一种轮枝镰刀菌、微生物菌剂及其应用制造技术

本发明专利技术属于微生物学及其农业应用技术领域，具体涉及一种轮枝镰刀菌、微生物菌剂及其应用。本发明专利技术轮枝镰刀菌从野生茄子根茎分离获得，结合其形态特征、生理生化特性及16Sr DNA同源性分析鉴定为轮枝镰刀菌，对烟草疫霉菌和烟草尖孢镰刀菌具高抑菌活性，抑菌率＞90%；本发明专利技术菌株可分泌一些物质抑制病原菌的生长，使其失去内容物，完全干瘪直至死亡；抗逆性试验验证结果表明，本发明专利技术轮枝镰刀菌对温度、pH、紫外照射等条件具有耐受性，能够保持至少高于50%的抑菌活性；本发明专利技术菌株能够在烟草植株各个组织定殖，对烟草黑胫病和烟草根腐病具有联合防治功效，生防效果明显优于市售生防菌剂和化学药剂。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于微生物学及其农业应用，具体涉及一种轮枝镰刀菌、微生物菌剂及其应用。

技术介绍

1、烟草黑胫病( phytophora nicotiana breda de haan) 又叫也叫烟黑根、黑杆疯,主要侵染烟叶的根部和茎秆基部,因为上面产生了黑病斑,故称“黑胫病”。苗期较少发病,但主要危害烟株在大田中。症状因烟株生长发育阶段和天气条件的差异而有很大区别[2]{王文静, 2021 #136;王文静, 2021 #136}。带菌的泥土、粪肥及浇灌水、带病烟苗是烟草黑胫病的侵染源，其中前三种是侵染源，最后的是形成游动孢子和孢子囊灌溉水或借雨传染,并造成再浸染。烟草黑胫病菌利用直接侵入或伤口传播，侵染部位大多为茎基都。而烟草黑胫病菌则以土传为主,雨、流水、粪肥、痫土壤、农事操作等均为其主要传染途径。侵染烟草的两种方式：①直接侵入。②伤口侵入。目前，用化学杀菌剂防治该病害的，一方面会污染环境，另一方面会使其具有抗药性。而生物防治具高效性，有无污染，无残留等特点，将会是今后防治烟草根茎类疾病的主要途径之一。许多研究表明，利用内生菌是一个有效途径，并且发现内生细菌中有假单胞杆菌属(pseudomonas spp.)和芽孢杆菌属(bacillusspp.)等对烟草黑胫病菌具有特别良好的防治效果。

2、烟草根腐病（tobacco root rot）在我国烟区经常发生，危害严重。近年来，随着我国土地集约化程度不断提高，烟田土壤连作也随之加重，导致根腐病的发生日益严重，呈蔓延趋势。平顶山烟区是河南的传统烟区，该病害的发病率在重病烟田达 30%以上，很大程度上对烟草的产量和质量造成了影响，降低了其工业可性。同时，根腐病的发生会促使黑胫病的爆发，进一步加重损失。因此，开展烟草黑胫病和烟草根腐病的联合防治是降低烟草根茎病害危害的重要策略，目前市售的化学药剂或生防制剂，通常需要配合使用来产生联合防治的功效，缺乏能够同时对烟草黑胫病和烟草根腐病同时产生显著防治效果的微生物菌剂。

技术实现思路

1、为了解决现有技术存在的问题，本专利技术的目的之一在于提供一种轮枝镰刀菌，对多种能够引发植物病害的病原菌具有抑菌作用，尤其对烟草黑胫病和烟草根腐病具有联合防治效果。

2、本专利技术的目的之二在于提供一种微生物菌剂，包含本专利技术提供的轮枝镰刀菌，可有效抑制菌丝生长，使菌丝失去内容物、完全干瘪死亡，失去浸染能力，能够用于烟草黑胫病和烟草根腐病的联合防治。

3、为了实现上述目的，本专利技术采用的技术方案如下：

4、一种轮枝镰刀菌，其保藏编号为cgmcc no.41104。

5、含有上述轮枝镰刀菌的微生物菌剂。

6、上述微生物菌剂为冻干粉或液体制剂；其中液体制剂具体可采用上述轮枝镰刀菌菌株发酵液，在本专利技术的具体实施方式中，轮枝镰刀菌菌株发酵液的发酵培养温度为28~35℃。

7、上述微生物菌剂中轮枝镰刀菌浓度可根据具体应用场景需求调整，微生物菌剂中轮枝镰刀菌的浓度为1.0×108cfu/ml ~1.0×109cfu/ml。作为举例说明，在本专利技术具体实施方式中提供的微生物菌剂中轮轮枝镰刀菌的浓度为1.0×108cfu/ml。

8、上述轮枝镰刀菌和微生物菌剂可应用于防治植物病原真菌引起的植株病害，其中植物病原真菌选自烟草疫霉菌、烟草尖孢镰刀菌。

9、上述轮枝镰刀菌和微生物菌剂可用于防治烟草黑茎病和镰刀菌根腐病，作为优选的，防治烟草黑茎病和镰刀菌根腐病的微生物菌剂中轮枝镰刀菌的浓度为1.0×108cfu/ml。

10、本专利技术有益效果：

11、（1）本专利技术轮枝镰刀菌从野生茄子根茎分离获得，结合其形态特征、生理生化特性及16sr dna同源性分析鉴定为轮枝镰刀菌，对烟草疫霉菌和烟草尖孢镰刀菌具高抑菌活性，抑菌率＞90%；

12、（2）本专利技术轮枝镰刀菌可分泌一些物质抑制病原菌的生长，使其失去内容物，完全干瘪直至死亡；抗逆性试验验证结果表明，本专利技术轮枝镰刀菌对温度、ph、紫外照射等条件具有耐受性，能够保持至少高于50%的抑菌活性；

13、（3）本专利技术轮枝镰刀菌能够在烟草植株各个组织定殖，对烟草黑胫病和烟草根腐病具有联合防治功效，具体的在本专利技术具体实施方式的盆栽试验表明对烟草黑胫病和根腐病的相对防效分别为76.9%和76.7%，大田试验相对防效分别达到71%和64.0%，明显优于市售生防菌剂和化学药剂。

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【技术保护点】

1.一种轮枝镰刀菌，其特征在于，其保藏号为CGMCC NO.41103。

2.含有如权利要求1所述轮枝镰刀菌的微生物菌剂。

3.如权利要求2所述的微生物菌剂，其特征在于，所述微生物菌剂为冻干粉。

4.如权利要求2所述的微生物菌剂，其特征在于，所述微生物菌剂为液体制剂。

5.如权利要求4所述的微生物菌剂，其特征在于，所述微生物菌剂为如权利要求1所述轮枝镰刀菌的菌株发酵液。

6.如权利要求4~5任一项所述的微生物菌剂，其特征在于，所述微生物菌剂中轮枝镰刀菌的浓度为1.0×107 cfu/mL～1.0×109 cfu/mL。

7.如权利要求1所述轮枝镰刀菌或如权利要求2~7任一项所述微生物菌剂在防治植物病原真菌引起的植株病害方面的应用，其特征在于，植物病原真菌选自烟草疫霉菌、烟草尖孢镰刀菌。

8.如权利要求7所述应用，其特征在于，所述植株病害为烟草黑胫病和镰刀菌根腐病。

9.如权利要求8所述应用，其特征在于，所述微生物菌剂中轮枝镰刀菌的浓度为1.0×108 cfu/mL。

【技术特征摘要】

1.一种轮枝镰刀菌，其特征在于，其保藏号为cgmcc no.41103。

2.含有如权利要求1所述轮枝镰刀菌的微生物菌剂。

3.如权利要求2所述的微生物菌剂，其特征在于，所述微生物菌剂为冻干粉。

4.如权利要求2所述的微生物菌剂，其特征在于，所述微生物菌剂为液体制剂。

5.如权利要求4所述的微生物菌剂，其特征在于，所述微生物菌剂为如权利要求1所述轮枝镰刀菌的菌株发酵液。

6.如权利要求4~5任一项所述的微生物菌剂，其特征在于...

【专利技术属性】
技术研发人员：许跃奇，贾方方，王明鑫，何晓冰，张恒，褚玉麟，常栋，马世原，张富生，阴广宇，柳洋，
申请(专利权)人：河南省烟草公司平顶山市公司，
类型：发明
国别省市：