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一种D-甘露糖2-差向异构酶在D-甘露糖制备中的应用制造技术

技术编号:43709569 阅读:31 留言:0更新日期:2024-12-18 21:21
本发明专利技术公开了一种D‑甘露糖2‑差向异构酶在D‑甘露糖制备中的应用,属于基因工程和酶工程领域。本发明专利技术将来源于Bacteroidetes bacterium的D‑甘露糖2‑差向异构酶BbME的基因在E.coli BL21(DE3)中表达,并将所述D‑甘露糖2‑差向异构酶应用于以D‑葡萄糖为底物的反应体系中,在pH 8.0,50℃下进行酶反应,反应48h的D‑甘露糖的产量达到141.05g/L。本发明专利技术还将所述重组菌进行高密度发酵,并将菌体细胞破壁后的粗酶液加入至1.5L大反应体系中,反应48h后D‑甘露糖的产量可达到125.35g/L,可实现D‑甘露糖的工业化生产。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种d-甘露糖2-差向异构酶在d-甘露糖制备中的应用,属于基因工程和酶工程领域。


技术介绍

1、d-甘露糖是d-葡萄糖在c-2位的立体异构体,也是自然界中一些多糖和糖蛋白的成分。迄今为止,d-甘露糖因其对人类健康的诸多有益健康作用而备受关注,包括刺激胰岛素分泌、治疗或预防尿路感染、阻断定植和促进肠道益生菌生长。它在免疫刺激剂、抗肿瘤剂、维生素和d-甘露醇的合成中起着重要作用。此外,d-甘露糖已被用作添加剂,在家禽业中有效抑制沙门氏菌的肠道增殖。d-甘露糖在食品、制药和饲料工业中表现出优异的生理特性。

2、目前d-甘露糖的制备主要有植物提取、化学合成以及生物酶法3种途径,其中生物酶法因其反应条件温和、环境友好和成本低等优势,已成为制备d-甘露糖的研究趋势。目前的研究大部分集中在以d-果糖为底物制备d-甘露糖,通过d-甘露糖异构酶(mannoseisomerase miase,ec 5.3.1.7)生产d-甘露糖,但是该反应转化率低且以d-果糖为底物生产d-甘露糖成本较高。而与d-果糖底物相比,d-葡萄糖在来源与价格方面都占据独特的优本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.编码D-甘露糖2-差向异构酶的基因,其特征在于,核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.携带权利要求1所述基因的重组表达载体。

3.携带权利要求1所述基因,或含有权利要求2所述重组表达载体的微生物细胞。

4.一种重组大肠杆菌,其特征在于,表达氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的D-甘露糖2-差向异构酶。

5.根据权利要求4所述的重组大肠杆菌,其特征在于,以pET-24a(+)为表达载体,在E.coli BL21(DE3)中表达SEQ ID NO.1所示的D-甘露糖2-差向异构酶基因。

6.一种制备D-甘露糖2-差向...

【技术特征摘要】

1.编码d-甘露糖2-差向异构酶的基因,其特征在于,核苷酸序列如seq id no.1所示。

2.携带权利要求1所述基因的重组表达载体。

3.携带权利要求1所述基因,或含有权利要求2所述重组表达载体的微生物细胞。

4.一种重组大肠杆菌,其特征在于,表达氨基酸序列如seq id no.2所示的d-甘露糖2-差向异构酶。

5.根据权利要求4所述的重组大肠杆菌,其特征在于,以pet-24a(+)为表达载体,在e.coli bl21(de3)中表达seq id no.1所示的d-甘露糖2-差向异构酶基因。

6.一种制备d-甘露糖2-差向异构酶的方法,其特征在于,将权利要求4或5所述的重组大肠杆菌在培养基中培养,收集培养液中的d-甘露糖2-差...

【专利技术属性】
技术研发人员:夏伟吴敬王胜
申请(专利权)人:江南大学
类型:发明
国别省市:

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