一种囊胚腔液游离DNA单管双基因无创胚胎植入前遗传学检测的RPA-CRISPR/Cas12a检测体系制造技术

本发明专利技术公开了一种囊胚腔液游离DNA单管双基因无创胚胎植入前遗传学检测的RPA‑CRISPR/Cas12a检测体系，属于遗传学检测技术领域。所述双基因为TBC1D3基因和TSPY1基因；所述RPA‑CRISPR/Cas12a检测体系包括RPA反应体系和CRISPR/Cas12a反应体系。本发明专利技术选择TSPY1联合TBC1D3基因作为靶基因进行研究，组建双重RPA‑CRISPR/cas12a检测系统，可快速完成性连锁遗传疾病患者在进行植入前的胚胎初筛，为性连锁遗传家族胚胎选择提供了新的检测平台，为进一步的遗传优生优育奠定基础，缩减时间、人力和物力成本，减少创伤。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及遗传学检测，特别是涉及一种囊胚腔液游离dna单管双基因无创胚胎植入前遗传学检测的rpa-crispr/cas12a检测体系。

技术介绍

1、胚胎植入前遗传学检测(pgt)是一种在辅助生殖过程中鉴定胚胎遗传物质是否异常的检测技术。目前主要包括极体活检、卵裂球活检和囊胚滋养层细胞活检。pgt广泛应用于胚胎植入前非整倍体(pgt-a)、单基因疾病(pgt-m)、染色体结构重排(pgt-sr)的筛选，选择性地规避“问题”胚胎，改善临床妊娠结局。pgt起源于1990年handyside等人首次使用pcr技术检测y染色体上的重复序列筛选女性健康胚胎，改善了性连锁遗传病高风险夫妇的妊娠结局。三十多年来，全基因组扩增技术的进步显著提高pgt的准确性和可靠性，越来越多的高危夫妇选择pgt。

2、目前，pgt常用的是滋养外胚层(te)侵入性活检，滋养层细胞活检依赖于昂贵的设备和专业经验丰富的技术人员，操作复杂且属于有创性操作，且可能存在影响胚胎活力，滋养层细胞与内细胞团诊断不一致和嵌合体胚胎等问题。寻求一种微创或无创性取材且检测周期短，操作简便的检测本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种囊胚腔液游离DNA单管双基因无创胚胎植入前遗传学检测的RPA-CRISPR/Cas12a检测体系，其特征在于，所述双基因为TBC1D3基因和TSPY1基因；

2.一种非疾病诊断或治疗目的的TBC1D3和TSPY1双基因检测方法，其特征在于，以囊胚腔液作为检测样本，以检测样本中的DNA为模板，使用权利要求1所述RPA反应体系进行扩增反应；

3.根据权利要求2所述的TBC1D3和TSPY1双基因检测方法，其特征在于，所述RPA反应体系包括：29.4μLAbuffer液、1.5μL 10μM正向/反向引物、2.5μLMgOAc和2μLDNA模板，用ddH2O调平...

【技术特征摘要】

1.一种囊胚腔液游离dna单管双基因无创胚胎植入前遗传学检测的rpa-crispr/cas12a检测体系，其特征在于，所述双基因为tbc1d3基因和tspy1基因；

2.一种非疾病诊断或治疗目的的tbc1d3和tspy1双基因检测方法，其特征在于，以囊胚腔液作为检测样本，以检测样本中的dna为模板，使用权利要求1所述rpa反应体系进行扩增反应；

3.根据权利要求2所述的tbc1d3和tspy1双基因检测方法，其特征在于，所述rpa反应体系包括：29.4μlabuffer液、1.5μl 10μm正向/反向引物、2.5μlmgoac和2μldna模板，用ddh2o调平至50μlrpa反应体系；

4.根据权利要求2所述的tb...

【专利技术属性】
技术研发人员：毛跟红，刘钰琴，雷文卓，张凌寒，刘彦星，陆平，贺岩，张乐，郭沛沛，张瑜，窦倩，朱颖，
申请(专利权)人：郑州大学，
类型：发明
国别省市：