朝藿定C的用途制造技术

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及淫羊藿的提取物朝藿定c的用途，属于药物

技术介绍
淫羊藿为小檗科植物淫羊藿Epimedium brevicornum Maxim.和箭叶淫羊藿 E. sagittatum(S. et Z. )Maxim.或柔毛淫羊藿E . Pubescens Maxim.等的全草。是我国传统的 中药之一，对于淫羊藿及其提取物治疗骨质疏松症的作用，近几年有不少研究。如中国专利 03145167. 5公开了一种淫羊藿与雌激素组成的治疗绝经期后妇女骨质疏松症的复方制剂，公 开了淫羊藿及其提取物淫羊藿总黄酮可以用于治疗骨质疏松症。还有中国专利 200610065215. 7公开了一种主要活性成分为淫羊藿总黄酮的治疗骨质疏松的中药制剂。但是 淫羊藿总黄酮的成分包括朝藿定A、 B、 C等多种黄酮类成分，而目前，药典要求的淫羊藿药 材的指标性成分仅为淫羊藿苷。对于淫羊藿总黄酮的哪种成分起到治疗骨质疏松的主要作用 ，治疗效果更好，并没有相关报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种朝藿定C的新用途。朝藿定C对于骨质疏松症有显著的疗效朝藿定C的制备方法。(1)提取工艺取淫羊藿药材，切成断，加20倍70%乙醇回流3次 ，每次lh，合并三次的提取液，回收乙醇，并浓縮成6(TC时相对密度为1. 15。浓縮液加蒸馏 水适量放置，弃沉淀，取上清液，再浓縮得浸膏。依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取至近 无色，再用正丁醇反复萃取至近无色，回收正丁醇至干，即得到含朝藿定C的粗浸膏。(2) 分离工艺① 硅胶柱色谱的分离将上述所得粗浸膏用甲醇溶解，薄层色谱用硅胶拌样，硅胶柱色谱分离，以氯仿甲醇 (100:17， 100:20， 100:22)梯度洗脱，以硅胶预制板跟踪检识，展开系统为氯仿甲醇= 100:20，收集硅胶预制板TLC上Rf值小于淫羊藿苷的斑点流份，回收溶剂后，即得朝藿定C粗品。② 聚酰胺柱色谱的分离朝藿定C粗品用甲醇溶解，柱色谱用聚酰胺拌样，聚酰胺柱色谱分离，以乙酸乙酯甲醇:水(8:1:0， 8:1 :0.2)梯度洗脱，以聚酰胺薄膜跟踪检识，展开系统为乙酸乙酯乙醇:水 =8:1:1，收集聚酰胺薄膜TLC上Rf值大于淫羊藿苷的斑点流份，回收溶剂后，即得朝藿定C >朝藿定C的纯度为89 99呢。本专利技术的技术方案。朝藿定C在制备治疗骨质疏松药物中的用途。朝藿定C的分子式是这样的OCH3朝藿定C在制备治疗骨质疏松口服剂药物中的用途。朝藿定c在制备治疗骨质疏松注射剂药物中的用途。为了证明本专利技术的效果，申请人对朝藿定c与淫羊藿及其提取物进行了药理试验研究，具体如下试验一 朝藿定C与淫羊藿及其提取物的对比试验 1、材料与方法 1. l实验材料 1. 1. l实验动物KM种小鼠，雌性，4周龄，体重20 22g; —级实验动物，由贵阳医学院实验动物中心提 供，合格证SCXK (黔)2002 — 0001。 1.1.2药物与试剂淫羊藿(Epimedium brevicornum Maxim.):由中国医学科学院药用植物研究所郭宝 林研究员鉴定。lg浸膏相当于生药量6.28g。给药以生药量计。淫羊藿总黄酮 由中国医学科学院药用植物研究所郭宝林研究员提供。 朝藿定C纯度89。/。 由中国医学科学院药用植物研究所郭宝林研究员提供。 淫羊藿苷南京崇原生物科技有限公司批号20070501 己烯雌酚合肥久联制药有限公司 批号20060518。 1.1.3主要仪器及设备LUNAR骨密度仪一美国通用电气有限公司；AB104-S梅特勒一托利多电子分析天平梅 特勒一托利多仪器(上海)有限公司；北京杰伟世视音频设备有限公司；小鼠骨质挠度测试 仪一 (自制)；A0-820型轮动式切片机一美国。BI-2000医学图像分析系统北京杰伟世视 音频设备有限公司1.2实验方法昆明雌性小鼠235只，体重20-22克。用0.4%戊巴比妥钠0. lmg/10g腹腔麻醉。无菌条件 下切除卵巢造模，对照组动物切除卵巢旁部分脂肪保留卵巢。 一月后取对照组和模型组各3 只动物用美国LUNAR骨密度仪检测，确认造模成功。其后将造模小鼠分为模型(等容积常 水)、己稀雌酚(2mg/kg)、淫羊藿超高剂量(400mg/kg)、淫羊藿高剂量(200mg/kg)、 淫羊藿中剂量(100mg/kg)、淫羊藿低剂量(50mg/kg)、淫羊藿总黄酮高剂量(20mg/kg) 、淫羊藿总黄酮中剂量(10mg/kg)、淫羊藿总黄酮低剂量(5mg/kg)、朝藿定C高剂量( 20mg/kg)、朝藿定C中剂量(10mg/kg)、朝藿定C低剂量(5mg/kg)、淫羊藿苷高剂量(20 mg/kg)、淫羊藿苷中剂量(10mg/kg)、淫羊藿苷低剂量(5mg/kg) 15组，加上对照组(等 容积常水)，实验动物共分为16个组。各组动物按各自药物和剂量灌胃给药，每日一次，连 续给药两个月，停药后次日，用LUNAR骨密度仪测骨密度；称取体重，脱颈椎处死动物，取 左股骨于小鼠骨挠度测试仪上对其施压，以股骨断裂时所承受的最大载荷和最大挠度为判断 其机械强度的指标；取约O. 7cm长含股骨头的右侧股骨常规脱钙，石蜡包埋切片，片厚4ym ，HE染色，以BI-2000医学图像分析系统进行骨组织形态学观察，计量①骨小梁平均宽度 ;②骨皮质平均厚度；③相对骨体积；④成骨细胞数；⑤破骨细胞数。实验数据用以均数±标准差± ^表示，采用Excel2000作Student-t检验。2、结果2. 1去卵巢后36天对造模成功的判断与对照组比较，模型组小鼠骨密度大幅度降低，可以判断为造模基本成功(表l)。 表l去卵巢后36天对造模抽样小鼠骨密度的影响^= ±力<table>table see original document page 6</column></row><table>2. 2给药两个月对去卵巢小鼠骨相关指标的影响 2.2. 1对骨密度的影响与对照组比较，模型组小鼠脊柱骨密度和全身骨密度均明显下降；与模型组比较，各每 药组小鼠脊柱骨密度和全身骨密度均增高，差异显著(P<0.05、 P<0.01;表2)。 表2对小鼠骨密度的影响^ ± ^_<table>table see original document page 6</column></row><table>注与模型组比较* <0. 05， **P<0. 01 (下同)。 2.2.2对骨生物力学的影响与对照组比较，模型组小鼠的最大载荷和最大挠度均明显下降，与模型组比较，各给药 组小鼠最大载荷和最大挠度均明显提高，差异显著(P<0.01;表3)。 表3对小鼠股骨机械强度的影响(f<table>table see original document page 7</column></row><table>2.2.3对骨组织形态学的影响与对照组比较，模型组小鼠骨小梁平均宽度变窄、相对骨体积变小、骨皮质平均厚度减 小、成骨细胞数明显减少，破骨细胞数明显增高，差异显著(P<0.05、 p<0.01)本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王晓春，周宁，冯泽熹，杨昌生，罗敏，张贵林，张金娟，郭宝林，韦莹，曾香兰，
申请(专利权)人：贵州同济堂制药有限公司，
类型：发明
国别省市：52[中国|贵州]