一种针对轴突-胞体突触细胞膜蛋白的定量分析方法技术

技术编号:43740893 阅读:33 留言:0更新日期:2024-12-20 13:02
本发明专利技术涉及一种针对轴突‑胞体突触细胞膜蛋白的定量分析方法,通过对免疫荧光染色的神经元细胞层扫获得共聚焦图片;通过Fiji软件选取细胞膜上的感兴趣区域图像并拉直,获得RGB三通道的线型细胞膜蛋白分布图像;将获得的原始图像转换为二进制图像,再将两张二进制图像重叠在一起形成合成图像,合成图像上显示不同膜蛋白的分布和共定位信息;通过Fiji软件对合成图像上的膜蛋白进行计数和大小标记。本发明专利技术利用Fiji软件可在神经元细胞的荧光染色原始图片上迅速获得突触细胞膜蛋白上的共定位、计数和大小信息。从而在研究分析相关蛋白时可更加高效、便捷、准确。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及神经科学领域,用于分析免疫荧光染色后神经元细胞膜上膜蛋白的检测、计数和大小测量,以及两种荧光信号的共定位分析。本专利技术主要适用于对轴突-胞体突触的共定位和定量分析。


技术介绍

1、神经信号传递是生物体内最重要的基本生物学过程之一,有助于促进身体各个部分之间适当的协调和互动。细胞膜蛋白在神经信号传递中的作用研究成为了领域最关注的问题之一。在神经信号传递的情况下,细胞膜蛋白的作用不仅限于维护细胞膜的完整性和稳定性,还主要控制着神经递质的分泌和迅速传递。因此对神经信号传递的研究离不开对神经元细胞膜蛋白的研究。

2、目前对神经元细胞膜蛋白的分离还停留在蛋白质组学中,需要依靠蛋白组学的方法提取纯化目标蛋白用于后续研究,过程复杂且漫长,且对于多种膜蛋白的相互作用、共定位、分布情况无法获知。

3、突触前和突触后膜蛋白的共定位分析是神经科学研究中的重要技术,主要用于理解神经元之间的信号传递机制。有助于理解不同膜蛋白之间的相互作用及其在突触功能中的角色。通过分析膜蛋白的共定位变化,可以帮助理解神经退行性疾病、精神疾病等的发病机制,识别本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种针对轴突-胞体突触细胞膜蛋白的定量分析方法,其特征在于,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的针对轴突-胞体突触细胞膜蛋白的定量分析方法,其特征在于,适用于抑制性突触,包括突触前膜蛋白VIAAT、GlyT2以及突触后膜蛋白Gephyrin、GABAARs以及GlyR簇。

3.根据权利要求1所述的针对轴突-胞体突触细胞膜蛋白的定量分析方法,其特征在于,选择感兴趣区域图像时,应选择同时具有突触前膜和突触后膜的免疫染色阳性荧光点,并避开非特异性的免疫荧光杂点。

4.根据权利要求1所述的针对轴突-胞体突触细胞膜蛋白的定量分析方法,其特征在于,在检测膜...

【技术特征摘要】

1.一种针对轴突-胞体突触细胞膜蛋白的定量分析方法,其特征在于,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的针对轴突-胞体突触细胞膜蛋白的定量分析方法,其特征在于,适用于抑制性突触,包括突触前膜蛋白viaat、glyt2以及突触后膜蛋白gephyrin、gabaars以及glyr簇。

3.根据权利要求1所述的针对轴突-胞体突触细胞膜蛋白的定量分析方法,其特征在于,选择感兴趣区域图像时,应选择同时具有突触前膜和突触后膜的免疫染色阳性荧光点,并避开非特异性的免疫荧光杂点。

4.根据权利要求1所述的针对轴突-胞体突触细胞膜蛋白的定量分析方法,其特征在于,在检测膜蛋...

【专利技术属性】
技术研发人员:朱红梅陈艳英赵一灵吉勒斯·库尔唐帕斯卡尔·布朗谢罗
申请(专利权)人:浙江大学绍兴研究院
类型:发明
国别省市:

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