【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于酵母菌基因工程技术和蛋白表达,涉及到一种基于pet水解酶(petase)重组dna高效表达载体的构建、制备、活性验证及其在pet塑料降解中的应用。
技术介绍
1、塑料因具有质量轻、成本低等一系列优点,成为全球工业生产和人们日常生活中最重要的基础材料,被广泛应用于各行业。据统计,2019年,全球塑料产量达到了3.68亿吨,预计到2040年,行业规模将进一步增加一倍,达到每年8亿吨。全球范围内,79%的塑料垃圾通过填埋或成为海洋和陆地垃圾进入了环境,12%被焚烧,仅9%被回收利用。而32%将会从收集系统中逃脱,每年至少有800万吨塑料进入海洋,产生微塑料等有机细小颗粒,导致许多物种濒临灭绝,对全球生态环境及生物健康造成严重损害。
2、聚对苯二甲酸乙酯(polyethylene terephthalate,pet)是最常见的塑料材料之一,据调查统计,全球范围内每分钟会售出100万个由pet材质合成的塑料瓶,pet产量约占全球塑料产量的1/5。虽然pet仅为pta和mhet两个简单单体通过酯键连接而成的聚合物,但该酯键
...【技术保护点】
1.一种用于DuraPETase蛋白高效表达的重组毕赤酵母GS115工程菌株的构建方法,其特征在于:包含有材料的准备与方法及结果分析;
2. 根据权利要求1所述的一种用于DuraPETase蛋白高效表达的重组毕赤酵母GS115工程菌株的构建方法,其特征为:所述菌株的保存与培养是大肠杆菌(Eschrichia coli)菌株DH5a于LB培养液摇菌后保存成20%的甘油菌于-80℃冷冻保存,毕赤酵母(Pichiapastoris)菌株GS115于YPD培养液摇菌后保存成30%的甘油菌于-80℃冷冻保存,大肠杆菌于37℃培养箱中培养,毕赤酵母于28℃培养箱中培养
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【技术特征摘要】
1.一种用于durapetase蛋白高效表达的重组毕赤酵母gs115工程菌株的构建方法,其特征在于:包含有材料的准备与方法及结果分析;
2. 根据权利要求1所述的一种用于durapetase蛋白高效表达的重组毕赤酵母gs115工程菌株的构建方法,其特征为:所述菌株的保存与培养是大肠杆菌(eschrichia coli)菌株dh5a于lb培养液摇菌后保存成20%的甘油菌于-80℃冷冻保存,毕赤酵母(pichiapastoris)菌株gs115于ypd培养液摇菌后保存成30%的甘油菌于-80℃冷冻保存,大肠杆菌于37℃培养箱中培养,毕赤酵母于28℃培养箱中培养。
3.根据权利要求1所述的一种用于durapetase蛋白高效表达的重组毕赤酵母gs115工程菌株的构建方法,其特征为:所述大肠杆菌感受态的制备包含以下步骤:
4.根据权利要求1所述的一种用于durapetase蛋白高效表达的重组毕赤酵母gs115工程菌株的构建方法,其特征为:所述大肠杆菌感受态的转化的...
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