冠状病毒的检测方法及试剂盒技术

本发明专利技术涉及冠状病毒检测技术领域，特别涉及冠状病毒的检测方法及试剂盒，包括以下步骤，对样品进行采集，并将采集到的样品进行统一存储，提取待检测样本的RNA，加入反向转录酶进行体外反转录合成cDNA，加入DNA聚合酶及RNA聚合酶进行扩增及再转录，加入核酸酶，核酸酶指导RNA，RNA荧光探针及缓冲液进行反应，获得荧光反应产物，使用荧光读板仪检测反应产物。冠状病毒RNA在体外进行反向转录，扩增及再转录，以实现RNA到RNA的靶向分子扩增，再通过Cas13a序列介导的特异性核酸酶Cas13a激活而发生RNA荧光探针的剪切，从而检测出荧光。具有操作简单、灵敏性高、特异性强、不需要PCR扩增条件、稳定性好、经济实用等优点，能够满足临床快速诊断与筛查的需求。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及冠状病毒检测，特别涉及冠状病毒的检测方法及试剂盒。

技术介绍

1、冠状病毒(coronavi ruses，covs)属于冠状病毒科，是自然界广泛存在、能够感染人和动物的一大类病毒家族，在电镜下观察其病毒粒子表面有类似日冕状的纤突而被命名。冠状病毒的基因组较大，其单股正链基因序列长达26～32kb，是已知自然界序列最长的rna病毒。由严重急性呼吸综合征冠状病毒2型(severeacuterespiratorysyndromecoronavi rus2，sars-cov-2)引起的持续流行性新型冠状病毒感染(coronavi rusd i sease2019，covid-19)疫情最初爆发于2019年12月下旬，如今对全球公共卫生和经济构成了前所未有的威胁。

2、目前，对新型冠状病毒的病毒性疾病的病原诊断主要由基因扩增法(如恒温扩增法、qpcr法)，基因测序法，抗体检测法(免疫发光法等)等，其中，以qpcr法最为常用，灵敏度也高。但是，使用qpcr法对2019-ncov等新型冠状病毒的检测需要严格的pcr扩增实验室，且qpcr法存在一本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.冠状病毒的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的冠状病毒的检测方法，其特征在于，所述S1中样品采集中的样品即待测样本，其来源包括，人鼻咽拭子、唾液、痰液样本、肺泡灌洗液样本、血液样本、下呼吸道分泌物、粪便样本或环境样本。

3.根据权利要求1所述的冠状病毒的检测方法，其特征在于，所述S3中RNA聚合酶选用T7RNA聚合酶，所述S4中核酸酶选用核酸酶Cas13a，所述RNA荧光探针的5’端连接荧光报告基团，3’端连接荧光淬灭基团。

4.根据权利要求3所述的冠状病毒的检测方法，其特征在于，所述荧光报告基团选自FAM、HEX、ROX...

【技术特征摘要】

1.冠状病毒的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的冠状病毒的检测方法，其特征在于，所述s1中样品采集中的样品即待测样本，其来源包括，人鼻咽拭子、唾液、痰液样本、肺泡灌洗液样本、血液样本、下呼吸道分泌物、粪便样本或环境样本。

3.根据权利要求1所述的冠状病毒的检测方法，其特征在于，所述s3中rna聚合酶选用t7rna聚合酶，所述s4中核酸酶选用核酸酶cas13a，所述rna荧光探针的5’端连接荧光报告基团，3’端连接荧光淬灭基团。

4.根据权利要求3所述的冠状病毒的检测方法，其特征在于，所述荧光报告基团选自fam、hex、rox或cy5中的任意一种，所述荧光淬灭基团选自bh...

【专利技术属性】
技术研发人员：李晓宁，
申请(专利权)人：重庆医科大学，
类型：发明
国别省市：