基于RAA/PCR-CRISPR-Cas13a检测戊型肝炎病毒RNA的试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了基于RAA/PCR‑CRISPR‑Cas13a检测戊型肝炎病毒RNA的试剂盒。该试剂盒包括用于扩增或检测HEV保守基因片段(SEQ ID No.1)的引物对和crRN A，所述crRNA的序列由锚定序列和向导序列(SEQ ID No.13的第39‑66位)组成。本发明专利技术基于CRISPR‑Cas13a核酸检测技术，通过设计、构建、筛选，最终提供一套用于戊型肝炎病毒RNA检测的RAA扩增引物对或PCR引物对、crRNA及其检测方法，所述crRNA可通过激活Cas13a实现对戊型肝炎病毒RNA的高灵敏、高特异检测，灵敏度达到1copy/μL。本发明专利技术方法简便快速，具有重要的应用价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物，涉及基于raa/pcr-crispr-cas13a检测戊型肝炎病毒rna的试剂盒，具体涉及一种用于检测戊型肝炎病毒(hev)rna的crispr-ca s13a系统检测试剂盒、组合物及其应用。

技术介绍

1、戊型肝炎病毒(hepatitis e virus，hev)属于戊型肝炎病毒科，是一种单股正链rna病毒，直径为30～40nm。hev可分为8个基因型，人类主要感染1～4型；其中，1型和2型只感染人类；3型和4型可感染人和多种动物。因此，hev被认为是人兽共患病毒。研究表明，全球每年约有2000万例新发hev感染，其中330万例有肝炎症状。血清流行病学研究表明，全球超过1/3人感染过hev。近年来戊型肝炎报告发病率呈上升趋势，2004年为1.27/10万，2019年升至2.02/10万。因此，实现he v快速精准检测具有重要的临床意义。目前对于hev的检测方法主要是血清学抗体的检测，例如酶联免疫吸附法。这些方法对hev临床样本的检测灵敏度和特异性不高，并且一致性较差，且单一的抗体结果不能完全诊断hev感染。因此，亟待一种更精准的hev本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.用于检测戊型肝炎病毒RNA的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括引物对和crRNA，所述crRNA的序列由锚定序列和向导序列组成，所述向导序列为SEQ ID No.13的第39-66位。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述crRNA的核苷酸序列为SE Q IDNo.13。

3.根据权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于，所述引物对为下述任一种：

4.根据权利要求1-3中任一所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括HEV保守基因片段或携带HEV保守基因片段的重组载体，所述HEV保守基因片段的核苷酸序列如SEQ IDNo.1所示。

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【技术特征摘要】

1.用于检测戊型肝炎病毒rna的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括引物对和crrna，所述crrna的序列由锚定序列和向导序列组成，所述向导序列为seq id no.13的第39-66位。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述crrna的核苷酸序列为se q idno.13。

3.根据权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于，所述引物对为下述任一种：

4.根据权利要求1-3中任一所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括hev保守基因片段或携带hev保守基因片段的重组载体，所述hev保守基因片段的核苷酸序列如seq idno.1所示。

5.根据权利要求1-4中任一所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括cas13a蛋白和/或报告rna。

6.权利要求1或2中所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：任锋，张向颖，范子豪，田原，徐玲，曹亚玲，高耀，
申请(专利权)人：首都医科大学附属北京佑安医院，
类型：发明
国别省市：