System.ArgumentOutOfRangeException: 索引和长度必须引用该字符串内的位置。 参数名: length 在 System.String.Substring(Int32 startIndex, Int32 length) 在 zhuanliShow.Bind() 一种结合NY-ESO-1抗原的蛋白制造技术_技高网
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一种结合NY-ESO-1抗原的蛋白制造技术

技术编号:43768081 阅读:26 留言:0更新日期:2024-12-24 16:08
本发明专利技术公开了一种结合NY‑ESO‑1抗原的蛋白,其制备方法包括如下步骤:将一种结合NY‑ESO‑1抗原的前体蛋白的氨基酸序列进行大肠杆菌宿主密码子优化,将所述前体蛋白的核苷酸序列构建到pET21b质粒上,得到质粒1;将质粒1转化到大肠杆菌;诱导培养;纯化,收集蛋白,加入凝血酶透析过夜酶切;进一步纯化,得到一种结合NY‑ESO‑1抗原的蛋白,实验证明,本发明专利技术的结合NY‑ESO‑1抗原的蛋白可以高亲和力识别结合NY‑ESO‑1抗原K<subgt;D</subgt;=6.65μM。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物,尤其是涉及一种结合ny-eso-1抗原的蛋白和应用。


技术介绍

1、纽约食管鳞状细胞癌-1(ny-eso-1)是一种癌-睾丸抗原1b,由位于x染色体xq28区域的ctgag1b基因编码。ny-eso-1其限制性表达于生殖细胞,胎盘细胞和肿瘤细胞。

2、ny-eso-1在多种肿瘤类型中表达,包括神经母细胞瘤、骨髓瘤、黑色素瘤、滑膜肉瘤、膀胱癌、食管癌、肝细胞癌、头颈部癌、非小细胞肺癌、卵巢癌、前列腺癌和乳腺癌。在这些肿瘤类型中,ny-eso-1的表达频率有很大差异,最常见的表达肿瘤为神经母细胞瘤(82%)、滑膜肉瘤(80%)、黑色素瘤(46%)和卵巢癌(43%)。其他类型的肿瘤中ny-eso-1蛋白的表达在20-40%之间。因此ny-eso-1是一个重要的免疫治疗靶点。

3、ny-eso-1属于癌-睾丸抗原家族,是家族成员中免疫原性最强的肿瘤相关抗原之一。ny-eso-1在健康成人组织中的限制性表达,由治疗引起的脱靶毒性风险比较低,ny-eso-1已成为肿瘤免疫治疗的最有前途的靶点之一。针对此靶点,通过对识别结合此靶标蛋白的结合蛋白进行改造,可以达到治疗肿瘤的目的。目前的双抗蛋白药(kimmtrak)产品,也是将识别结合该靶标蛋白的结合蛋白与t细胞表面cd3受体的抗体连接。

4、但目前,双抗蛋白药种类少,因此,亟需更多的结合ny-eso-1抗原的蛋白用于制备双抗蛋白药。


技术实现思路

1、本专利技术的目的在于克服现有技术的不足,提供一种结合ny-eso-1抗原的蛋白。

2、本专利技术的第二个目的是提供编码上述蛋白的核苷酸序列。

3、本专利技术的第三个目的是提供一种结合ny-eso-1抗原的蛋白的制备方法。

4、本专利技术的第四个目的是提供上述蛋白在制备治疗肿瘤药物中应用。

5、本专利技术的技术方案概述如下:

6、一种结合ny-eso-1抗原的蛋白,所述一种结合ny-eso-1抗原的蛋白的氨基酸序列如seq id no.1所示。

7、编码上述蛋白的核苷酸序列。

8、一种结合ny-eso-1抗原的蛋白的制备方法,包括如下步骤:

9、1)将一种结合ny-eso-1抗原的前体蛋白的氨基酸序列进行大肠杆菌宿主密码子优化,得到编码所述前体蛋白的核苷酸序列,将编码所述前体蛋白的核苷酸序列构建到pet21b质粒上,得到质粒1;

10、所述一种结合ny-eso-1抗原的前体蛋白的氨基酸序列如seq id no.8所示;所述编码所述前体蛋白的核苷酸序列如seq id no.9所示;

11、2)将质粒1转化到表达菌e.coli bl21(de3)中,在含有抗生素的lb平板上培养;

12、3)挑取单菌落进行诱导培养;

13、4)纯化,收集蛋白,加入凝血酶透析过夜酶切;

14、5)进一步纯化,得到一种结合ny-eso-1抗原的蛋白。

15、上述一种结合ny-eso-1抗原的蛋白在制备治疗肿瘤药物中应用。

16、本专利技术具有如下有益效果:

17、实验证明,本专利技术的结合ny-eso-1抗原的蛋白可以高亲和力识别结合ny-eso-1抗原,kd=6.65μm。

本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种结合NY-ESO-1抗原的蛋白,其特征在于所述一种结合NY-ESO-1抗原的蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.编码权利要求1所述蛋白的核苷酸序列。

3.权利要求1的一种结合NY-ESO-1抗原的蛋白的制备方法,其特征是包括如下步骤:

4.权利要求1的一种结合NY-ESO-1抗原的蛋白在制备治疗肿瘤药物中应用。

【技术特征摘要】

1.一种结合ny-eso-1抗原的蛋白,其特征在于所述一种结合ny-eso-1抗原的蛋白的氨基酸序列如seq id no.1所示。

2.编码权利要求1所述蛋白的核苷酸序列。<...

【专利技术属性】
技术研发人员:叶升许家钰关凤慧
申请(专利权)人:天津大学
类型:发明
国别省市:

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