一种通用型临床用DNT细胞及其制备方法与应用技术

本发明专利技术提供一种制备通用型DNT细胞的技术。在本发明专利技术中，制备的原料来源于为避免输血不良反应而进行滤白处理后的“滤白残留物”，由此提取的DNT细胞，可以是一位或多位健康供者的混合培养物。使用本发明专利技术方法所获得的通用型DNT细胞，具有产量高、纯度高、体外杀瘤活性高、适合大规模生产等特征。其起始原料可以是新鲜细胞，也可以是冻存后复融细胞，根本解决细胞药物大规模制备的原料来源瓶颈，重新挖掘血液制品生产过程中被滤除的白细胞价值，具有极大的医学价值和商业化应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物，具体涉及一种通用型临床用dnt细胞及其制备方法与应用。

技术介绍

1、免疫细胞治疗是一种新兴的、具有显著疗效的肿瘤治疗模式，是免疫抗癌的新型治疗方法。它是运用生物技术和生物制剂对从病人或健康捐赠者体内采集免疫细胞进行体外培养和扩增后回输到病人体内，来激发、增强病人自身免疫功能，从而达到治疗肿瘤目的。

2、免疫细胞治疗是许多危及人类严重疾病的重要治疗手段，包括癌症、自体免疫疾病、器官移植排斥反应、严重过敏性疾病，甚至严重病毒感染都有使用免疫细胞治疗成功的案例。

3、目前免疫细胞治疗大多是采集自体免疫细胞在体外培养扩增后进行回输。如果需要多次回输治疗，则要多次采集人外周血中的免疫细胞进行培养扩增，才能有足够细胞进行回输。由于病情严重，多数需要治疗的患者常无法提供足够数量的免疫细胞进行培养，且患者由于患病体质和各种用药治疗，导致其免疫细胞在体外培养扩增非常困难，甚至无法培养。

4、近几年已有从健康捐赠者采集免疫细胞后在体外培养扩增，然后进行回输的治疗方案。一般健康捐赠者一次可以采集200-400毫升全血，因本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种制备通用型临床用DNT细胞的方法，包括步骤：

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在所述步骤(ii)中，所述反冲液为无菌生理盐水；

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(iii)包括：将一个或多个供者的样品II分别去除其中的CD4+和CD8+T细胞，从而获得样品IIIa，以冻存液重悬，经程序降温后置于液氮保存，此为样品IIIb；将来源于一个或多个供者的冻存样品IIIb，于37℃复融，以培养基洗涤一次，再以培养基重悬并混合，此为样品III，即冻存再复融的供者白细胞来源的DNT。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在所述步骤(...

【技术特征摘要】

1.一种制备通用型临床用dnt细胞的方法，包括步骤：

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在所述步骤(ii)中，所述反冲液为无菌生理盐水；

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(iii)包括：将一个或多个供者的样品ii分别去除其中的cd4+和cd8+t细胞，从而获得样品iiia，以冻存液重悬，经程序降温后置于液氮保存，此为样品iiib；将来源于一个或多个供者的冻存样品iiib，于37℃复融，以培养基洗涤一次，再以培养基重悬并混合，此为样品iii，即冻存再复融的供者白细胞来源的dnt。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在所述步骤(iv)至(vi)的培养基中，还包括选自下组的细胞因子：il-7、il-12、il-15，或其组合。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述t细胞促分裂原选自下组：结合cd3的抗体、凝集素、能够刺激dnt细胞扩增的化合物，或其组合。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(iv)中，分为亚步骤(iva)、(ivb)和(ivc)，所述亚...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨黎明，相志强，吴越，孙清华，黄凯玉，
申请(专利权)人：瑞创生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：