协调大肠杆菌代谢途径高效合成L-丙氨酸的方法技术

本发明专利技术公开了协调大肠杆菌代谢途径高效合成L‑丙氨酸的方法，属于生物工程领域。本发明专利技术删除乙酸合成代谢途径；将丙酮酸感应葡萄糖代谢调控系统用于调控大肠杆菌L‑丙氨酸合成，有效缓解了葡萄糖过速代谢；并通过弱化三羧酸循环提升L‑丙氨酸合成量，在5L发酵罐中L‑丙氨酸产量可达195.2g/L。本发明专利技术提供的方法有助于降低成本，促进L‑丙氨酸的大规模发酵生产，具有很好的工业应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及协调大肠杆菌代谢途径高效合成l-丙氨酸的方法，属于生物工程领域。

技术介绍

1、l-丙氨酸是一种非必需氨基酸，是美国食品药品监督管理局批准的食品添加剂和营养补充剂，被广泛应用于医疗保健行业，还可用作低热量甜味剂和化妆品中的皮肤与头发护理剂等。此外，l-丙氨酸在工业领域也有巨大的应用潜力，其最吸引人的用途是作为生产二羧甲基丙氨酸三钠(mgda)的重要原料之一。mgda是一种新型的绿色螯合剂，具有优异的性能，适用于多种清洁产品，l-丙氨酸成本的降低大大加速了mgda的发展。此外，l-丙氨酸在生产生物可降解和生物相容性聚合物(如聚酯酰胺)和工程热塑性塑料(如聚酰胺)方面也显示出巨大的潜力。

2、大肠杆菌(escherichia coli)营养需求简单，可利用廉价的培养基生长并易获得高密度菌体，具有发酵周期短、发酵产量高和生产强度高等优点。同时，e.coli遗传背景清晰，基因工程操作手段成熟。由于l-丙氨酸对大肠杆菌的生长、代谢有显著的抑制作用，过高浓度的l-丙氨酸会抑制菌体生长及产物合成，专利技术人前期开发了一种温度控制开关，使菌体生长本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种L-丙氨酸生产能力提高且副产物积累量降低的重组大肠杆菌，其特征在于，在出发菌株的基础上具有如下至少一种改进：

2.根据权利要求1所述的重组大肠杆菌，其特征在于，所述出发菌株为大肠杆菌B0016-060BC。

3.根据权利要求1或2任一所述的重组大肠杆菌，其特征在于，基因eutD的核苷酸序列如Gene ID:946940所示；基因mgsA的核苷酸序列如Gene ID:945574所示；基因lpdA的核苷酸序列如Gene ID:944854所示。

4.一种提高大肠杆菌L-丙氨酸产量并降低乙酸产量的方法，其特征在于，对具有L-丙氨酸生产能力的重组大肠...

【技术特征摘要】

1.一种l-丙氨酸生产能力提高且副产物积累量降低的重组大肠杆菌，其特征在于，在出发菌株的基础上具有如下至少一种改进：

2.根据权利要求1所述的重组大肠杆菌，其特征在于，所述出发菌株为大肠杆菌b0016-060bc。

3.根据权利要求1或2任一所述的重组大肠杆菌，其特征在于，基因eutd的核苷酸序列如gene id:946940所示；基因mgsa的核苷酸序列如gene id:945574所示；基因lpda的核苷酸序列如gene id:944854所示。

4.一种提高大肠杆菌l-丙氨酸产量并降低乙酸产量的方法，其特征在于，对具有l-丙氨酸生产能力的重组大肠杆菌进行如下至少一种改进：

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述降低磷酸转乙酰酶的表达包括但不限于敲除磷酸转乙酰酶编码基因eutd。

6.根据...

【专利技术属性】
技术研发人员：周丽，陈献忠，李金阳，叶吴越，赵甜甜，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：