚地弓形虫(toxoplasma gondii)是一种重要的机会致病原虫，广泛寄生于所有有核细胞中，人类和多种脊柱动物都可以作为其中间宿主，引起人兽共患的弓形虫病(toxoplasmosis)。弓形虫病主要分为两大类，先天性和获得性。先天性的弓形虫病是怀孕妇女感染了弓形虫后传给婴儿，导致出生的婴儿患有脑积水、器官功能损伤、大脑钙化等典型疾病甚至死亡。后天获得性的弓形虫病是指由外界感染而获得的，常为隐性传播，当宿主免疫功能正常时无明显临床症状，淋巴结肿大为主要临床类型。当宿主免疫机能低下时，感染弓形虫的症状将体现出来，表现为脑膜脑炎、精神异常和癫痫。弓形虫不但可以感染人，同时也可以感染各种动物。当人食入生的或者未煮熟的含有被弓形虫卵囊污染的动物制品时，则会感染弓形虫，严重的危害人类的健康。

2、到目前为止，还没有一种市售的疫苗可以完全预防弓形虫病。唯一商业化的疫苗是s48弓形虫速殖子减毒株由于该疫苗保质期较短，生产成本也较高，且疫苗的安全本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种表达弓形虫SAG2A蛋白的重组干酪乳杆菌，其特征在于，所述重组干酪乳杆菌含有重组表达载体pPG612.1-SAG2A；所述重组表达载体的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。

2.权利要求1所述的重组干酪乳杆菌的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：将重组表达载体pPG612.1-SAG2A转化至干酪乳杆菌感受态细胞，得到重组干酪乳杆菌。

3.根据权利要求2所述的构建方法，其特征在于，所述干酪乳杆菌感受态细胞为L.casei 393。

4.根据权利要求2所述的构建方法，其特征在于，所述重组表达载体pPG612.1-SAG2A的构建方法包括如下步...

【技术特征摘要】

1.一种表达弓形虫sag2a蛋白的重组干酪乳杆菌，其特征在于，所述重组干酪乳杆菌含有重组表达载体ppg612.1-sag2a；所述重组表达载体的核苷酸序列如seq id no：1所示。

2.权利要求1所述的重组干酪乳杆菌的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：将重组表达载体ppg612.1-sag2a转化至干酪乳杆菌感受态细胞，得到重组干酪乳杆菌。

3.根据权利要求2所述的构建方法，其特征在于，所述干酪乳杆菌感受态细胞为l.casei 393。

4.根据权利要求2所述的构建方法，其特征在于，所述重组表达载体ppg612.1-sag2a的构建方法包括如下步骤：将弓形虫sag2a基因连接至克隆载体peasy-t1 simple获得重组载体peasy-t1 simple-sag2a；将重组载体peasy-t1 simple-sag2a和乳酸菌表达载体ppg612...

【专利技术属性】
技术研发人员：金春梅，贾芮，李亭玉，李宁宇，于龙政，付延军，李钢，汲生威，
申请(专利权)人：延边大学，
类型：发明
国别省市：