一种检测榴莲根腐病棕榈疫霉菌的试剂盒及其应用制造技术

本发明专利技术属于现代化农业技术领域，具体涉及一种一种检测榴莲根腐病棕榈疫霉菌的试剂盒及其应用。本发明专利技术针对棕榈疫霉菌的特异序列设计了引物及crRNA，开发了一种榴莲根腐病棕榈疫霉菌的快速可视化检测试剂和试剂盒。该试剂或试剂盒对榴莲根腐病棕榈疫霉菌的检测可在30分钟内完成，具有良好特异性且无交叉反应，灵敏度达到10 fg/μL。且无需在RPA扩增结束后开盖加入CRISPR/Cas12a反应体系，避免了因开盖导致的气溶胶污染。本发明专利技术无需使用大型仪器设备，具有耗时短、操作简便、灵敏性和特异性高等特点，适合临床样本及现场的快速可视化检测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于现代化农业，具体涉及一种一种检测榴莲根腐病棕榈疫霉菌的试剂盒及其应用。

技术介绍

1、由棕榈疫霉菌（ phytophthora palmivora）侵染引起的榴莲根腐病是我国及泰国、缅甸、越南和马来西亚等榴莲产地发生最严重的病害，制约榴莲产业的蓬勃发展。该病原菌寄主范围广泛，并能在榴莲植物的不同部位引起疾病。病原菌的田间快速检测是有效预防病害发生的关键手段，当前对于引起榴莲根腐病的棕榈疫霉菌的诊断主要通过症状观察、病原菌分离鉴定和基于pcr的常规方法。这些方法耗时长且容易导致延迟诊断；对于缓慢生长的病原菌可能漏检；存在交叉反应和假阳性问题。此外，传统技术通常需要专业人员操作，且对设备设施要求较高，增加了成本和复杂性。因此，亟需探索和发展更快速、准确、简便的棕榈疫霉菌检测方法。

2、目前，传统的植物病害鉴定方法包括病原菌的分离、培养和形态学鉴定，同时进行病原菌的致病性验证，最终结合分类资料确定病原菌的分类和地位。这种方法虽然是病原菌鉴定的基础，但易受操作者技能和经验、人为因素以及环境本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种检测榴莲根腐病棕榈疫霉菌的试剂，其特征在于，所述试剂包括检测榴莲根腐病棕榈疫霉菌基因组的引物对和/或检测榴莲根腐病棕榈疫霉菌的crRNA；

2.一种试剂盒，包含权利要求1所述的试剂和CRISPR-Cas系统。

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于：

4.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于：

5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于：

6.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于：

7.权利要求1所述的试剂和/或权利要求2～6中任一项所述的试剂盒在1）~2）中任一项中的应用：>

8.一种基于...

【技术特征摘要】

1.一种检测榴莲根腐病棕榈疫霉菌的试剂，其特征在于，所述试剂包括检测榴莲根腐病棕榈疫霉菌基因组的引物对和/或检测榴莲根腐病棕榈疫霉菌的crrna；

2.一种试剂盒，包含权利要求1所述的试剂和crispr-cas系统。

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于：

4.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于：

5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于：

6...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨成东，周志明，陈庆河，刘晓珍，林明泽，
申请(专利权)人：海南大学三亚南繁研究院，
类型：发明
国别省市：