一种蛹虫草高产菌株及构建方法技术

本发明专利技术公开了一种蛹虫草高产菌株及构建方法，涉及菌种改造技术领域。所述构建方法为通过CRISPR/Cas9无痕敲除蛹虫草Ⅰ型疏水蛋白编码基因Cmhyd4，所述基因核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明专利技术通过CRISPR/Cas9基因编辑技术在蛹虫草基因组中敲除负调控蛹虫草子实体发育疏水蛋白基因Cmhyd4，从而创制蛹虫草高产菌株，既能提高蛹虫草的产量，又能避免转基因元件整合至基因组引起的食品安全性问题，为蛹虫草高产菌株选育提供了思路和实验依据，且与传统育种方式相比，本发明专利技术育种周期短，且实现了定向育种。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及菌种改造，更具体的说是涉及一种蛹虫草高产菌株及构建方法。

技术介绍

1、蛹虫草，又称为虫草、北冬虫夏草，是一种珍稀食药用真菌，具有较高的营养价值和保健功能，已成为我国及东南亚地区极其重要的食药用真菌。蛹虫草含有丰富的次级代谢产物，包括虫草素、虫草酸、类胡萝卜素、麦角甾醇、喷司他丁等，具有抗病毒、抗癌、免疫调节、降血糖等多种作用。

2、蛹虫草虽已实现工厂化栽培，但在生产过程中仍会出现产量低等问题。随着蛹虫草子实体发育机制的深入研究，蛹虫草疏水蛋白基因家族被证实参与调控蛹虫草子实体生长发育。其中，ⅰ型疏水蛋白编码基因cmhyd4缺失后，蛹虫草原基和子实体可正常发育，且单瓶子实体数目和生物学转化率显著高于野生型菌株。但所得菌株为农杆菌转化所得，抗性标签已保留在蛹虫草基因组中，存在食品安全问题，不符合《农业用基因编辑植物评审细则(试行)》要求。

3、因此，提供一种符合食品安全的蛹虫草高产菌株及构建方法与应用是本领域技术人员亟需解决的问题。

技术实现思路

1、蛹虫草crispr/c本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种蛹虫草高产菌株的构建方法，其特征在于，所述构建方法为通过CRISPR/Cas9无痕敲除蛹虫草Ⅰ型疏水蛋白编码基因Cmhyd4，所述基因核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。

2.根据权利要求1所述的一种蛹虫草高产菌株的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

3.根据权利要求2所述的一种蛹虫草高产菌株的构建方法，其特征在于，步骤S1所述的CRISPR/Cas9敲除Cmhyd4的sgRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。

4.根据权利要求2所述的一种蛹虫草高产菌株的构建方法，其特征在于，，步骤S2敲除的Cmhyd4所述上游同源臂核苷酸序列...

【技术特征摘要】

1.一种蛹虫草高产菌株的构建方法，其特征在于，所述构建方法为通过crispr/cas9无痕敲除蛹虫草ⅰ型疏水蛋白编码基因cmhyd4，所述基因核苷酸序列如seq id no:1所示。

2.根据权利要求1所述的一种蛹虫草高产菌株的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

3.根据权利要求2所述的一种蛹虫草高产菌株的构建方法，其特征在于，步骤s1所述的crispr/cas9敲除cmhyd4的sgrna的核苷酸序...

【专利技术属性】
技术研发人员：李肖，任慧慧，李守勉，李国杰，田景花，王俊玲，李明，
申请(专利权)人：河北农业大学，
类型：发明
国别省市：