B602L蛋白的真核表达质粒、B602L蛋白、用途、检测体系制造技术

本申请属于生物领域，公开了一种非洲猪瘟B602L蛋白的真核表达质粒，所述质粒包括载体以及连接于载体中经过改造的AFSV B602L基因；所述经过改造的AFSV B602L基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。该质粒的目的基因经过密码子优化，并在B602L蛋白的N端设计蜂毒素信号肽序列(MKFLVNVALVFMVVYI SYIYA)，在B602L蛋白的C端设计(6～10)×His标签，并以柔性linker(3～5个GGGGS重复序列)与目的基因相连，该质粒经过表达得到蛋白的纯度高、用于间接ELISA检测后其灵敏度可达1:25600。同时，本发明专利技术还提供了B602L蛋白、用途、检测体系。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物领域，尤其涉及一种b602l蛋白的真核表达质粒、b602l蛋白、用途、检测体系。

技术介绍

1、非洲猪瘟是由非洲猪瘟病毒(african swine fever virus,asfv)引起的一种重要猪传染病，以发病急、病死率高为主要特征，猪是asfv唯一天然宿主。目前市场上尚没有特效药物和有效疫苗可用于治疗和预防非洲猪瘟，完善的生物安全防护措施和快速检测技术是该病主要防控的手段，且非洲猪瘟临床发病症状与经典猪瘟相似，开发特异敏感的血清学检测技术具有广阔的应用价值，有助于非洲猪瘟的鉴别诊断和防控净化工作。

2、asfv是一种有囊膜的、双股线性dna病毒，病毒基因组结构复杂，编码151～167个开放阅读框。其中已报道的p72、p54、p30、pp62、cd2v、b602l等蛋白具有较强的免疫原性，是亚单位疫苗和血清学检测技术研发的主要靶点。而其中非结构蛋白b602l在感染晚期高效表达于细胞质中，一般认为是p72蛋白分子伴侣，在病毒核衣壳组装过程中发挥重要作用。王鹏飞利用pgex-6p-1原核表达载体，原核表达b602l蛋白，并建立本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种非洲猪瘟B602L蛋白的真核表达质粒，其特征在于，所述质粒包括载体以及连接于载体中经过改造的AFSV B602L基因；所述经过改造的AFSV B602L基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.根据权利要求1所述的非洲猪瘟B602L蛋白的真核表达质粒，其特征在于，所述载体为杆状病毒穿梭载体pFastBac1；所述经过改造的AFSV B602L基因位于杆状病毒穿梭载体pFastBac1的EcoR I和Sal I限制性内切酶之间。

3.一种非洲猪瘟B602L蛋白，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

4.根据权利要求3所...

【技术特征摘要】

1.一种非洲猪瘟b602l蛋白的真核表达质粒，其特征在于，所述质粒包括载体以及连接于载体中经过改造的afsv b602l基因；所述经过改造的afsv b602l基因的核苷酸序列如seq id no.1所示。

2.根据权利要求1所述的非洲猪瘟b602l蛋白的真核表达质粒，其特征在于，所述载体为杆状病毒穿梭载体pfastbac1；所述经过改造的afsv b602l基因位于杆状病毒穿梭载体pfastbac1的ecor i和sal i限制性内切酶之间。

3.一种非洲猪瘟b602l蛋白，其特征在于，其氨基酸序列如seq id no.2所示。

4.根...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘郁夫，温健怡，雷颖，简艳珊，林子欣，林喜琪，彭杰，姚淑华，何海婵，
申请(专利权)人：肇庆学院，
类型：发明
国别省市：