一种大鼠少突胶质细胞前体细胞的分离与培养方法技术

技术编号:43645563 阅读:23 留言:0更新日期:2024-12-13 12:42
本发明专利技术为一种大鼠少突胶质细胞前体细胞的分离与培养方法,属于细胞培养技术领域。针对目前存在的少突胶质细胞的体外培养过程复杂且技术难度大等问题,本发明专利技术的方法包括:取大鼠大脑皮层制备单细胞悬液,对单细胞悬液进行初步培养,形成混合胶质细胞,从混合胶质细胞中分离少突胶质细胞并纯化,对纯化后的少突胶质细胞进行消化传代培养,得到分化成熟的少突胶质细胞。本发明专利技术综合使用多种培养基,通过优化操作步骤、培养基成分以及培养条件等关键参数,探索出更加适合大鼠少突胶质细胞前体细胞的培养方法,实现少突胶质细胞的高效分离和纯化,操作简单,可重复性强,为体外建立大鼠少突胶质细胞前体细胞模型及机制的探究提供可靠的支持。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及细胞培养,尤其涉及一种大鼠少突胶质细胞前体细胞的分离与培养方法


技术介绍

1、少突胶质细胞(oligodendrocyte,ol)作为中枢神经系统的重要组成部分,主要负责神经元的髓鞘形成,对神经元信息的快速传导及轴突的功能维持起着至关重要的作用。髓鞘是神经元轴突周围的绝缘层,能够显著提高神经信号的传导速度,是维持神经系统正常功能的关键结构。深入研究少突胶质细胞的生物学特性、功能机制以及其在疾病中的作用,对于理解神经系统的发育、维持与修复具有重要意义。体外培养少突胶质细胞是研究其生物学特性及功能机制的重要手段。

2、然而,少突胶质细胞的体外培养过程复杂且技术难度大,主要原因在于在体外培养过程中易受到多种因素的影响,如培养基成分、生长因子、培养条件等,导致细胞生长缓慢、纯度低、分化难度大等问题;且不同实验室之间的培养条件和方法差异较大,导致实验结果的可重复性和可比性较差,限制了少突胶质细胞研究的深入发展。

3、因此,开发一种简便、高效、稳定的大鼠少突胶质细胞分离培养方法,对于推动少突胶质细胞的深入研究具有重要意义。...

【技术保护点】

1.一种大鼠少突胶质细胞前体细胞的分离与培养方法,其特征在于,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的一种大鼠少突胶质细胞前体细胞的分离与培养方法,其特征在于,步骤S1中,单细胞悬液的制备过程包括:

3.根据权利要求2所述的一种大鼠少突胶质细胞前体细胞的分离与培养方法,其特征在于,步骤S13中,完全培养基中含有DMEM培养基、10%FBS、100U/mL Penicillin-Streptomycin。

4.根据权利要求3所述的一种大鼠少突胶质细胞前体细胞的分离与培养方法,其特征在于,步骤S2中,形成混合胶质细胞的步骤包括:

5.根据权利要...

【技术特征摘要】

1.一种大鼠少突胶质细胞前体细胞的分离与培养方法,其特征在于,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的一种大鼠少突胶质细胞前体细胞的分离与培养方法,其特征在于,步骤s1中,单细胞悬液的制备过程包括:

3.根据权利要求2所述的一种大鼠少突胶质细胞前体细胞的分离与培养方法,其特征在于,步骤s13中,完全培养基中含有dmem培养基、10%fbs、100u/ml penicillin-streptomycin。

4.根据权利要求3所述的一种大鼠少突胶质细胞前体细胞的分离与培养方法,其特征在于,步骤s2中,形成混合胶质细胞的步骤包括:

5.根据权利要求4所述的一种大鼠少突胶质细胞前体细胞的分离与培养方法,其特征在于,步骤s3中,从混合胶质细胞中分离少突胶质细胞并纯化的步骤包括:

6.根据权利要求5所述的一种大鼠少突胶质细胞前体细胞的分离与培养方法,其特征在于,步骤s31中,恒温摇床以200r/min、37℃振荡2h。

7.根据权利要求5所述的一种大鼠少突胶质细胞前体细胞的分离与培养方法,其特征在于,步骤s33中,以200r/min、37℃再次振荡18~20h,过滤采用40μm筛网。

8.根据权利要求5所述的一种大鼠少突胶质细胞前体细胞的分离与培养方法,其特征在于,步骤s4中,对纯化后的少突胶质细胞进行消化...

【专利技术属性】
技术研发人员:程意琴张蓬勃杨柳霏魏海东刘慧青贾鹏宇陈新林
申请(专利权)人:西安交通大学医学院第二附属医院
类型:发明
国别省市:

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