本发明专利技术属于基因检测技术领域，具体涉及一种焦虑障碍用药指导的基因检测试剂盒及使用方法，试剂盒包括用于检测CYP2C19基因的rs4244285、rs4986893和rs12248560位点，CYP3A5基因的rs776746位点，GABRA1基因的rs4263535位点，HTR1A基因的rs6295位点，UGT2B15基因的rs1902023位点的引物和探针，使用方法，包括1)预混分装基因检测试剂分别得到PCR反应液1‑14，反应液1‑14分装在两个8联PCR反应条中，共同组成PCR反应体系；2)将样本提取的DNA加入步骤1)中的PCR反应体系中，混匀后进行PCR扩增；3)反应结束后进行基因分型判读，本发明专利技术试剂盒具有高灵敏度、低成本、操作简便、检测周期短，判读直观等特点，可以快速精准的对焦虑障碍相关药物基因多态性进行检测。
1、焦虑障碍，又称“焦虑症”，是一组以焦虑症状为主要临床相的精神障碍的统称，包括惊恐障碍、广泛性焦虑障碍及社交焦虑障碍等精神障碍，需要积极的医学处理。焦虑障碍主要表现为过度的担忧忍惧和焦虑，以及相关的行为异常。who对包括我国在内的28个国家进行了世界精神卫生调查及跨文化研究，从已完成该项研究的美国、新西兰、加拿大、挪威、德国、澳大利亚等西方国家14项流行病学研究中发现，人群中焦虑障碍终身患病率为13.6％～18.6％，年患病率为5.6％～19.3％。在wh0/wmhs的京沪样本中，沈渔邨、张明园等对5210名18—70周岁之间人群调查发现焦虑障碍年患病率为2.7％。焦虑障碍发病年龄较早，80～90％在35岁以前发病，10-25岁为发病高峰年龄。整体来看，焦虑障碍具有慢性病程，复发率高，共病率高，社会功能明显缺损等特征，给家庭、社会带来沉重的经济负担和破坏力。
2、目前，药物治疗是焦虑障碍的重要治疗方式，焦虑障碍治疗药物主要包括第二代抗焦虑药物(苯二氮类药物)、第三代抗焦虑药物(阿扎哌隆类)。但是，药物体内代谢、转运及药物作用靶点基因的遗传变异及其表达水平的变化可通过影响药物的体内浓度和敏感性，导致药物疗效和不良反应呈现出巨大的个体差异。因此，对焦虑障碍相关药物代谢酶和药物靶点基因进行检测可指导临床针对特定的患者选择合适的药物和给药剂量，实现个体化用药，从而提高药物治疗的有效性和安全性，防止严重药物不良反应的发生。
>3、目前针对焦虑障碍用药指导的基因检测试剂盒检测位点不够全面，大多覆盖3-5个位点。同时最常用的有直接测序法，二代测序法，荧光探针法，但是这些技术有各自的应用缺陷，有的操作繁琐，检测周期长，有的判读不直观，使得目前在临床上对于焦虑障碍用药指导的基因检测应用不佳，一直无法满足临床检测需求。
技术实现思路
1、为了解决现有技术中的问题，本专利技术提供一种焦虑障碍用药指导的基因检测试剂盒及使用方法，达到焦虑障碍用药指导基因检测试剂盒具有高灵敏度、低成本、操作简便、检测周期短，判读直观等特点，可以快速精准的对焦虑障碍相关药物基因多态性进行检测的目的。
2、本专利技术解决其技术问题是采用以下技术方案实现的：
3、本专利技术目的在于提供一种焦虑障碍用药指导的基因检测试剂盒，包括用于检测cyp2c19、cyp3a5、gabra1、htr1a和ugt2b15基因的引物和探针。
4、进一步的，试剂盒检测的基因多态性位点包括cyp2c19基因的rs4244285、rs4986893和rs12248560位点，cyp3a5基因的rs776746位点，gabra1基因的rs4263535位点，htr1a基因的rs6295位点，ugt2b15基因的rs1902023位点。
5、进一步的，用于检测rs4244285位点的引物和探针：
6、野生型arms上游引物，4285-wf3：
7、seq iq no.1：cccactatcattgattatttcttg
8、突变型arms上游引物，4285-mf3：
9、seq iq no.2：cccactatcattgattatttctta
10、共同下游引物，4285-r：
11、seq iq no.3：aagcaatcaataaagtcccgagg
12、荧光探针4285-p：
13、seq iq no.4：fam-tggagaaagtaaaagaacaccaagaatcg-bhq1
14、用于检测rs4986893位点引物和探针：
15、野生型arms上游引物，6893-wf2：
16、seq iq no.5：ggattgtaagcaccccctag
17、突变型arms上游引物，6893-mf4：
18、seq iq no.6：ggattgtaagcactcccaga
19、共同下游引物，6893-r：
20、seq iq no.7：gtattcaaaaatgtacttcagggct
21、荧光探针,6893-p：
22、seq iq no.8：fam-ttgcttcctgagaaaccacttacagtct-bhq1
23、用于检测rs12248560位点引物和探针：
24、野生型arms上游引物，8560-wf3：
25、seq iq no.9：aatttgtgtcttctgttctcaagac
26、突变型arms上游引物，8560-mf4：
27、seq iq no.10：aatttgtgtcttctgtgctcagcgt
28、共同下游引物，8560-r：
29、seq iq no.11：gttggtgccacacagctcatag
30、荧光探针,8560-p：
31、seq iq no.12：fam-ctgatgtaagagataatgcgccacgat-bhq1用于检测rs776746位点引物和探针：
32、野生型arms上游引物，6746-wf3：
33、seq iq no.13：gtggtccaaacagggaagagacgc
34、野生型arms下游引物，6746-r：
35、seq iq no.14：ggagagtggcataggagataccc
36、荧光探针,6746-p1：
37、seq iq no.15：fam-atgtaccacccagcttaacgaatgc-bhq1
38、突变型arms上游引物，6746-mr2：
39、seq iq no.16：ctttaaagagctcttttgtctttcta
40、突变型arms下游引物，6746-f：
41、seq iq no.17：acagcaagagtctcacacagg
42、荧光探针,6746-p2：
43、seq iq no.18：fam-tatgatgaagggtaatgtggtccaa-bhq1
44、用于检测rs4263535位点引物和探针：
45、野生型arms上游引物，3535-wf3：
46、seq iq no.19：actggattcattcttgtccataagta
47、突变型arms上游引物，3535-mf3：
48、seq iq no.20：actggattcattcttgtccataagtg
49、共同下游引物，3535-r：
50、seq iq no.21：tacactgaccatgct本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种焦虑障碍用药指导的基因检测试剂盒，其特征在于，包括用于检测CYP2C19、CYP3A5、GABRA1、HTR1A和UGT2B15基因的引物和探针。
2.如权利要求1所述一种焦虑障碍用药指导的基因检测试剂盒，其特征在于：试剂盒检测的基因多态性位点包括CYP2C19基因的rs4244285、rs4986893和rs12248560位点，CYP3A5基因的rs776746位点，GABRA1基因的rs4263535位点，HTR1A基因的rs6295位点，UGT2B15基因的rs1902023位点。
3.如权利要求2所述一种焦虑障碍用药指导的基因检测试剂盒，其特征在于：
4.如权利要求3所述一种焦虑障碍用药指导的基因检测试剂盒，其特征在于：还包括用于监测的内控基因MTHFR的引物和探针，其序列为：
5.如权利要求4所述一种焦虑障碍用药指导的基因检测试剂盒，其特征在于：探针5’端荧光基团为FAM或CY5，3’端的淬灭基团为BHQ1或BHQ2。
6.如权利要求1所述一种焦虑障碍用药指导的基因检测试剂盒，其特征在于：试剂盒还包括PCR反应液，PCR反应液包含了PCR反应所需要的热启动Taq酶、UDG酶、缓冲液、镁离子、dNTP物质。
7.如权利要求1-6任一项所述一种焦虑障碍用药指导的基因检测试剂盒的使用方法，其特征在于：包括以下步骤：
8.如权利要求7所述一种焦虑障碍用药指导的基因检测试剂盒的使用方法，其特征在于：步骤2)中PCR扩增的条件为：
...
【技术特征摘要】
1.一种焦虑障碍用药指导的基因检测试剂盒，其特征在于，包括用于检测cyp2c19、cyp3a5、gabra1、htr1a和ugt2b15基因的引物和探针。
2.如权利要求1所述一种焦虑障碍用药指导的基因检测试剂盒，其特征在于：试剂盒检测的基因多态性位点包括cyp2c19基因的rs4244285、rs4986893和rs12248560位点，cyp3a5基因的rs776746位点，gabra1基因的rs4263535位点，htr1a基因的rs6295位点，ugt2b15基因的rs1902023位点。
3.如权利要求2所述一种焦虑障碍用药指导的基因检测试剂盒，其特征在于：
4.如权利要求3所述一种焦虑障碍用药指导的基因检测试剂盒，其...
【专利技术属性】
技术研发人员：黄晓坤，韩勋领，谢海迎，游东蕊，罗锋，
申请(专利权)人：重庆浦洛通基因医学研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：
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