【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于免疫荧光检测，具体涉及一种用于诊断原发性和继发性iga肾病的免疫荧光试剂盒。
技术介绍
1、iga，即免疫球蛋白a，其在血清中的含量仅次于igg，它占血清免疫球蛋白的10～20％，存在于黏膜组织，例如消化道、呼吸道以及泌尿生殖系统。
2、iga肾病一般指原发性iga肾病，它是最为常见的一种原发性肾小球疾病，是指肾小球系膜区沉积iga或以iga沉积为主，伴或不伴有其他免疫球蛋白在肾小球系膜区沉积的原发性肾小球病。病变类型包括局灶节段性病变、毛细血管内增生性病变、系膜增生性病变、新月体病变及硬化性病变等。其临床表现为反复发作性肉眼血尿或镜下血尿，可伴有不同程度蛋白尿，部分患者可以出现严重高血压或者肾功能不全。
3、原发性iga肾病(igan)的诊断必须依赖于肾活检，主要观察iga在肾小球系膜区的沉积现象。免疫荧光或免疫组化染色是必需的诊断方法，用于证实iga沉积的存在。近年来，iga肾病的研究取得了重大进展，发现igan患者肾小球系膜区沉积的主要iga是铰链区o-糖链半乳糖缺乏的iga1，也被称作低糖基化iga1(gd-iga1)。这种gd-iga作为自身抗原引发免疫反应，导致抗gd-iga1抗体产生，形成大分子免疫复合物并沉积在肾小球系膜区，进而引发系膜细胞增殖和细胞外基质沉积，对肾脏造成损伤。而如系统性红斑狼疮(狼疮性肾炎)、紫癜性肾炎、膜性肾病等继发性iga肾病也会有iga沉积，其通常沉积的iga不存在gd-iga1，因此在发病机制上与igan有显著差异。
4、在临床实践中，通
5、综上，针对gd-iga1特异标志物的检测方法的限制阻碍了其在临床上的应用，并影响了iga肾病的鉴别诊断和治疗方案的选择。开发新的、快速、特异、灵敏的诊断iga肾病的技术是必要的，具有广泛的临床应用前景和重要的科学意义。也就是说，因快速方便地区分iga肾病是原发性还是继发性iga肾病，能对病人后续的用药方案和治疗方案起到极大的帮助，因而本领域需要一种新的用于诊断原发性和继发性iga肾病的免疫荧光试剂盒。
技术实现思路
1、针对以上现有技术中的问题，本专利技术提供一种用于检测原发性iga肾病和继发性iga肾病的免疫荧光试剂盒，能识别肾脏沉积的低糖基化iga1。
2、本专利技术提供一种用于诊断原发性和继发性iga肾病的免疫荧光试剂盒，所述免疫荧光试剂盒中含一抗和二抗，且所述一抗为抗cd175抗体和/或抗cd175s抗体；所述二抗为能与所述一抗特异性结合的抗体，且所述二抗已经使用荧光染料标记。
3、在一种具体的实施方式中，所述一抗为抗人cd175抗体和/或抗人cd175s抗体。
4、在一种具体的实施方式中，所述一抗为鼠抗人cd175抗体和/或鼠抗人cd175s抗体，优选鼠抗人cd175抗体。
5、在一种具体的实施方式中，所述一抗为单克隆抗体或多克隆抗体，优选单克隆抗体。
6、在一种具体的实施方式中，所述二抗为含有cy3标记的羊抗小鼠igg抗体。
7、在一种具体的实施方式中，所述试剂盒中还包括稀释液、缓冲液、洗涤液和封闭液中的一种或多种，所述洗涤液和封闭液用于清洗和封闭非特异性结合的抗体；所述继发性iga肾病包括紫癜性肾炎、狼疮性肾炎和膜性肾病中的一种或多种。
8、本专利技术还提供一种如上所述的免疫荧光试剂盒的使用方法，其中一抗采用cd175单克隆抗体的比例为1:100～1:200，而一抗采用cd175s单克隆抗体的比例为1:50～1:100，最后用荧光显微镜观察并记录荧光信号。
9、本专利技术中，所述免疫荧光试剂盒用于检测的样品为新鲜冰冻的肾活检组织或甲醛固定石蜡包埋的肾组织，优选为新鲜冰冻的肾活检组织。
10、本专利技术相对于现有技术具有以下优点及效果：
11、本专利技术采用免疫荧光的方法首次检测了cd175和cd175s抗原在iga和非iga系膜增殖性肾小球肾炎的表达情况。结果显示，cd175和/或cd175s特异地在有肾小球系膜区iga沉积的igan中显著差异表达，而非iga沉积的系膜增殖性肾小球肾炎则不表达。因此，cd175和/或cd175s糖蛋白抗原可以作为一个候选的特异性检测gd-iga1沉积临床诊断的生物标记物。此外，本专利技术中对大样本原发性igan和继发性iga沉积的roc分析结果表明，cd175糖蛋白抗原对原发性igan诊断的敏感性和特异性分别为92.7％和83.9％。
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1.一种用于诊断原发性和继发性IgA肾病的免疫荧光试剂盒，其特征在于，所述免疫荧光试剂盒中含一抗和二抗，且所述一抗为抗CD175抗体和/或抗CD175s抗体；所述二抗为能与所述一抗特异性结合的抗体，且所述二抗已经使用荧光染料标记。
2.根据权利要求1所述的用于诊断原发性和继发性IgA肾病的免疫荧光试剂盒，其特征在于，所述一抗为抗人CD175抗体和/或抗人CD175s抗体。
3.根据权利要求2所述的用于诊断原发性和继发性IgA肾病的免疫荧光试剂盒，其特征在于，所述一抗为鼠抗人CD175抗体和/或鼠抗人CD175s抗体，优选鼠抗人CD175抗体。
4.根据权利要求1所述的用于诊断原发性和继发性IgA肾病的免疫荧光试剂盒，其特征在于，所述一抗为单克隆抗体或多克隆抗体，优选单克隆抗体。
5.根据权利要求1所述的用于诊断原发性和继发性IgA肾病的免疫荧光试剂盒，其特征在于，所述二抗为含有Cy3标记的羊抗小鼠IgG抗体。
6.根据权利要求1所述的用于诊断原发性和继发性IgA肾病的免疫荧光试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中还包括稀释液、
7.一种如权利要求1～6中任意一项所述的免疫荧光试剂盒的使用方法，其特征在于，一抗采用CD175单克隆抗体的比例为1:100～1:200，而一抗采用CD175s单克隆抗体的比例为1:50～1:100，最后用荧光显微镜观察并记录荧光信号。
...【技术特征摘要】
1.一种用于诊断原发性和继发性iga肾病的免疫荧光试剂盒，其特征在于，所述免疫荧光试剂盒中含一抗和二抗，且所述一抗为抗cd175抗体和/或抗cd175s抗体；所述二抗为能与所述一抗特异性结合的抗体，且所述二抗已经使用荧光染料标记。
2.根据权利要求1所述的用于诊断原发性和继发性iga肾病的免疫荧光试剂盒，其特征在于，所述一抗为抗人cd175抗体和/或抗人cd175s抗体。
3.根据权利要求2所述的用于诊断原发性和继发性iga肾病的免疫荧光试剂盒，其特征在于，所述一抗为鼠抗人cd175抗体和/或鼠抗人cd175s抗体，优选鼠抗人cd175抗体。
4.根据权利要求1所述的用于诊断原发性和继发性iga肾病的免疫荧光试剂盒，其特征在于，所述一抗为单克隆抗体或多克隆抗体...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘虹，夏鸣，杨淡昳，朱雪婧，刘帝，谭夏，冷斌，赵隽永，
申请(专利权)人：中南大学湘雅二医院，
类型：发明
国别省市：
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