一种用于细菌特异性检测的噬菌体毛细管的制备、保藏及使用方法技术

本发明专利技术公开了一种用于细菌特异性检测的噬菌体毛细管的制备、保藏及使用方法；其制备方法包括如下步骤，毛细管前处理：在毛细管内壁上修饰正电荷层；噬菌体修饰毛细管：噬菌体牢固结合在毛细管内壁的正电荷层上。其优点在于毛细管内壁均匀修饰的正电荷层能使噬菌体均匀牢固结合在内壁上。PBS溶液冲洗后再用氮气吹5min，可形成PBS水膜，干净容器中0‑4℃保存，三个月内可有效使用。所述噬菌体毛细管以毛细作用吸取荧光染色后的细菌样品溶液，静置后再用PBS溶液冲洗表面未结合杂菌及其它残留，使用便携式荧光激发检测装置或荧光显微镜进行荧光检测，检测30min内完成。本发明专利技术可通过变更噬菌体来捕获检测不同菌，具有通用性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于细菌检测，尤其是涉及一种用于细菌特异性检测的噬菌体毛细管的制备、保藏及使用方法。

技术介绍

1、食品安全关系人类生命安全与健康，近年来，食源性致病菌污染始终占据食品安全事件首位。食源性致病菌广泛存在于食物链中，在加工、贮藏、流通等各个环节都能通过受污染的各类食物或者饮用水被摄入人体内，从而导致食物中毒、肠道传染病的发生以及畜禽传染病的流行。常见的食源性致病菌主要有单增李斯特菌、沙门氏菌、副溶血性弧菌、致病性大肠杆菌和金黄色葡萄球菌等。而检测技术是制约食源性致病菌安全监管的重要瓶颈，因此，对食源性致病菌快速检测的技术具有迫切的需求。

2、噬菌体在细菌的捕获与识别上具有天然的优势，可以精确到株特异性水准。与抗体和适配体等其他生物受体相比，噬菌体在细菌检测方面的高特异性、高亲和力、高稳定性、成本低等优势，在细菌检测方向有广阔的研究价值和应用前景。现存的细菌鉴定技术面临着成本高、前处理步骤繁琐、开放性操作易受环境和操作人员影响、假阳性等问题无法满足现场快速检测的需求，因此急需一种低成本、低消耗、高效率、速度快、灵敏度高的通用型检测技术，其本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于细菌特异性检测的噬菌体毛细管的制备方法，其特征在于，包括如下步骤，

2.根据权利要求1所述的一种用于细菌特异性检测的噬菌体毛细管的制备方法，其特征在于，所述噬菌体修饰毛细管，具体步骤如下：

3.根据权利要求1或2所述的一种用于细菌特异性检测的噬菌体毛细管的制备方法，其特征在于，所述毛细管前处理的具体步骤如下：

4.一种如权利要求2或3所述制备方法所制得的噬菌体毛细管的保藏方法，其特征在于，将经步骤A4处理的毛细管用氮气吹1-3min，所述氮气流速为：3-5m/s，而后置于0-4℃冰箱保存。

5.一种检测细菌的使用方法，其特征在于...

【技术特征摘要】

1.一种用于细菌特异性检测的噬菌体毛细管的制备方法，其特征在于，包括如下步骤，

2.根据权利要求1所述的一种用于细菌特异性检测的噬菌体毛细管的制备方法，其特征在于，所述噬菌体修饰毛细管，具体步骤如下：

3.根据权利要求1或2所述的一种用于细菌特异性检测的噬菌体毛细管的制备方法，其特征在于，所述毛细管前处理的具体步骤如下：

4.一种如权利要求2或3所述制备方法所制得的噬菌体毛细管的保藏方法，其特征在于，将经步骤a4处理的毛细管用氮气吹1...

【专利技术属性】
技术研发人员：于佩斓，林建原，贾志舰，阮玉芳，吴萃艳，王倩，蒋力豪，
申请(专利权)人：浙江万里学院，
类型：发明
国别省市：