【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及基因工程领域，特别是涉及一种用于枣组培苗上的瞬时转基因的方法。
技术介绍
1、gus基因是β-葡萄糖苷酸酶基因(β-glucuronidase)，是目前常用的一种报告基因。该基因的产物为β-葡萄糖苷酸酶，β-葡萄糖苷酸酶是一个水解酶，以β-葡萄糖苷酸酯类物质为底物，其反应产物可用多种方法检测出来，其中最为常用的检测方法是组织化学法，该方法以5-溴-4-氯-3-吲哚-β-葡萄糖苷酸(x-gluc)作为反应底物，将实验材料用含有底物的缓冲液浸泡。在适宜的条件下，当实验材料的组织细胞转化了gus基因且发生表达时，用酒精洗脱之后，该酶就可将x-gluc水解生成蓝色物质，该物质可以反应具有gus活性的部位或位点，用肉眼或显微镜可以观测到。同时在一定程度下根据染色深浅可以观测gus表达水平。该检测方法简单、快速、灵敏、稳定且背景活性低，在研究外源基因瞬时表达的转化实验中广泛应用。
2、根癌农杆菌(agrobacterium tumefaciens)是革兰氏阴性土壤杆菌.自然情况下它可通过伤口侵入植物，将其t-dna序列转入...
【技术保护点】
1.一种用于枣组培苗上的瞬时转基因的方法，其特征在于，包括利用携带有报告基因和目的基因的根癌农杆菌悬浮液侵染外植体，之后将侵染后的外植体转移至继代培养基中进行培养的步骤；
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述侵染的方式为负压抽真空。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述负压抽真空包括将所述外植体置于含有所述根癌农杆菌悬浮液的50mL注射器中，拉动活塞的步骤。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述负压抽真空的时间为10-20min；所述拉动活塞的次数为5或10次。
5.根据权利要求1或3所述的...
【技术特征摘要】
1.一种用于枣组培苗上的瞬时转基因的方法，其特征在于，包括利用携带有报告基因和目的基因的根癌农杆菌悬浮液侵染外植体，之后将侵染后的外植体转移至继代培养基中进行培养的步骤；
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述侵染的方式为负压抽真空。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述负压抽真空包括将所述外植体置于含有所述根癌农杆菌悬浮液的50ml注射器中，拉动活塞的步骤。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述负压抽真空的时间为10-20min；所述拉动活塞的次数为5或10次。
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