【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及干细胞修复再生、抗炎、免疫调节，特别是涉及一种人脐带间充质干细胞三维培养来源外泌体及其制备方法与应用。
技术介绍
1、自身免疫性皮肤病是一类由免疫系统异常反应所引起的皮肤疾病，其特点是免疫系统错误地攻击自身的皮肤细胞或组织，从而引发炎症和损伤。这类疾病包括银屑病、红斑狼疮、白癜风、硬皮病、皮肌炎和斑秃等多种类型。随着医学研究的深入，科学家们正在积极开发新的治疗策略，例如干细胞疗法、基因疗法和靶向治疗，旨在为患者提供更为有效且个性化的治疗方案。白癜风是一种常见的以表皮和/或黏膜黑素细胞破坏为特征的色素脱失性疾病。全球发病率高，且逐年上升。由于白癜风的发病机制不明，治疗疗效不佳，给患者家庭及社会造成了沉重的负担。近年来，我们国内及国际同行研究发现，白癜风中氧化应激是诱发黑素细胞损伤的初始环节，异常自身免疫是导致黑素细胞进一步破坏的关键因素。
2、目前，缺乏同时抗氧化和免疫抑制的有效治疗手段。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供一种人脐带间充质干细胞三维培养来源外泌体及其制备方法与应用，以解决上述现有技术存在的问题。本专利技术提供一种针对自身免疫性皮肤病的新治疗手段，以白癜风为例。特别是针对氧化应激和自身免疫反应这两个白癜风发病的关键环节。并且通过实验发现，与传统的二维培养相比，三维培养的humscs来源的外泌体(3d-exos)具有更高的产量和更强的生物活性，包括抗氧化、抗凋亡和免疫抑制作用。
2、为实现上述目的，本专利技术提供了如下方案：<...
【技术保护点】
1.一种人脐带间充质干细胞三维培养来源外泌体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述采集新生儿脐带来源的间充质干细胞的方法包括：新生儿脐带去除血液、血管组织，剪碎后进行组织块贴壁培养即可。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述三维培养的培养方法，包括：
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述离心的条件为800rpm离心5min；所述MSCBM培养基中含0.1％青/链霉素和EliteGro因子。
5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述细胞悬液中的细胞浓度为2×105/mL；所述三维培养的条件包括：37℃、5％CO2培养48h。
6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述差速超高速离心法提取三维培养的间充质干细胞来源外泌体的方法包括：收集三维培养的人脐带间充质干细胞来源的上清液，首先800g，5min，4℃，收集上清液；2000g，30min，4℃，收集上清液；20000g，30min，4℃，收集上清液；100000g，120mi
7.如权利要求1-6任一项所述制备方法制备得到的人脐带间充质干细胞三维培养来源外泌体。
8.如权利要求7所述人脐带间充质干细胞三维培养来源外泌体在制备治疗自身免疫性皮肤病的药物中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述自身免疫性皮肤病包括白癜风。
10.一种治疗自身免疫性皮肤病的药物，其特征在于，包括权利要求7所述人脐带间充质干细胞三维培养来源外泌体。
...【技术特征摘要】
1.一种人脐带间充质干细胞三维培养来源外泌体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述采集新生儿脐带来源的间充质干细胞的方法包括：新生儿脐带去除血液、血管组织，剪碎后进行组织块贴壁培养即可。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述三维培养的培养方法，包括：
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述离心的条件为800rpm离心5min；所述mscbm培养基中含0.1％青/链霉素和elitegro因子。
5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述细胞悬液中的细胞浓度为2×105/ml；所述三维培养的条件包括：37℃、5％co2培养48h。
6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述差速超高速离心法提取三维培养的间充质干细胞来源外泌体的方法包括：收集三维培养的人脐带间充质干细胞来...
【专利技术属性】
技术研发人员：坚哲，王琪，郭伟楠，李春英，
申请(专利权)人：中国人民解放军空军军医大学，
类型：发明
国别省市：
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