含细胞膜组分的DNA框架囊泡复合结构通用制备方法及应用于构建仿病毒纳米载体技术

本发明专利技术公开了一种含细胞膜组分的DNA框架囊泡复合结构通用制备方法及应用于构建仿病毒纳米载体。本发明专利技术利用DNA框架在其内部重构含细胞膜碎片的脂质体，充分利用了DNA框架与细胞膜碎片的优良性能，设计了一种在结构上高度仿生、在功能上高度灵活的复合纳米载体；并将新冠病毒的Spike和ORF3a蛋白修饰于DNA框架‑脂质体复合纳米载体中，模仿新冠病毒的细胞侵染机制，利用两种蛋白的协同作用，增强了纳米载体的内吞和溶酶体逃逸能力，显著提高了siRNA的细胞内递送效率，具有广泛的应用前景。本发明专利技术可以获得含任何功能性膜蛋白的细胞膜碎片，赋予DNA框架‑脂质体复合纳米载体特定功能，在药物递送领域具有广阔的普适性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及含细胞膜组分的dna框架囊泡复合结构通用制备方法及应用于构建仿病毒纳米载体，属于生物医药与dna纳米。

技术介绍

1、仿病毒纳米载体（virus-mimicking nanocarriers）是一种通过模仿病毒在宿主细胞内的识别、内吞和递送机制来设计的纳米材料，旨在提高药物递送系统的效率。病毒因其高效的细胞内递送能力和特异性的细胞识别能力而成为纳米载体设计的灵感来源。这类纳米载体通过仿照病毒的外壳、表面蛋白、核酸包裹机制等特点，力图实现高效的药物传递，特别是在基因治疗、疫苗递送和癌症治疗等领域。

2、仿病毒纳米载体的研究起源可以追溯到20世纪末，早期的载体虽然在一定程度上展示了其潜力，但在递送效率和安全性方面仍存在明显的局限性，例如非特异性毒性和低递送效率。随着研究的深入，仿病毒纳米载体的设计逐渐变得更加复杂和精细。例如，研究者们开发了能够在特定条件下响应性释放药物的载体，或者利用肿瘤微环境中的特定酶来触发药物释放。还可以通过病毒壳体的蛋白质自组装特性，可以设计出具有高度仿生特性的纳米材料，这些新一代的仿病毒载体不仅在结构上更接近本文档来自技高网...

【技术保护点】

1. 一种含细胞膜组分的DNA框架囊泡复合纳米载体的通用制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1：使用DNA纳米结构设计软件构建足球状DNA框架结构；步骤2：使用M13噬菌体基因组中的长链ssDNA模板p7560作为DNA框架结构的骨架，然后，设计与之互补的订书钉链，所述长链ssDNA模板和订书钉链经过退火处理，碱基配对自组装得到足球状DNA框架并进行分离纯化，得到纯化的DNA框架；步骤3：将纯化的DNA框架通过内部Handle链与胆固醇修饰的seed链进行杂交，并与磷脂、细胞膜碎片及表面活性剂辛基葡萄糖苷混合，在seed链胆固醇的指导下，主要成分为脂质双分子层的细胞膜碎片与磷脂相互融...

【技术特征摘要】

1. 一种含细胞膜组分的dna框架囊泡复合纳米载体的通用制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1：使用dna纳米结构设计软件构建足球状dna框架结构；步骤2：使用m13噬菌体基因组中的长链ssdna模板p7560作为dna框架结构的骨架，然后，设计与之互补的订书钉链，所述长链ssdna模板和订书钉链经过退火处理，碱基配对自组装得到足球状dna框架并进行分离纯化，得到纯化的dna框架；步骤3：将纯化的dna框架通过内部handle链与胆固醇修饰的seed链进行杂交，并与磷脂、细胞膜碎片及表面活性剂辛基葡萄糖苷混合，在seed链胆固醇的指导下，主要成分为脂质双分子层的细胞膜碎片与磷脂相互融合，之后通过透析和等密度离心进行分离和纯化，即得到含细胞膜组分的dna框架囊泡复合纳米载体；所述磷脂的组成包括 dopc、dope、胆固醇、peg2k-pe和rho-pe。

2. 如权利要求1所述的通用制备方法，其特征在于，所述足球状dna框架结构为截顶正二十面体结构；和/或，所述磷脂和细胞膜碎片的配比为1 mm磷脂：0.2~0.4 mg/ml细胞膜碎片；和/或，所述磷脂的组成包括34~38% dopc、48~52% dope、8~12% 胆固醇、1~3% peg2k-pe和1~3% rho-pe。

3. 如权利要求1所述的通用制备方法，其特征在于，所述磷脂和细胞膜碎片的配比为1mm磷脂：0.2 mg/ml细胞膜碎片；和/或，所述磷脂的组成包括36% dopc、50% dope、10% 胆固醇、2% peg2k-pe和2% rho-pe；和/或，所述透析的过程...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨洋，鲍敏，施茜，杨邱澜，黄奎，
申请(专利权)人：上海交通大学医学院附属仁济医院，
类型：发明
国别省市：