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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及冠状病毒检测,特别涉及冠状病毒的检测方法及试剂盒。
技术介绍
1、冠状病毒(coronavi ruses,covs)属于冠状病毒科,是自然界广泛存在、能够感染人和动物的一大类病毒家族,在电镜下观察其病毒粒子表面有类似日冕状的纤突而被命名。冠状病毒的基因组较大,其单股正链基因序列长达26~32kb,是已知自然界序列最长的rna病毒。由严重急性呼吸综合征冠状病毒2型(severeacuterespiratorysyndromecoronavi rus2,sars-cov-2)引起的持续流行性新型冠状病毒感染(coronavi rusd i sease2019,covid-19)疫情最初爆发于2019年12月下旬,如今对全球公共卫生和经济构成了前所未有的威胁。
2、目前,对新型冠状病毒的病毒性疾病的病原诊断主要由基因扩增法(如恒温扩增法、qpcr法),基因测序法,抗体检测法(免疫发光法等)等,其中,以qpcr法最为常用,灵敏度也高。但是,使用qpcr法对2019-ncov等新型冠状病毒的检测需要严格的pcr扩增实验室,且qpcr法存在一定的假阴性的缺陷。此外,基因测序法虽然检测结果较为可靠,但不能用于快速筛查或检测。抗体检测法需要在病人产生足够免疫反应后才能检测到,并存在检测结果特异性不高的缺陷。
3、因此,有必要提供冠状病毒的检测方法及试剂盒解决上述技术问题。
技术实现思路
1、为解决上述技术问题,本专利技术提供冠状病毒的检测方法及试剂盒。
...【技术保护点】
1.冠状病毒的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的冠状病毒的检测方法,其特征在于,所述S1中样品采集中的样品即待测样本,其来源包括,人鼻咽拭子、唾液、痰液样本、肺泡灌洗液样本、血液样本、下呼吸道分泌物、粪便样本或环境样本。
3.根据权利要求1所述的冠状病毒的检测方法,其特征在于,所述S3中RNA聚合酶选用T7RNA聚合酶,所述S4中核酸酶选用核酸酶Cas13a,所述RNA荧光探针的5’端连接荧光报告基团,3’端连接荧光淬灭基团。
4.根据权利要求3所述的冠状病毒的检测方法,其特征在于,所述荧光报告基团选自FAM、HEX、ROX或CY5中的任意一种,所述荧光淬灭基团选自BHQ1或BHQ2中的任意一种。
5.根据权利要求1所述的冠状病毒的检测方法,其特征在于,所述S5中荧光读板仪使用96孔板或者384孔板。
6.冠状病毒的试剂盒,其特征在于,包括,核酸酶Cas13a,用于特异性检测基因序列的Cas13a指导RNA、RNA荧光探针、反向转录酶、DNA聚合酶,T7RNA聚合酶与缓冲液。
7.
8.根据权利要求6所述的冠状病毒的试剂盒,其特征在于,所述反向转录酶包含由能被T7RNA聚合酶识别并转录的序列以及靶向病毒RNA互补序列组成的反向引物。
...【技术特征摘要】
1.冠状病毒的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的冠状病毒的检测方法,其特征在于,所述s1中样品采集中的样品即待测样本,其来源包括,人鼻咽拭子、唾液、痰液样本、肺泡灌洗液样本、血液样本、下呼吸道分泌物、粪便样本或环境样本。
3.根据权利要求1所述的冠状病毒的检测方法,其特征在于,所述s3中rna聚合酶选用t7rna聚合酶,所述s4中核酸酶选用核酸酶cas13a,所述rna荧光探针的5’端连接荧光报告基团,3’端连接荧光淬灭基团。
4.根据权利要求3所述的冠状病毒的检测方法,其特征在于,所述荧光报告基团选自fam、hex、rox或cy5中的任意一种,所述荧光淬灭基团选自bh...
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