香榧TgGPAT6基因、克隆筛选方法及调控植物油脂积累中的应用技术

本发明专利技术公开了一种香榧TgGPAT6基因、克隆筛选方法及调控植物油脂积累中的应用。本发明专利技术从香榧转录组中筛选出可能调控油脂积累的TgGPAT基因，瞬时烟草实验证明TgGPAT基因在可以提高植物叶片中的含油量，能够应用于香榧的定向品质遗传改良和培育新的优良种质，拓宽了香榧遗传资源的理由范围，为香榧的优良品种培育提供了候选基因，也为深入研究GPAT调控油脂积累的相关机制奠定基础。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及遗传工程，特别涉及一种香榧tggpat基因的克隆筛选方法及提高果实果糖含量的应用。

技术介绍

1、香榧作为我国特有的珍贵干果，是榧树中的优良变异类型经人工选育后嫁接繁殖栽培的优良品种。香榧子含有丰富的油脂、蛋白质、多种微量元素及维生素，炒熟后香酥甘醇，风味独特，品质甚佳。同时香榧油具有降血脂，降低血清胆固醇、软化血管，保护肠胃，抗氧化等功效，具有极高的营养价值。研究香榧果实油脂积累的分子机制，对于培育香榧果实品质有着重要意义。目前认为，植物油脂的积累通常分为3个阶段；首先，在质体中进行脂肪酸的从头合成、去饱和，并被外运到细胞质；其次，在内质网中进行脂肪酸修饰，然后通过kennedy途径(或pc途径)组装tag，最后tag在油体(或脂滴)中稳定储存。因此，寻找调控油脂积累途径上的关键酶是目前香榧优良品质选育的研究重点之一。

技术实现思路

1、本专利技术的目的在于，提供一种香榧tggpat6基因、克隆筛选方法及调控植物油脂积累中的应用。本专利技术在香榧中发现的tggpat6基因可以直接调控植物油脂，本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种香榧TgGPAT基因，其特征在于：该基因的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO.1所示。

2.一种如权利要求1所述的香榧TgGPAT基因的克隆筛选方法，其特征在于：首先从香榧种仁中提取总RNA测转录组，经过拼接得到香榧的转录组；再将高质量reads与拼接的转录组比对，并计算基因的表达量；然后计算不同分组样品中的差异表达基因，并对差异基因进行注释和富集分析；最后通过基因组序列进行比对后，设计引物，同源克隆获得TgGPAT的编码区序列；

3.根据权利要求2所述的香榧TgGPAT基因的克隆筛选方法，其特征在于：所述克隆筛选方法还包括亚细胞定位；所述亚细胞定位的...

【技术特征摘要】

1.一种香榧tggpat基因，其特征在于：该基因的核苷酸序列如序列表中seq id no.1所示。

2.一种如权利要求1所述的香榧tggpat基因的克隆筛选方法，其特征在于：首先从香榧种仁中提取总rna测转录组，经过拼接得到香榧的转录组；再将高质量reads与拼接的转录组比对，并计算基因的表达量；然后计算不同分组样品中的差异表达基因，并对差异基因进行注释和富集分析；最后通过基因组序列进行比对后，设计引物，同源克隆获得tggpat的编码区序列；

3.根据权利要求2所述的香榧tggpat基因的克隆筛选方法，其特征在于：所述克隆筛选方法还包括亚细胞定位；所述亚细胞定位的过程是将tggpat基因的全长编码区序列克隆在gfp1300载体上，空载为对照；质粒通过冻融法转化到农杆菌中；然后过夜培养至od600约为0.8，离心加入等体积缓冲液重悬后，膜maker、基因和p19按3：3：2比例混合，用不含针头的注射器顶部按压的叶片背面，注射到烟草叶背，约72h后用激光共聚焦显微镜观察。

4.根据权利要求2所述的香榧tggpat基因的克隆筛选方法，其特征在于：所述克隆筛选方法还...

【专利技术属性】
技术研发人员：俞晨良，陈娟霞，谢前丹，姜郑楚，吴家胜，喻卫武，
申请(专利权)人：浙江农林大学，
类型：发明
国别省市：