一种卤醇脱卤酶固定化方法技术

技术编号:43714022 阅读:33 留言:0更新日期:2024-12-18 21:27
本发明专利技术涉及一种卤醇脱卤酶固定化方法,属于酶固定化技术领域。为了解决提高酶固定活性的问题,提供一种卤醇脱卤酶固定化方法,卤醇脱卤酶的固定化载体为环氧树脂,卤醇脱卤酶固定化方法包括以下步骤:将卤醇脱卤酶的粗酶液与环氧树脂载体之间进行吸附,卤醇脱卤酶表面氨基残基与环氧基形成共价键,使卤醇脱卤酶和环氧树脂载体之间形成共价连接,使酶分子和环氧基发生多点共价,从而提升卤醇脱卤酶与环氧树脂载体的结合力,获得的卤醇脱卤酶固定化载体加入到含有甘氨酸的缓冲液中,通过甘氨酸与卤醇脱卤酶固定化载体中未反应的环氧基反应,降低载体上剩余环氧基的活性;本发明专利技术整体上具有酶固定化后活性高的优点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种卤醇脱卤酶固定化方法,属于酶固定化领域。


技术介绍

1、卤醇脱卤酶(简称hhdh)也叫卤醇卤化氢裂解酶,是一类通过分子内亲核取代机制催化邻卤醇转化为环氧化物的脱卤酶,是自然界微生物降解有机卤化合物的关键酶之一。卤醇脱卤酶不但可以选择性催化邻卤醇碳-卤键的断裂进行脱卤反应合成手性环氧化物,而且可以高选择性地催化接受除卤离子外的一系列非自然亲核试剂,合成一系列光学纯的手性β-取代醇。

2、常见的卤醇脱卤酶固定化过程中,采用环氧树脂作为载体能够提供较好的酶固定化后的活性,对于卤醇脱卤酶的应用具有较大的意义,但是单纯的环氧树脂载体对于酶活的提升较为平均,无法达到更高的酶活强度,应用于药物中间体生产过程中时对于生产效率的提升较小。


技术实现思路

1、本专利技术针对以上现有技术中存在的缺陷,提供一种卤醇脱卤酶固定化方法,解决的问题是传统的卤醇脱卤酶固定化载体对酶活的提升效果差的制备方法。

2、本专利技术的目的是通过以下技术方案得以实现的,卤醇脱卤酶的固定化载体为环氧树脂,所述卤醇本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种卤醇脱卤酶固定化方法,其特征在于,卤醇脱卤酶的固定化载体为环氧树脂,所述卤醇脱卤酶固定化方法包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的一种卤醇脱卤酶固定化方法,其特征在于:所述环氧树脂载体为改性环氧树脂,改性方法为将带有羧基的单体与环氧树脂母粒进行共聚反应得到环氧树脂载体。

3.根据权利要求2所述的一种卤醇脱卤酶固定化方法,其特征在于:所述带有羧基的单体选用丙烯酸与甲基丙烯酸等其中一种。

4.根据权利要求3所述的一种卤醇脱卤酶固定化方法,其特征在于:所述共聚反应中,反应溶剂选用丙酮、DMF、THF其中一种。

5.根据权利要求4所述的一...

【技术特征摘要】

1.一种卤醇脱卤酶固定化方法,其特征在于,卤醇脱卤酶的固定化载体为环氧树脂,所述卤醇脱卤酶固定化方法包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的一种卤醇脱卤酶固定化方法,其特征在于:所述环氧树脂载体为改性环氧树脂,改性方法为将带有羧基的单体与环氧树脂母粒进行共聚反应得到环氧树脂载体。

3.根据权利要求2所述的一种卤醇脱卤酶固定化方法,其特征在于:所述带有羧基的单体选用丙烯酸与甲基丙烯酸等其中一种。

4.根据权利要求3所述的一种卤醇脱卤酶固定化方法,其特征在于:所述共聚反应中,反应溶剂选用丙酮、dmf、thf其中一种。

5.根据权利要求4所述的一种卤醇脱卤酶固定化方法,其特征在于:所述共聚...

【专利技术属性】
技术研发人员:石利平何义尹强张维冰曹蒙蒋南山
申请(专利权)人:江苏阿尔法药业股份有限公司
类型:发明
国别省市:

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