肌酸在提高绵羊卵母细胞体外囊胚发育率的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种肌酸在提高绵羊卵母细胞体外囊胚发育率的应用，所述肌酸的浓度为0.5mmol/L。所述肌酸添加到体外成熟体系和体外胚胎培养体系。本发明专利技术基于绵羊卵母细胞、早期胚胎及卵泡液和输卵管液的代谢组学分析筛选出的关键代谢物质肌酸。在此基础上，本发明专利技术研究了肌酸对卵母细胞及早期胚胎的发育调节作用，将肌酸添加到绵羊卵母细胞体外成熟体系与体外胚胎培养体系，能显著提升绵羊卵母细胞的体外囊胚发育率，这证明了肌酸可作为体外培养体系的添加物，促进绵羊体外胚胎生产，且肌酸是发育微环境所包含的关键代谢物，对卵母细胞及胚胎发育友好。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及提高绵羊卵母细胞体外囊胚发育率的方法，具体涉及肌酸在提高绵羊卵母细胞体外囊胚发育率的应用。

技术介绍

1、成年绵羊的卵巢虽有几万个原始卵泡，但在整个自然繁育过程中，只有极少量的卵母细胞能受精形成胚胎，这表明大量的卵母细胞未被充分挖掘利用，难以发挥优良母羊的种质特性。如果这些卵母细胞可用于高效体外胚胎生产，将极大促进绵羊种质资源保存和开发利用。然而，绵羊卵母细胞体外发育潜力偏低，囊胚率难以逾越50％。因此，提升绵羊卵母细胞发育潜力对于充分发挥优良母羊遗传特性，促进羊产业高效发展具有重要意义。

2、卵母细胞体外成熟指从卵巢的有腔卵泡中收集未成熟的卵丘-卵母细胞复合体，并通过体外培养获得成熟的卵母细胞。体外胚胎生产是现代繁殖技术的核心组成部分，近年来，结合活体采卵，体外胚胎生产在世界范围内快速推广，成为家畜遗传改良和良种扩繁的重要手段。然而，由于体外培养体系的不完善，体外生产胚胎的质量远低于体内生产胚。

3、文献“原花青素b2对不同年龄绵羊卵母细胞体外成熟及胚胎发育的影响”(李厚儒，硕士论文，石河子大学，2023年)中公开了本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.肌酸在提高绵羊卵母细胞体外囊胚发育率的应用，其特征在于，所述肌酸的浓度为0.5mmol/L。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述肌酸添加到体外成熟体系和体外胚胎培养体系。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述肌酸添加到体外成熟液中，所采用的体外成熟液包含：M199、0.5IU/mL卵泡刺激素、0.5IU/mL促黄体生成素、1μg/mL雌二醇、50μg/mL庆大霉素、4mmol/L丙酮酸钠和50μmol/LL-胱氨酸。

4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述肌酸添加到体外胚胎培养液中，所采用的体外胚胎培养液包含：SOF、...

【技术特征摘要】

1.肌酸在提高绵羊卵母细胞体外囊胚发育率的应用，其特征在于，所述肌酸的浓度为0.5mmol/l。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述肌酸添加到体外成熟体系和体外胚胎培养体系。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述肌酸添加到体外成熟液中，所采用的体外成熟液包含：m199、0.5iu/ml卵泡刺激素、0.5iu/ml促黄体生成素、1μg/ml雌二醇、50μg/ml庆大霉素、4mmol/l丙酮酸钠和50μmol/ll-胱氨酸。

4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述肌酸添加到体外胚胎培养液中，所采用的体外胚胎培养液包含：sof、2％必需氨基酸、1％非必需氨基酸、0.48mg/ml肌醇、1mmol/l l-谷氨酰胺和6mg/mlbsa；

5.根据权利要求1～4中任意一项所述的应用，其特征在于，该应用包含：

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述孤雌激活液a液包含：含钙镁dpbs缓冲液、0.5μmol/l钙离子霉素、3mg/ml牛血清白蛋白；

7.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，在体外成熟液中添加0.5mmol/l的肌酸；接着将卵丘-卵母细胞复合体转入体外成熟液中，于5％c...

【专利技术属性】
技术研发人员：周光斌，杜昆霖，潘波，秦建鹏，
申请(专利权)人：四川农业大学，
类型：发明
国别省市：