一种制备固定化脂肪酶的方法技术

本发明专利技术公开了一种制备固定化脂肪酶的方法，涉及生物化工和生物技术领域。该固定化方法步骤为：首先，将壳聚糖溶液和改性的聚乙烯醇溶液进行充分混合，形成凝胶。然后，用三聚磷酸钠溶液对凝胶进行固化，形成脂肪酶的固定化载体，再用戊二醛溶液活化脂肪酶的固定化载体。最后，将已活化的脂肪酶固定化载体浸泡在含有一定量脂肪酶的乳化液中，进行脂肪酶的固定化。该固定化脂肪酶制备简便，在保证酶的活性的同时提高脂肪酶的负载率，形成储藏稳定性以及重复使用性都有所提高的固定化脂肪酶方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物化工和生物，具体涉及到一种制备固定化脂肪酶的方法。

技术介绍

1、脂肪酶(lipase,lip)能够催化水解、酯化、转酯化和多肽合成等反应，它的催化活性高，底物谱广泛，无论在酶学理论研究和实际工业生产领域都受到了广泛的关注。在食品工业中lip被用于肉类脱脂、面粉改良、油脂改性、奶酪加工、酿酒和酱料加工。在饲料工业中，lip与其他碳水化合物降解酶复配成复合酶作为饲料添加剂，可以有效提高饲料利用率。lip还被广泛应用于医药和精细化工工业中的手性化合物的生物拆分。在造纸工业中，lip可以实现木浆中松脂的酶法去除。在生物柴油工业中，lip可以用于催化油脂与断链醇的酯交换反应，用于酶法合成生物柴油。在洗涤工业、皮革加工和纺织工业中lip也被大量应用。然而，在工业的实际应用过程中，游离的lip存在成本高、稳定性差、重复利用率低等问题。因此，寻找在能保证酶的催化活性及降低成本同时，提升其稳定性和重复利用率的方法，是解决此类问题的关键。固定化酶技术是可以有效解决酶制剂稳定性差、重复利用率低及成本高等问题的方法之一。

2、目前有关酶的固定化方法本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种制备固定化脂肪酶的方法，其特征在于，首先，用3-氨丙基三乙氧基硅烷APTES溶液与聚乙烯醇PVA溶液反应，将PVA的羟基改性成氨基，生成改性的PVA，记为PVA*；再将壳聚糖CS溶液和PVA*溶液进行充分混合，形成CS-PVA*凝胶；然后，用三聚磷酸钠STPP溶液对CS-PVA*凝胶进行固化，形成Lip的固定化载体CS-PVA*-STTP，再用戊二醛GA溶液对载体进行活化，形成活化的Lip固定化载体CS-PVA*-STTP；最后，将已活化的Lip固定化载体CS-PVA*-STTP浸泡在含有Lip的乳化液中，进行Lip的固定化；用缓冲溶液清洗固定化的Lip，除去未结合的游离酶，获得...

【技术特征摘要】

1.一种制备固定化脂肪酶的方法，其特征在于，首先，用3-氨丙基三乙氧基硅烷aptes溶液与聚乙烯醇pva溶液反应，将pva的羟基改性成氨基，生成改性的pva，记为pva*；再将壳聚糖cs溶液和pva*溶液进行充分混合，形成cs-pva*凝胶；然后，用三聚磷酸钠stpp溶液对cs-pva*凝胶进行固化，形成lip的固定化载体cs-pva*-sttp，再用戊二醛ga溶液对载体进行活化，形成活化的lip固定化载体cs-pva*-sttp；最后，将已活化的lip固定化载体cs-pva*-sttp浸泡在含有lip的乳化液中，进行lip的固定化；用缓冲溶液清洗固定化的lip，除去未结合的游离酶，获得固定化脂肪酶lip@cs-pva*-stpp。

2.根据权利要求1所述的一种制备固定化脂肪酶的方法，其特征在于，具体的lip固定化条件为：固定化温度是0-4℃，固定化时间是2-12h，震荡200-600rpm。

3.根据权利要求1或2所述的一种制备固定化脂肪酶的方法，其特征在于，所述pva*是采用质量分数为1.5％-9％的pva溶液经0.02mol/l-2mol/l的a...

【专利技术属性】
技术研发人员：姜丽丽，李爽，刘勇，梁家琦，
申请(专利权)人：大连理工大学，
类型：发明
国别省市：