一种耐受低pH值的工程希瓦氏重组菌及其构建方法技术

本发明专利技术公开了一种耐受低pH值的工程希瓦氏重组菌及其构建方法，涉及基因工程技术领域，该工程希瓦氏重组菌是以希瓦氏菌（Shewanella oneidensis）MR‑1为出发菌株，向其中引入编码质子转运蛋白的外源基因所得。构建方法为：S1：获得线性化载体pYYDT；S2：将外源基因片段与线性化载体pYYDT利用T4连接酶连接，转入大肠杆菌DH5α的感受态，挑选出阳性克隆进行菌落PCR和测序，获得重组质粒；S3：将重组质粒导入到大肠杆菌DAP营养缺陷型菌株中，进行筛选；S4：利用接合转移技术将大肠杆菌携带的重组质粒转移到希瓦氏菌（Shewanella oneidensis）MR‑1中，即得希瓦氏重组菌。本发明专利技术改造后的菌株不仅适用于微生物燃料电池，还可以用于处理高酸性工业废水，拓展了希瓦氏菌的应用领域。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及基因工程，具体为一种耐受低ph值的工程希瓦氏重组菌及其构建方法。

技术介绍

1、基因工程（genetic engineering）是一种通过定向修改生物遗传物质以赋予其新功能或优化其特性的技术。该技术依赖于分子生物学工具，如通过基因编辑、基因插入和基因敲除技术，在体外构建重组dna分子，转入宿主细胞后外源基因进行复制、转录和翻译，以实现精确调控目标基因的表达。在合成生物学领域，该技术被广泛应用于提高菌株的代谢产物产量、增强环境适应性等方面。

2、希瓦氏菌（ shewanella oneidensis）是一种兼性厌氧菌，遗传背景清晰，且易于操作。模式产电微生物-奥达奈希瓦氏菌（ shewanella oneidensismr-1简称mr-1，atcc 编号：700550）是希瓦氏菌属中在基因组序列注释和遗传特性方面研究最广泛的菌株，因其独特的跨膜电子传递能力而在生物电化学系统（bes）中具有重要的应用价值。该菌能够利用多种终端电子受体进行厌氧呼吸，尤其在微生物燃料电池（mfc）本文档来自技高网...

【技术保护点】

1. 一种耐受低pH值的工程希瓦氏重组菌，其特征在于，是以希瓦氏菌（Shewanella oneidensis）MR-1为出发菌株，向其中引入编码质子转运蛋白的外源基因所得。

2. 根据权利要求1所述的一种耐受低pH值的工程希瓦氏重组菌，其特征在于，所述外源基因为序列如SEQ ID NO.1所示的atpA基因或序列如SEQ ID NO.4所示的MFS基因；

3.权利要求2所述的耐受低pH值的工程希瓦氏重组菌的构建方法，其特征在于，包括：

4. 根据权利要求3所述的耐受低pH值的工程希瓦氏重组菌的构建方法，其特征在于，步骤S3中用LB+DAP+Kan平板...

【技术特征摘要】

1. 一种耐受低ph值的工程希瓦氏重组菌，其特征在于，是以希瓦氏菌（shewanella oneidensis）mr-1为出发菌株，向其中引入编码质子转运蛋白的外源基因所得。

2. 根据权利要求1所述的一种耐受低ph值的工程希瓦氏重组菌，其特征在于，所述外源基因为序列如seq id no.1所示的atpa基因或序列如seq id no.4所示的mfs基因；

3.权利要求2所述的耐受低ph值的工程希瓦氏重组菌的构建方法，其特征在于，包括：

4. 根据权利要求3所述的耐受低ph值的工程希瓦氏重组菌的构建方法，其特征在于，步骤s3中用lb+dap+kan平板培养基进行筛选；所述lb+dap+kan平板培...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘占英，
申请(专利权)人：内蒙古工业大学，
类型：发明
国别省市：