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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及植物多糖提取,具体涉及一种高效提取植物多糖的方法。
技术介绍
1、多糖是植物的主要活性和指标成分之一,广泛存在于植物的各部位器官中,发展高效植物多糖提取技术是天然产物研究与开发的热点之一。目前植物多糖提取方法主要以水提取或结合微波、超声、亚临界、高速剪切、高压脉冲等手段辅助水提取,杜仲,属杜仲科杜仲属植物,它是一种滋补药材,在功能性食品和医药领域等方面有着较为广泛的应用,大量研究表明,杜仲叶中含有多种药效成分和营养成分,主要为黄酮类和多糖类化合物等化学成分,已有研究表明,杜仲叶多糖具有降压降脂降糖作用、抗肿瘤作用、抗骨质疏松作用。
2、在植物多糖提取物中,常会有无机盐、蛋白质、色素及小分子物质等杂质,会对后续的多糖纯化精制步骤产生不利影响,其中蛋白质分子量与多糖相似,难以分离,因此是多糖提取物中的主要杂质,也是多糖纯化的技术难点,目前常用的除蛋白方法主要有sevage法和酶法等,但是sevage法使用氯仿等有毒溶剂,酶法(多用进口果胶酶)成本高不适用工业化生产,且蛋白去除率一般都低于80%,即使超过80%的多糖损失率也较高,该损失率通常都在30%以上,且存在操作繁琐,费时长,部分方法存在有害溶剂残留等缺点。
3、如何改善杜仲植物多糖提取物中,常会有无机盐、蛋白质、色素及小分子物质等杂质,会对后续的多糖纯化精制步骤产生不利影响是本专利技术的关键,因此,亟需一种高效提取植物多糖的方法来解决以上问题。
技术实现思路
1、为了克服上述的技术问题,本专利
2、本专利技术的目的可以通过以下技术方案实现:
3、一种高效提取植物多糖的方法,包括以下步骤:
4、步骤一:将过40-50目筛的杜仲叶干粉、去离子水加入至单口烧瓶中,在温度为50-60℃,超声功率为350-400w的条件下超声处理25-50min,反应结束后将反应产物在离心速率为4500-6000r/min的条件下离心,取上层清液加入至乙醇溶液中进行醇沉,将沉淀物依次用无水乙醇以及丙酮洗涤2-3次,之后放置于真空干燥箱中,在温度为30-35℃的条件下干燥3-5h,得到植物粗多糖;
5、步骤二:将植物粗多糖、去离子水加入至安装有搅拌器、温度计的三口烧瓶中,在温度为60-70℃,搅拌速率为400-500r/min的条件下搅拌混合15-20min,之后用盐酸溶液调节ph为5.5-6.5,之后加入纯化吸附剂继续搅拌混合30-40min,反应结束后将反应产物冷却至室温,之后用磁铁除去纯化吸附剂,取上层清液加入至乙醇溶液中进行醇沉,将沉淀物用无水乙醇洗涤2-3次,之后放置于真空干燥箱中,在温度为25-35℃的条件下干燥6-8h,得到植物多糖。
6、作为本专利技术进一步的方案:步骤一中的所述杜仲叶干粉、去离子水的用量比为1g:15-30ml,所述乙醇溶液的体积分数为95%。
7、作为本专利技术进一步的方案:步骤二中的所述植物粗多糖、去离子水以及纯化吸附剂的用量比为10g:500-1000ml:0.1-1.0g,所述盐酸溶液的质量分数为15-20%,所述乙醇溶液的体积分数为95%。
8、作为本专利技术进一步的方案:所述纯化吸附剂由以下步骤制备得到:
9、a1:将硅藻土用蒸馏水洗涤3-5次,之后放置于真空干燥箱中,在温度为100-105℃的条件下干燥2-3h,之后研磨,过60-100目筛,得到预处理硅藻土;
10、a2:将预处理硅藻土加入至去离子水中,之后在温度为25-30℃,超声频率为45-55khz的条件下超声处理10-15min,分散均匀,得到硅藻土分散液;
11、a3:将多糖澄清剂、乙酸溶液加入至安装有搅拌器、温度计以及恒压滴液漏斗的三口烧瓶中,在温度为45-50℃,搅拌速率为400-500r/min的条件下搅拌混合20-30min,得到澄清剂溶液;
12、a4:将四氧化三铁加入至去离子水中,之后在温度为25-30℃,超声频率为45-55khz的条件下超声处理15-20min,分散均匀,得到磁流体;
13、a5:将硅藻土分散液、澄清剂溶液以及磁流体加入至安装有搅拌器、温度计的三口烧瓶中,在温度为60-70℃,搅拌速率为400-500r/min的条件下搅拌反应3-5h,反应结束后将反应产物冷却至室温,之后在离心速率为4500-6000r/min的条件下离心,将沉淀物用蒸馏水洗涤2-3次,之后放置于真空干燥箱中,在温度为60-65℃的条件下干燥3-5h,之后研磨,过60-100目筛,得到纯化吸附剂。
14、作为本专利技术进一步的方案:步骤a2中的所述预处理硅藻土、去离子水的用量比为1g:10-15ml。
15、作为本专利技术进一步的方案:步骤a3中的所述多糖澄清剂、乙酸溶液的用量比为3-5g:40-50ml,所述乙酸溶液的质量分数为2-3%。
16、作为本专利技术进一步的方案:步骤a4中的所述四氧化三铁、去离子水的用量比为1g:10-15ml。
17、作为本专利技术进一步的方案:步骤a5中的所述硅藻土分散液、澄清剂溶液以及磁流体的用量比为10-15ml:5-25ml:10-15ml。
18、作为本专利技术进一步的方案:所述多糖澄清剂由以下步骤制备得到:
19、b1:将邻氯苯胺、硫酸溶液加入至安装有搅拌器、温度计的三口烧瓶中,在温度为90-100℃,搅拌速率为400-500r/min的条件下搅拌反应30-40min,之后降温至25-30℃,之后加入多聚甲醛继续搅拌反应1-2h,之后边搅拌边升温至80-85℃,控制升温速率为1-2℃/min,之后恒温搅拌反应2-3h,反应结束后向反应产物中加入去离子水,保持温度为75-80℃,之后用氢氧化钠溶液调节ph为5-6,析出沉淀,之后真空抽滤,将滤饼用蒸馏水洗涤2-3次,之后放置于真空干燥箱中,在温度为60-65℃的条件下干燥2-3h,得到中间体1;
20、反应原理如下:
21、
22、b2:将中间体1、环氧氯丙烷、甲基异丁基甲酮以及去离子水加入至安装有搅拌器、温度计以及恒压滴液漏斗的三口烧瓶中,在温度为75-80℃,搅拌速率为400-500r/min的条件下搅拌反应8-10h,之后降温至30-40℃,之后边搅拌边逐滴加入苄基三乙基氯化铵溶液,控制滴加速率为1-2滴/s,之后边搅拌边逐滴加入氢氧化钠溶液,控制滴加速率为1-2滴/s,滴加完毕后升温至80-85℃的条件下继续搅拌反应1-2h,反应结束后将反应产物冷却至室温,静置分层,向有机相中通入二氧化碳至饱和,之后用氯化钠溶液洗涤2-3次,之后旋转蒸发去除溶剂,之后趁热过滤,收集滤液,得到中间体2;
23、反应原理如下:
24、
25、b3:将壳聚糖、乙本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种高效提取植物多糖的方法,其特征在于,包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的一种高效提取植物多糖的方法,其特征在于,步骤一中的所述杜仲叶干粉、去离子水的用量比为1g:15-30mL;步骤二中的所述植物粗多糖、去离子水以及纯化吸附剂的用量比为10g:500-1000mL:0.1-1.0g,所述盐酸溶液的质量分数为15-20%。
3.根据权利要求1所述的一种高效提取植物多糖的方法,其特征在于,所述纯化吸附剂由以下步骤制备得到:
4.根据权利要求3所述的一种高效提取植物多糖的方法,其特征在于,步骤A2中的所述预处理硅藻土、去离子水的用量比为1g:10-15mL;步骤A3中的所述多糖澄清剂、乙酸溶液的用量比为3-5g:40-50mL,所述乙酸溶液的质量分数为2-3%。
5.根据权利要求3所述的一种高效提取植物多糖的方法,其特征在于,步骤A4中的所述四氧化三铁、去离子水的用量比为1g:10-15mL;步骤A5中的所述硅藻土分散液、澄清剂溶液以及磁流体的用量比为10-15mL:5-25mL:10-15mL。
6.根据权利要求
7.根据权利要求6所述的一种高效提取植物多糖的方法,其特征在于,步骤B1中的所述邻氯苯胺、硫酸溶液、多聚甲醛以及去离子水的用量比为0.1mol:50-60mL:0.05-0.055mol:300-500mL,所述硫酸溶液的质量分数为25-30%,所述氢氧化钠溶液的质量分数为25-30%;步骤B2中的所述中间体1、环氧氯丙烷、甲基异丁基甲酮、去离子水、苄基三乙基氯化铵溶液以及氢氧化钠溶液的用量比为10mmol:40-50mmo l:80-100mL:25-35mL:18-26mL:25-30mL,所述苄基三乙基氯化铵溶液的质量分数为50-55%,所述氢氧化钠溶液的质量分数为35-40%。
8.根据权利要求6所述的一种高效提取植物多糖的方法,其特征在于,步骤B3中的所述壳聚糖、乙酸溶液、氢氧化钠溶液以及硫酸铜溶液的用量比为3g:12-15mL:150-200mL:20-30mL,所述乙酸溶液的质量分数为2-3%,所述氢氧化钠溶液的质量分数为10-15%,所述硫酸铜溶液的质量分数为8-10%;步骤B4中的所述中间体2、中间体3、去离子水、异丙醇以及氢氧化钠溶液的用量比为1-5mL:1g:20-25mL:3-5mL:3-5mL,所述氢氧化钠溶液的质量分数为5-10%;步骤B5中的所述中间体4、盐酸溶液的用量比为1g:15-20mL,所述盐酸溶液的摩尔浓度为1-1.2mol/L。
...【技术特征摘要】
1.一种高效提取植物多糖的方法,其特征在于,包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的一种高效提取植物多糖的方法,其特征在于,步骤一中的所述杜仲叶干粉、去离子水的用量比为1g:15-30ml;步骤二中的所述植物粗多糖、去离子水以及纯化吸附剂的用量比为10g:500-1000ml:0.1-1.0g,所述盐酸溶液的质量分数为15-20%。
3.根据权利要求1所述的一种高效提取植物多糖的方法,其特征在于,所述纯化吸附剂由以下步骤制备得到:
4.根据权利要求3所述的一种高效提取植物多糖的方法,其特征在于,步骤a2中的所述预处理硅藻土、去离子水的用量比为1g:10-15ml;步骤a3中的所述多糖澄清剂、乙酸溶液的用量比为3-5g:40-50ml,所述乙酸溶液的质量分数为2-3%。
5.根据权利要求3所述的一种高效提取植物多糖的方法,其特征在于,步骤a4中的所述四氧化三铁、去离子水的用量比为1g:10-15ml;步骤a5中的所述硅藻土分散液、澄清剂溶液以及磁流体的用量比为10-15ml:5-25ml:10-15ml。
6.根据权利要求3所述的一种高效提取植物多糖的方法,其特征在于,所述多糖澄清剂由以下步骤制备得到:
7.根据权利要求6所述的一种高效提取植物多糖的方法,其特...
【专利技术属性】
技术研发人员:朱志刚,朱微,
申请(专利权)人:江苏汉和日用品有限公司,
类型:发明
国别省市:
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